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利用反義maka啉環(huán)寡核苷酸(Morpholino)特異性阻斷mRNA的翻譯或正確剪切,從而降低基因的表達(dá)水平,,用于胚胎早期發(fā)育中基因功能研究,;利用CRISPR/Cas9技術(shù)特異性地瞬時(shí)破壞基因的編碼序列,從而降低基因蛋白產(chǎn)物的表達(dá)水平來研究基因的功能,,用于各個(gè)階段的基因功能研究,。破壞該基因正常表達(dá),主要用于在動(dòng)物模型中研究基因的功能等,。定點(diǎn)插入外源核酸片段,,用于標(biāo)記基因的精細(xì)表達(dá)模式、破壞該基因正常表達(dá),、構(gòu)建點(diǎn)突變,、實(shí)現(xiàn)時(shí)間空間上控制基因表達(dá)等。斑馬魚的脂肪組織可儲(chǔ)存能量,,在食物短缺時(shí)供能,。斑馬魚pdx模型
斑馬魚功效評(píng)價(jià)體系●基于表型對(duì)斑馬魚的一些臟器或細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察,進(jìn)而評(píng)估功效,,如血管,、腸道、卵黃囊,、神經(jīng),、中性粒細(xì)胞與紅細(xì)胞等●基于生化指標(biāo)通過染色、試劑盒等方法對(duì)功效進(jìn)行測試,,如ROS染色,、脂肪染色或酶含量檢測等●基于分子生物學(xué)通過PCR的方法對(duì)特定基因的表達(dá)水平進(jìn)行定量,也可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)的實(shí)驗(yàn)●基于行為學(xué)通過對(duì)斑馬魚的運(yùn)動(dòng)情況對(duì)一些功效進(jìn)行評(píng)價(jià),,如睡眠,、緩解體力疲勞、改善記憶等斑馬魚安全評(píng)價(jià)體系●胚胎毒性檢測將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常劣質(zhì)產(chǎn)品會(huì)誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡斑馬魚可監(jiān)測水質(zhì)環(huán)境一些化學(xué)物質(zhì)會(huì)干擾斑馬魚的內(nèi)分泌系統(tǒng)正常功能,。
斑馬魚安全評(píng)價(jià)體系●胚胎毒性檢測:(1)將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h,;(2)質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常;(3)劣質(zhì)產(chǎn)品會(huì)誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡,?!窦毙远拘院桶衞rgan毒性檢測:(1)更適用于產(chǎn)品安全風(fēng)險(xiǎn)的深入評(píng)價(jià)和風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)的評(píng)估,;(2)可以識(shí)別毒性風(fēng)險(xiǎn)作用在哪種organ上;(3)刺激性和致敏性風(fēng)險(xiǎn)篩查,?!衤远拘詸z測:(1)將綠色熒光蛋白(諾貝爾獎(jiǎng)技術(shù))與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合,獲得了能夠檢測類雌jisu污染物的轉(zhuǎn)基因斑馬魚,;(2)轉(zhuǎn)基因斑馬魚可以識(shí)別類雌jisu物質(zhì)并發(fā)出熒光,。●快速檢測:(1)開發(fā)“小硬件+大后臺(tái)”現(xiàn)場快檢體系,;(2)基于斑馬魚的行為學(xué)對(duì)急性食物中毒風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行控制,;(3)檢測時(shí)間應(yīng)控制在1小時(shí),適用于餐飲單位,。
斑馬魚安全評(píng)價(jià)體系●急性毒性和靶organ毒性檢測更適用于產(chǎn)品安全風(fēng)險(xiǎn)的深入評(píng)價(jià)和風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)的評(píng)估可以識(shí)別毒性風(fēng)險(xiǎn)作用在哪種organ上刺激性和致敏性風(fēng)險(xiǎn)篩查●慢性毒性檢測將綠色熒光蛋白(諾貝爾獎(jiǎng)技術(shù))與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合,,獲得了能夠檢測類雌jisu污染物的轉(zhuǎn)基因斑馬魚轉(zhuǎn)基因斑馬魚可以識(shí)別類雌jisu物質(zhì)并發(fā)出熒光●快速檢測開發(fā)“小硬件+大后臺(tái)”現(xiàn)場快檢體系基于斑馬魚的行為學(xué)對(duì)急性食物中毒風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行控制檢測時(shí)間應(yīng)控制在1小時(shí),適用于餐飲單位許多藥物研發(fā)初期,,會(huì)以斑馬魚為模型,,測試藥物毒性與功效。
斑馬魚通體透明,,胚胎發(fā)育全程肉眼可視,,但要精細(xì)追蹤C(jī)dx基因表達(dá)細(xì)胞軌跡、實(shí)時(shí)洞悉其功能動(dòng)態(tài),,熒光標(biāo)記技術(shù)不可或缺,。通過基因融合手段,將熒光蛋白基因(如綠色熒光蛋白GFP,、紅色熒光蛋白R(shí)FP)與Cdx基因相連,,構(gòu)建重組基因?qū)氚唏R魚胚胎。發(fā)育進(jìn)程中,,表達(dá)Cdx基因的細(xì)胞同步表達(dá)熒光蛋白,,在熒光顯微鏡下熠熠生輝??蒲腥藛T借此可觀察到Cdx基因在胚胎早期哪些細(xì)胞里率先jihuo,,例如在中胚層,、內(nèi)胚層分化起始階段,,熒光標(biāo)記的Cdx陽性細(xì)胞呈現(xiàn)有序遷移、聚集規(guī)律,,宛如夜空中閃爍移動(dòng)的星群,,精細(xì)勾勒細(xì)胞分化路線。其血液在體內(nèi)循環(huán),,運(yùn)輸氧氣,、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物,。斑馬魚衰老模型制備
幼魚時(shí)期的斑馬魚生長迅速,幾天內(nèi)身體形態(tài)就有明顯變化,。斑馬魚pdx模型
斑馬魚與人類在基因水平上具有較高的相似度,,許多人類疾病相關(guān)的基因在斑馬魚中也有保守存在。因此,,斑馬魚實(shí)驗(yàn)在人類疾病研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,。在心血管疾病研究方面,斑馬魚的心臟結(jié)構(gòu)和功能與人類心臟有一定的相似性,。通過誘導(dǎo)斑馬魚產(chǎn)生心血管系統(tǒng)的基因突變或使用藥物處理,,可以模擬人類心血管疾病的發(fā)生過程,如先天性心臟病,、心肌病等,。研究人員可以觀察斑馬魚心臟的形態(tài)變化、心率異常以及血管的發(fā)育缺陷等表型,,進(jìn)而探究疾病的發(fā)病機(jī)制,,并篩選潛在的醫(yī)療藥物。例如,,一些研究發(fā)現(xiàn)特定的化合物能夠改善斑馬魚因基因突變導(dǎo)致的心臟功能障礙,,這為開發(fā)醫(yī)療人類心血管疾病的新藥提供了線索。斑馬魚pdx模型