水生環(huán)境日益惡化,,斑馬魚Cdx環(huán)境監(jiān)測技術(shù)化身靈敏哨兵,守護(hù)水域生態(tài)平衡,。斑馬魚生存與水環(huán)境緊密相連,,Cdx基因作為應(yīng)激響應(yīng)關(guān)鍵樞紐,對溫度波動,、化學(xué)污染,、病原體入侵等脅迫反應(yīng)迅速。水溫驟變時,,Cdx環(huán)境監(jiān)測技術(shù)顯示Cdx基因上調(diào)熱休克蛋白基因表達(dá),,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定;若水體遭受重金屬,、有機(jī)污染物污染,,Cdx基因jihuo肝臟、腎臟jiedu酶基因,,科研人員通過實時定量PCR,、基因芯片等技術(shù)監(jiān)測Cdx及相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平變化,,量化污染程度。它在水中的呼吸依靠鰓部,,水流經(jīng)鰓時完成氣體交換,。斑馬魚cas9基因敲除
環(huán)特生物提供基于斑馬魚模型的基因編輯服務(wù),利用CRISPR/Cas9技術(shù)快速在斑馬魚模型中驗證人類遺傳病,、篩選致病基因,、研究基因功能及作用通路等,主要研究領(lǐng)域為嬰幼兒發(fā)育畸形,、罕見病,、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心腦的血管疾病,、血液病,、生殖缺陷等。相較于哺乳動物基因編輯的試驗周期長(一般1年以上),、表型不直觀(一般需染色),、研究成功率低等缺點(diǎn),斑馬魚基因編輯模型主要優(yōu)勢有:1.實驗周期快,,快可在2周內(nèi)進(jìn)行疾病相關(guān)的表型觀察(F0代高效瞬時敲降),,3個月內(nèi)完成穩(wěn)定品系構(gòu)建(雜合子F1代3個月,純合子F2代6個月,,子代數(shù)量多),;2. 直觀、多維度地活的動態(tài)觀察(可對特定organ組織細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記,,利用透明斑馬魚活的觀察和成像,,哺乳動物上很難實現(xiàn));3. 研究成功率高(與哺乳動物相比較,,斑馬魚基因編輯效率高,,樣本數(shù)量多,可同時測試多個相關(guān)基因,,比較大化保證研究的成功率),。斑馬魚基因編輯科研課題外包許多藥物研發(fā)初期,,會以斑馬魚為模型,,測試藥物毒性與功效。
斑馬魚與人類在基因水平上具有較高的相似度,,許多人類疾病相關(guān)的基因在斑馬魚中也有保守存在,。因此,斑馬魚實驗在人類疾病研究中具有重要的應(yīng)用價值,。在心血管疾病研究方面,,斑馬魚的心臟結(jié)構(gòu)和功能與人類心臟有一定的相似性,。通過誘導(dǎo)斑馬魚產(chǎn)生心血管系統(tǒng)的基因突變或使用藥物處理,可以模擬人類心血管疾病的發(fā)生過程,,如先天性心臟病,、心肌病等。研究人員可以觀察斑馬魚心臟的形態(tài)變化,、心率異常以及血管的發(fā)育缺陷等表型,,進(jìn)而探究疾病的發(fā)病機(jī)制,并篩選潛在的醫(yī)療藥物,。例如,,一些研究發(fā)現(xiàn)特定的化合物能夠改善斑馬魚因基因突變導(dǎo)致的心臟功能障礙,這為開發(fā)醫(yī)療人類心血管疾病的新藥提供了線索,。
在藥物研發(fā)進(jìn)程中,,PDX 斑馬魚模型發(fā)揮著極為關(guān)鍵的作用。傳統(tǒng)的藥物研發(fā)模式往往面臨諸多挑戰(zhàn),,如藥物在動物模型和人體臨床試驗中的效果差異較大等問題,。而 PDX 斑馬魚模型能夠較好地模擬人體tumor的異質(zhì)性和復(fù)雜性。將患者tumor組織移植到斑馬魚后,,可以針對特定tumor類型快速測試多種藥物的療效,。由于斑馬魚體型小、用藥量少,,很大降低了藥物篩選成本,。例如,在抗ai藥物研發(fā)中,,通過觀察藥物對 PDX 斑馬魚模型中tumor生長的抑制情況,,能夠在早期階段淘汰無效藥物,加速有潛力藥物的研發(fā)進(jìn)程,,為患者爭取更多的醫(yī)療時間,,同時也提高了藥物研發(fā)的成功率,促進(jìn)整個制藥行業(yè)的創(chuàng)新與發(fā)展,。研究斑馬魚的腦結(jié)構(gòu)有助于理解認(rèn)知和學(xué)習(xí)的基礎(chǔ),。
看似專注于軀體架構(gòu)規(guī)劃的斑馬魚cdx基因,實則與神經(jīng)發(fā)育也有著千絲萬縷聯(lián)系,。在胚胎腦部及脊髓雛形初現(xiàn)階段,,cdx基因悄然施展影響力。它間接調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞的增殖與分化節(jié)拍,,確保生成足量神經(jīng)元,,滿足斑馬魚早期感知外界、驅(qū)動身體所需,。舉例而言,,科研人員利用基因編輯技術(shù)適度降低cdx表達(dá)量后,,斑馬魚幼魚出現(xiàn)游泳姿態(tài)異常,頻繁打轉(zhuǎn),、失衡側(cè)翻,。深入探究得知,脊髓中運(yùn)動神經(jīng)元發(fā)育受損,,軸突延伸受阻,,無法精細(xì)連接肌肉纖維,致使肌肉接收指令紊亂,。cdx基因還參與構(gòu)建神經(jīng)回路,,協(xié)同其他神經(jīng)發(fā)育關(guān)鍵基因,塑造從感覺輸入到運(yùn)動輸出的信息傳遞路徑,,助力斑馬魚神經(jīng)系統(tǒng)精細(xì)“布線”,,在水中靈動游弋、機(jī)敏避險,。某些基因突變會導(dǎo)致斑馬魚身體形態(tài)或生理功能異常,。斑馬魚基因編輯科研課題外包
它的腎臟在維持體內(nèi)水鹽平衡和排泄廢物中起重要作用。斑馬魚cas9基因敲除
斑馬魚通體透明,,胚胎發(fā)育全程肉眼可視,,但要精細(xì)追蹤C(jī)dx基因表達(dá)細(xì)胞軌跡、實時洞悉其功能動態(tài),,熒光標(biāo)記技術(shù)不可或缺,。通過基因融合手段,將熒光蛋白基因(如綠色熒光蛋白GFP,、紅色熒光蛋白RFP)與Cdx基因相連,,構(gòu)建重組基因?qū)氚唏R魚胚胎。發(fā)育進(jìn)程中,,表達(dá)Cdx基因的細(xì)胞同步表達(dá)熒光蛋白,,在熒光顯微鏡下熠熠生輝??蒲腥藛T借此可觀察到Cdx基因在胚胎早期哪些細(xì)胞里率先jihuo,,例如在中胚層、內(nèi)胚層分化起始階段,,熒光標(biāo)記的Cdx陽性細(xì)胞呈現(xiàn)有序遷移,、聚集規(guī)律,宛如夜空中閃爍移動的星群,,精細(xì)勾勒細(xì)胞分化路線,。斑馬魚cas9基因敲除