對于雙光子（2P）成像而言,，離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個比較大的深度限制因素，而對于三光子（3P）成像這兩個問題大大減小,，但是三光子成像由于熒光團的吸收截面比2P要小得多,，所以需要更高數(shù)量級的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強度的熒光信號,。功能性3P顯微鏡比結構性3P顯微鏡的要求更高,，它需要更快速的掃描,，以便及時采樣神經元活動,；需要更高的脈沖能量，以便在每個像素停留時間內收集足夠的信號,。復雜的行為通常涉及到大型的大腦神經網(wǎng)絡，該網(wǎng)絡既具有局部的連接又具有遠程的連接,。要想將神經元活動與行為聯(lián)系起來，需要同時監(jiān)控非常龐大且分布普遍的神經元的活動,，大腦中的神經網(wǎng)絡會在幾十毫秒內處理傳入的刺激，要想了解這種快速的神經元動力學,，就需要MPM具備對神經元進行快速成像的能力?？焖費PM方法可分為單束掃描技術和多束掃描技術。 從雙光子到三光子甚至四光子,，這種非線性成像技術通常也被統(tǒng)稱為多光子顯微鏡。美國進口多光子顯微鏡多光子激發(fā)

現(xiàn)代分子生物學技術的迅速發(fā)展和科技的進步,，特別是隨著后基因組時代的到來,，人們已經能夠根據(jù)需要建立各種細胞模型,，為在體研究基因表達規(guī)律、分子間的相互作用,、細胞的增殖、細胞信號轉導,、誘導分化,、細胞凋亡以及新的血管生成等提供了良好的生物學條件,。然而,，盡管人們利用現(xiàn)有的分子生物學方法,，已經對基因表達和蛋白質之間的相互作用進行了深入,、細致的研究，但仍然不能實現(xiàn)對蛋白質和基因活動的實時,、動態(tài)監(jiān)測。在細胞的生理過程中,，基因、尤其是蛋白質的表達,、修飾和相萬作用往往發(fā)生可逆的,、動態(tài)的變化。目前的分子生物學方法還不能捕獲到蛋白質和基因的這些變化,，但獲取這些信息對與研究基因的表達和蛋白質之間的相互作用又至關重要。因此,，發(fā)展能用于、動態(tài),、實時、連續(xù)監(jiān)測蛋白質和基因活動的方法是非常必要的,。美國高速高分辨率多光子顯微鏡實驗多光子顯微鏡技術的優(yōu)勢如何？又有哪些應用,？

比較兩表格中的相關參數(shù)可以看出,，基于分子光學標記的成像技術已經在生物活檢和基因表達規(guī)律方面展示了較大的優(yōu)勢,。例如，正電子發(fā)射斷層成像（PET）可實現(xiàn)對分子代謝的成像,，空間分辨率∶1-2mm，時間分辨率;分鐘量級,。與PET比較，光學成像的應用場合更廣（可測量更多的參數(shù),，請參見表1-1），且具有更高的時間分辨率（秒級）,，空間分辨率可達到微米。因此,，二者相比，雖然光學成像在測量深度方面不及PET,，但在測量參數(shù)種類與時空分辨率方面有一定優(yōu)勢。對于小動物（如小白鼠）研究來說,，光學成像技術可以實現(xiàn)小動物整體成像和在體基因表達成像。例如,，初步研究表明，熒光介導層析成像可達到近10cm的測量深度;基于多光子激發(fā)的顯微成像技術可望實現(xiàn)小鼠體內基因表達的實時在體成像,。

1,，光源、光路高度整合通過精密的設計,，將飛秒激光器、掃描振鏡,、PMT,、濾光片組,，甚至是單光子熒光光路全套整合在一個不大的掃描頭（ScanHead）內,，無論掃描頭如何移動，掃描頭內的光路都可以保持穩(wěn)定不變,，從而實現(xiàn)了超穩(wěn)定,、免維護的特點。2,，配合多維度、高精度機械控制系統(tǒng),。掃描頭直接架設在一個多維運動的機械裝置上，可沿任意方向和角度移動掃描頭,，方便對動物樣本進行多方位的掃描觀察。而這在常規(guī)方案的多光子顯微鏡上有很大的實現(xiàn)難度,，不但需要多個關節(jié)組合的光路導向機構,，并且在這些關節(jié)旋轉的時候，都冒著極大的光路偏移的風險,，以至于在使用一段時間后都需要對光路進行再次校準，而這樣的問題在我司上則完全不會發(fā)生,。3.一機多能。多光子顯微鏡中,，極短的激光脈沖聚焦在樣品上的緊密點上，激發(fā)熒光團產生圖像,。

對于雙光子(2P)成像,，散焦和近表面熒光激發(fā)是兩個相對較大的深度限制因素,，而對于三光子(3P)成像，這兩個問題**減少,。  然而,，由于熒光團的吸收截面遠小于2P，三光子成像需要更高的脈沖能量才能獲得與2P相同激發(fā)強度的熒光信號,。  功能性3P顯微鏡比結構性3P顯微鏡要求更高，后者需要更快的掃描速度以便及時采樣神經元活動,。  為了在每個像素的停留時間內收集足夠的信號，需要更高的脈沖能量,。  復雜的行為通常涉及大規(guī)模的大腦神經網(wǎng)絡，這些網(wǎng)絡既有本地連接,，也有遠程連接。  為了將神經元的活動與行為聯(lián)系起來,，需要同時監(jiān)測* * *分布的超大型神經元的活動。  大腦中的神經網(wǎng)絡將在幾十毫秒內處理輸入的刺激,。  為了理解這種快速神經元動力學,，MPM需要快速成像神經元的能力。  快速MPM方法可分為單束掃描技術和多束掃描技術,。  多光子顯微鏡銷售/營銷策略建議,。美國布魯克多光子顯微鏡代理

多光子顯微鏡是衡量一個國家制造業(yè)和高科技發(fā)展水平的重要標準之一。美國進口多光子顯微鏡多光子激發(fā)

2020年,，TonmoyChakraborty等人提出了加速2PM軸向掃描速度的方法[2],。在光學顯微鏡中，物鏡或樣品緩慢的軸向掃描速度限制了體成像的速度,。近年來，通過使用遠程聚焦技術或電調諧透鏡(ETL)已經實現(xiàn)了快速軸向掃描,。但遠程對焦時對反射鏡的機械驅動會限制軸向掃描速度,，ETL會引入球差和高階像差，無法進行高分辨率成像,。為了克服這些限制，該小組引入了一種新的光學設計,，可以將橫向掃描轉換為無球面像差的軸向掃描，以實現(xiàn)高分辨率成像,。有兩種方法可以實現(xiàn)這種設計。***個可以執(zhí)行離散的軸向掃描,，另一個可以執(zhí)行連續(xù)的軸向掃描,。如圖3a所示，特定裝置由兩個垂直臂組成,，每個臂具有4F望遠鏡和物鏡。遠程聚焦臂由振鏡掃描鏡(GSM)和空氣物鏡(OBJ1)組成,，另一個臂(稱為照明臂)由浸沒物鏡(OBJ2)組成,。兩個臂對齊,，使得GSM與兩個物鏡的后焦平面共軛,。準直后的激光束經偏振分束器反射進入遠程聚焦臂，由GSM進行掃描,，使OBJ1產生的激光焦點可以進行水平掃描。美國進口多光子顯微鏡多光子激發(fā)

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