利用反義maka啉環(huán)寡核苷酸(Morpholino)特異性阻斷mRNA的翻譯或正確剪切,,從而降低基因的表達(dá)水平,,用于胚胎早期發(fā)育中基因功能研究,;利用CRISPR/Cas9技術(shù)特異性地瞬時破壞基因的編碼序列,,從而降低基因蛋白產(chǎn)物的表達(dá)水平來研究基因的功能,,用于各個階段的基因功能研究,。破壞該基因正常表達(dá),主要用于在動物模型中研究基因的功能等,。定點插入外源核酸片段,,用于標(biāo)記基因的精細(xì)表達(dá)模式,、破壞該基因正常表達(dá)、構(gòu)建點突變,、實現(xiàn)時間空間上控制基因表達(dá)等,。斑馬魚的脂肪組織可儲存能量,在食物短缺時供能,。斑馬魚pdx模型
斑馬魚功效評價體系●基于表型對斑馬魚的一些臟器或細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察,,進(jìn)而評估功效,如血管,、腸道,、卵黃囊、神經(jīng),、中性粒細(xì)胞與紅細(xì)胞等●基于生化指標(biāo)通過染色,、試劑盒等方法對功效進(jìn)行測試,如ROS染色,、脂肪染色或酶含量檢測等●基于分子生物學(xué)通過PCR的方法對特定基因的表達(dá)水平進(jìn)行定量,,也可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)的實驗●基于行為學(xué)通過對斑馬魚的運動情況對一些功效進(jìn)行評價,如睡眠,、緩解體力疲勞,、改善記憶等斑馬魚安全評價體系●胚胎毒性檢測將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常劣質(zhì)產(chǎn)品會誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡斑馬魚可監(jiān)測水質(zhì)環(huán)境一些化學(xué)物質(zhì)會干擾斑馬魚的內(nèi)分泌系統(tǒng)正常功能。
斑馬魚安全評價體系●胚胎毒性檢測:(1)將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h,;(2)質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常,;(3)劣質(zhì)產(chǎn)品會誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡?!窦毙远拘院桶衞rgan毒性檢測:(1)更適用于產(chǎn)品安全風(fēng)險的深入評價和風(fēng)險物質(zhì)的評估,;(2)可以識別毒性風(fēng)險作用在哪種organ上;(3)刺激性和致敏性風(fēng)險篩查,?!衤远拘詸z測:(1)將綠色熒光蛋白(諾貝爾獎技術(shù))與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合,獲得了能夠檢測類雌jisu污染物的轉(zhuǎn)基因斑馬魚,;(2)轉(zhuǎn)基因斑馬魚可以識別類雌jisu物質(zhì)并發(fā)出熒光,。●快速檢測:(1)開發(fā)“小硬件+大后臺”現(xiàn)場快檢體系,;(2)基于斑馬魚的行為學(xué)對急性食物中毒風(fēng)險進(jìn)行控制,;(3)檢測時間應(yīng)控制在1小時,適用于餐飲單位,。
斑馬魚安全評價體系●急性毒性和靶organ毒性檢測更適用于產(chǎn)品安全風(fēng)險的深入評價和風(fēng)險物質(zhì)的評估可以識別毒性風(fēng)險作用在哪種organ上刺激性和致敏性風(fēng)險篩查●慢性毒性檢測將綠色熒光蛋白(諾貝爾獎技術(shù))與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合,,獲得了能夠檢測類雌jisu污染物的轉(zhuǎn)基因斑馬魚轉(zhuǎn)基因斑馬魚可以識別類雌jisu物質(zhì)并發(fā)出熒光●快速檢測開發(fā)“小硬件+大后臺”現(xiàn)場快檢體系基于斑馬魚的行為學(xué)對急性食物中毒風(fēng)險進(jìn)行控制檢測時間應(yīng)控制在1小時,適用于餐飲單位許多藥物研發(fā)初期,會以斑馬魚為模型,,測試藥物毒性與功效,。
斑馬魚通體透明,胚胎發(fā)育全程肉眼可視,,但要精細(xì)追蹤C(jī)dx基因表達(dá)細(xì)胞軌跡,、實時洞悉其功能動態(tài),,熒光標(biāo)記技術(shù)不可或缺,。通過基因融合手段,將熒光蛋白基因(如綠色熒光蛋白GFP,、紅色熒光蛋白RFP)與Cdx基因相連,,構(gòu)建重組基因?qū)氚唏R魚胚胎。發(fā)育進(jìn)程中,,表達(dá)Cdx基因的細(xì)胞同步表達(dá)熒光蛋白,,在熒光顯微鏡下熠熠生輝??蒲腥藛T借此可觀察到Cdx基因在胚胎早期哪些細(xì)胞里率先jihuo,,例如在中胚層、內(nèi)胚層分化起始階段,,熒光標(biāo)記的Cdx陽性細(xì)胞呈現(xiàn)有序遷移,、聚集規(guī)律,宛如夜空中閃爍移動的星群,,精細(xì)勾勒細(xì)胞分化路線,。其血液在體內(nèi)循環(huán),運輸氧氣,、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物,。斑馬魚衰老模型制備
幼魚時期的斑馬魚生長迅速,幾天內(nèi)身體形態(tài)就有明顯變化,。斑馬魚pdx模型
斑馬魚與人類在基因水平上具有較高的相似度,,許多人類疾病相關(guān)的基因在斑馬魚中也有保守存在。因此,,斑馬魚實驗在人類疾病研究中具有重要的應(yīng)用價值,。在心血管疾病研究方面,斑馬魚的心臟結(jié)構(gòu)和功能與人類心臟有一定的相似性,。通過誘導(dǎo)斑馬魚產(chǎn)生心血管系統(tǒng)的基因突變或使用藥物處理,,可以模擬人類心血管疾病的發(fā)生過程,如先天性心臟病,、心肌病等,。研究人員可以觀察斑馬魚心臟的形態(tài)變化、心率異常以及血管的發(fā)育缺陷等表型,進(jìn)而探究疾病的發(fā)病機(jī)制,,并篩選潛在的醫(yī)療藥物,。例如,一些研究發(fā)現(xiàn)特定的化合物能夠改善斑馬魚因基因突變導(dǎo)致的心臟功能障礙,,這為開發(fā)醫(yī)療人類心血管疾病的新藥提供了線索,。斑馬魚pdx模型