Ca2+是重要的第二信使,，對(duì)于調(diào)節(jié)細(xì)胞的生理反應(yīng)具有極其重要的作用，開(kāi)發(fā)和利用雙光子熒光顯微成像技術(shù)對(duì)Ca2+熒光信號(hào)進(jìn)行觀測(cè),，可以從某些方面對(duì)有機(jī)體或細(xì)胞的變化機(jī)制進(jìn)行分析,，具有重要的意義。利用雙光子熒光顯微成像技術(shù)可以觀察細(xì)胞內(nèi)用熒光探針標(biāo)記的Ca2*的時(shí)間和空間的熒光圖像的變化,，還可以觀察細(xì)胞某一層面或局部的（Ca2+）熒光圖像和變化,。通過(guò)對(duì)單細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn)，Ca2+不僅在細(xì)胞局部區(qū)域間的分布是不均勻的,，而且細(xì)胞內(nèi)各局部區(qū)域的不同深度或?qū)哟伍g也存在不同程度的Ca2+梯差即所謂的空間Ca2梯差,。多光子顯微鏡的大多數(shù)補(bǔ)償器都采用棱鏡。美國(guó)飛秒激光多光子顯微鏡成像深度

多光子顯微鏡成像深度深,、對(duì)比度高,，在生物成像中具有重要意義，但通常需要較高的功率,。結(jié)合時(shí)間傳播的超短脈沖可以實(shí)現(xiàn)超快的掃描速度和較深的成像深度,，但近紅外波段的光本身會(huì)導(dǎo)致分辨率較低?；诙喙庾由限D(zhuǎn)換材料和時(shí)間編碼結(jié)構(gòu)光顯微鏡的高速超分辨成像系統(tǒng)(MUTE-SIM)是由清華大學(xué)教授和北京大學(xué)彭研究員合作開(kāi)發(fā)的,。可實(shí)現(xiàn)50MHz的超高掃描速度，突破衍射極限,，實(shí)現(xiàn)超分辨率成像,。與普通熒光顯微鏡相比，該顯微鏡經(jīng)過(guò)改進(jìn),，只需要較低的激發(fā)功率,。這種超快、低功耗,、多光子超分辨率技術(shù)在高分辨率生物深層組織成像中具有長(zhǎng)遠(yuǎn)的應(yīng)用前景,。清醒動(dòng)物多光子顯微鏡成像深度國(guó)內(nèi)市場(chǎng)多光子顯微鏡銷(xiāo)售渠道。

2020年,，TonmoyChakraborty等人提出了加速2PM軸向掃描速度的方法[2],。在光學(xué)顯微鏡中，物鏡或樣品緩慢的軸向掃描速度限制了體成像的速度,。近年來(lái),，通過(guò)使用遠(yuǎn)程聚焦技術(shù)或電調(diào)諧透鏡(ETL)已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了快速軸向掃描。但遠(yuǎn)程對(duì)焦時(shí)對(duì)反射鏡的機(jī)械驅(qū)動(dòng)會(huì)限制軸向掃描速度,，ETL會(huì)引入球差和高階像差,，無(wú)法進(jìn)行高分辨率成像。為了克服這些限制,，該小組引入了一種新的光學(xué)設(shè)計(jì),，可以將橫向掃描轉(zhuǎn)換為無(wú)球面像差的軸向掃描，以實(shí)現(xiàn)高分辨率成像,。有兩種方法可以實(shí)現(xiàn)這種設(shè)計(jì),。***個(gè)可以執(zhí)行離散的軸向掃描，另一個(gè)可以執(zhí)行連續(xù)的軸向掃描,。如圖3a所示,，特定裝置由兩個(gè)垂直臂組成，每個(gè)臂具有4F望遠(yuǎn)鏡和物鏡,。遠(yuǎn)程聚焦臂由振鏡掃描鏡(GSM)和空氣物鏡(OBJ1)組成,，另一個(gè)臂(稱(chēng)為照明臂)由浸沒(méi)物鏡(OBJ2)組成。兩個(gè)臂對(duì)齊,，使得GSM與兩個(gè)物鏡的后焦平面共軛,。準(zhǔn)直后的激光束經(jīng)偏振分束器反射進(jìn)入遠(yuǎn)程聚焦臂，由GSM進(jìn)行掃描,，使OBJ1產(chǎn)生的激光焦點(diǎn)可以進(jìn)行水平掃描,。

