全細(xì)胞記錄構(gòu)型(whole-cellrecording) 高阻封接形成后,，繼續(xù)以負(fù)壓抽吸使電極管內(nèi)細(xì)胞膜破裂,，電極胞內(nèi)液直接相通，而與浴槽液絕緣,，這種形式稱為“全細(xì)胞”記錄,。它既可記錄膜電位又可記錄膜電流,。其中膜電位可在電流鉗情況下記錄,，或?qū)⒉９苓B到標(biāo)準(zhǔn)高阻微電極放大器上記錄。在電壓鉗條件下記錄到的大細(xì)胞全細(xì)胞電流可達(dá)nA級,，全細(xì)胞鉗的串聯(lián)電阻(玻管和細(xì)胞內(nèi)部之間的電阻)應(yīng)當(dāng)補(bǔ)償,。任何流經(jīng)膜的電流均流經(jīng)這一電阻，所引起的電壓降將使玻管電壓不同于細(xì)胞內(nèi)的真正電位,。電流愈大,，愈需對串聯(lián)電阻進(jìn)行補(bǔ)償。全細(xì)胞鉗應(yīng)注意細(xì)胞必需合理的小到其電流能被放大器測到的范圍(25～50nA),。減少串聯(lián)電阻的方法是玻管尖要比單通道記錄大,。而由通道蛋白介導(dǎo)的膜電導(dǎo)構(gòu)成了膜反應(yīng)的主動成分，它的電流電壓關(guān)系是非線性的,。德國膜片鉗電壓鉗制

膜片鉗技術(shù)的建立1.拋光及填充好玻璃管微電極,，并將它固定在電極夾持器中。2.通過一個與電極夾持器連接的導(dǎo)管給微電極內(nèi)一個壓力,，一直到電極浸入記錄槽溶液中,。3.當(dāng)電極浸沒在溶液中時給電極一個測定脈沖（命令電壓,，如5-10ms，10mV）讀出電流,，按照歐姆定律計(jì)算電阻,。4.通過膜片鉗放大器的控制鍵將微電極前列的連接電位（junctionpotentials）調(diào)至零位，這種電位差是由于電極內(nèi)填充溶液與浸浴液不同離子成分的遷移造成的,。5.用微操縱器將微電極前列在直視下靠近要記錄的細(xì)胞表面,，并觀察電流的變化，直至阻抗達(dá)到1GΩ以上形成"干兆封接"6.調(diào)整靜息膜電位到期望的鉗位電壓的水平,，使放大器從"搜尋"轉(zhuǎn)到"電壓鉗"時細(xì)胞不至于鉗位到零,。德國可升級膜片鉗細(xì)胞功能特性對離子通道功能的研究，主要采用記錄離子通道電流來間接反映離子通道功能,。

細(xì)胞是動物和人體的基本組成單元,，細(xì)胞與細(xì)胞內(nèi)的通信,是依靠其膜上的離子通道進(jìn)行的，離子和離子通道是細(xì)胞興奮的基礎(chǔ),，亦即產(chǎn)生生物電信號的基礎(chǔ),，生物電信號通常用電學(xué)或電子學(xué)方法進(jìn)行測量。由此形成了一門細(xì)胞學(xué)科———電生理學(xué)（electrophysiology）,，即是用電生理的方法來記錄和分析細(xì)胞產(chǎn)生電的大小和規(guī)律的科學(xué),。早期的研究多使用雙電極電壓鉗技術(shù)作細(xì)胞內(nèi)電活動的記錄。現(xiàn)代膜片鉗技術(shù)是在電壓鉗技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,。

膜片鉗技術(shù)與其它技術(shù)相結(jié)合Neher等**將膜片鉗技術(shù)與Fura2熒光測鈣技術(shù)結(jié)合,，同時進(jìn)行如細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度、細(xì)胞膜離子通道電流及細(xì)胞膜電容等多指標(biāo)變化的快速交替測定,，這樣便可得出同一事件過程中,，多種因素各自的變化情況，進(jìn)而可分析這些變化間的相互關(guān)系,。Neher將可光解出鈣離子的鈣螯合物引入膜片鉗技術(shù),，進(jìn)而可以定量研究鈣離子濃度與分泌率的關(guān)系及比較大分泌率等指標(biāo)。他又創(chuàng)膜片鉗的膜電容檢測與碳纖電極電化學(xué)檢測聯(lián)合運(yùn)用的技術(shù),。之后又將光電聯(lián)合檢測技術(shù)與碳纖電極電化學(xué)檢測技術(shù)首先結(jié)合起來,。這種結(jié)合既能研究分泌機(jī)制，又能鑒別分泌物質(zhì),，還能互相彌補(bǔ)各單種方法的不足,。Eberwine等于1991年首先將膜片鉗技術(shù)與RT-PCR技術(shù)結(jié)合起來運(yùn)用，可對形態(tài)相似而電活動不同的結(jié)果作出分子水平的解釋,，從此開始了膜片鉗與分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合的時代∶基因重組技術(shù),，膜通道蛋白重建技術(shù)。封接是膜片鉗記錄的關(guān)鍵步驟之一。

ePatch雖然設(shè)備非常小巧,，但功能完備,，傳統(tǒng)膜片鉗設(shè)備能做的實(shí)驗(yàn)，用ePatch幾乎都能做,。具有voltage-clamp,，current-clamp，zero current-clamp三種模式,，自動電極電壓飄移補(bǔ)償,，C-fast-C-slow-R-series-P/N補(bǔ)償，Bridge balance補(bǔ)償?shù)裙δ??？梢宰鋈?xì)胞記錄也可以做單通道記錄，膜片鉗技術(shù)常做的離子通道電流,，突觸后電流,，動作電位檢測等實(shí)驗(yàn)都能輕松實(shí)現(xiàn)。公司還為此開發(fā)了友好的控制和記錄軟件,，筆者上手接觸了一下,，發(fā)現(xiàn)跟AXON的軟件類似，并且程序編輯更為簡單易用,。所記錄到的數(shù)據(jù)可以直接使用Clampfit進(jìn)行分析,，可以說對于使用過AXON設(shè)備的膜片鉗工作者來說，上手毫無難度,。電壓鉗技術(shù)的主要在于將膜電位固定在指令電壓的水平,，這樣才能研究在給定膜電位下膜電流隨時間的變化關(guān)系。美國高通量全自動膜片鉗專題

全細(xì)胞膜片鉗記錄是應(yīng)用較早,，也是普遍的鉗位技術(shù),。德國膜片鉗電壓鉗制

細(xì)胞是動物和人體的基本單元，細(xì)胞與細(xì)胞內(nèi)的通信是依靠其膜上的離子通道進(jìn)行的,，離子和離子通道是細(xì)胞興奮的基礎(chǔ),，亦即產(chǎn)生生物電信號的基礎(chǔ),，生物電信號通常用電學(xué)或電子學(xué)方法進(jìn)行測量,。由此形成了一門細(xì)胞學(xué)科--電生理學(xué)。膜片鉗技術(shù)已成為研究離子通道的黃金標(biāo)準(zhǔn),。電壓門控性離子通道：膜上通道蛋白的帶點(diǎn)集團(tuán)在膜電位改變時,，在電場的作用下，重新分布導(dǎo)致通道的關(guān)閉,，同時有電荷移動,，稱為門控電流。配體門控離子通道：神經(jīng)遞質(zhì)（如乙酰膽堿）、ji素等與通道蛋白上的特定位點(diǎn)結(jié)合,，引起蛋白構(gòu)像的改變,，導(dǎo)致通道的打開。德國膜片鉗電壓鉗制

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