快速光柵掃描有多種實(shí)現(xiàn)方式，使用振鏡進(jìn)行快速2D掃描,，將振鏡和可調(diào)電動(dòng)透鏡結(jié)合在一起進(jìn)行快速3D掃描,，但可調(diào)電動(dòng)透鏡由于機(jī)械慣性的限制在軸向無(wú)法快速進(jìn)行焦點(diǎn)切換,，影響成像速度，現(xiàn)可使用空間光調(diào)制器（SLM）代替,。遠(yuǎn)程聚焦也是一種實(shí)現(xiàn)3D成像的手段,，如圖2所示。在LSU模塊中,，掃描振鏡進(jìn)行橫向掃描,，ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M，通過(guò)調(diào)控M的位置實(shí)現(xiàn)軸向掃描,。該技術(shù)不僅可以校正主物鏡L2引入的光學(xué)像差,，還可以進(jìn)行快速的軸向掃描。想要獲得更多神經(jīng)元成像,，可以通過(guò)調(diào)整顯微鏡的物鏡設(shè)計(jì)來(lái)擴(kuò)大FOV,，但是具有大NA和大FOV的物鏡通常重量較大，無(wú)法快速移動(dòng)以進(jìn)行快速軸向掃描,，因此大型FOV系統(tǒng)需要依賴(lài)于遠(yuǎn)程聚焦,、SLM和可調(diào)電動(dòng)透鏡。4tune光譜檢測(cè)器,，實(shí)現(xiàn)多光子顯微鏡的光譜型檢測(cè),。

1，光源,、光路高度整合通過(guò)精密的設(shè)計(jì),，將飛秒激光器、掃描振鏡,、PMT,、濾光片組,，甚至是單光子熒光光路全套整合在一個(gè)不大的掃描頭（ScanHead）內(nèi),，無(wú)論掃描頭如何移動(dòng)，掃描頭內(nèi)的光路都可以保持穩(wěn)定不變,，從而實(shí)現(xiàn)了超穩(wěn)定,、免維護(hù)的特點(diǎn)。2,，配合多維度,、高精度機(jī)械控制系統(tǒng)。掃描頭直接架設(shè)在一個(gè)多維運(yùn)動(dòng)的機(jī)械裝置上,，可沿任意方向和角度移動(dòng)掃描頭,，方便對(duì)動(dòng)物樣本進(jìn)行多方位的掃描觀察。而這在常規(guī)方案的多光子顯微鏡上有很大的實(shí)現(xiàn)難度,，不但需要多個(gè)關(guān)節(jié)組合的光路導(dǎo)向機(jī)構(gòu),，并且在這些關(guān)節(jié)旋轉(zhuǎn)的時(shí)候,，都冒著極大的光路偏移的風(fēng)險(xiǎn)，以至于在使用一段時(shí)間后都需要對(duì)光路進(jìn)行再次校準(zhǔn),，而這樣的問(wèn)題在我司上則完全不會(huì)發(fā)生,。3.一機(jī)多能。多光子激光掃描顯微鏡已經(jīng)成為了一個(gè)活躍且多產(chǎn)的領(lǐng)域,。bruker多光子顯微鏡數(shù)據(jù)處理

多光子顯微鏡作為神經(jīng)科學(xué)重要的研究工具,，近年來(lái)發(fā)展快速，品牌也眾多,。美國(guó)飛秒激光多光子顯微鏡成像深度

因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司 雙光子顯微鏡的基本原理是：在高光子密度的情況下,，熒光分子可以同時(shí)吸收 2 個(gè)長(zhǎng)波長(zhǎng)的光子，在經(jīng)過(guò)一個(gè)很短的所謂激發(fā)態(tài)壽命的時(shí)間后,，發(fā)射出一個(gè)波長(zhǎng)較短的光子,；其效果和使用一個(gè)波長(zhǎng)為長(zhǎng)波長(zhǎng)一半的光子去激發(fā)熒光分子是相同的。雙光子激發(fā)需要很高的光子密度,，為了不損傷細(xì)胞,，雙光子顯微鏡使用高能量鎖模脈沖激光器。這種激光器發(fā)出的激光具有很高的峰值能量和很低的平均能量,，其脈沖寬度只有 100 飛秒,，而其周期可以達(dá)到 80至100兆赫茲。在使用高數(shù)值孔徑的物鏡將脈沖激光的光子聚焦時(shí),，物鏡的焦點(diǎn)處的光子密度是比較高的,，雙光子激發(fā)只發(fā)生在物鏡的焦點(diǎn)上，所以雙光子顯微鏡不需要共聚焦***,，提高了熒光檢測(cè)效率,。美國(guó)飛秒激光多光子顯微鏡成像深度

因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司坐落于中山北路1759號(hào)浦發(fā)廣場(chǎng)D座803，是集設(shè)計(jì),、開(kāi)發(fā),、生產(chǎn)、銷(xiāo)售,、售后服務(wù)于一體,，儀器儀表的服務(wù)型企業(yè)。公司在行業(yè)內(nèi)發(fā)展多年,，持續(xù)為用戶(hù)提供整套nVista,，nVoke，3D bioplotte,，invivo的解決方案,。公司主要產(chǎn)品有nVista，nVoke,，3D bioplotte,，invivo等,，公司工程技術(shù)人員、行政管理人員,、產(chǎn)品制造及售后服務(wù)人員均有多年行業(yè)經(jīng)驗(yàn),。并與上下游企業(yè)保持密切的合作關(guān)系。Inscopix,envisionTEC,rokit,piezosleep,stoeltingco,unipick,neuronexus,scientifica,alphaomega,divescope,invivo集中了一批經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)及管理專(zhuān)業(yè)人才,，能為客戶(hù)提供良好的售前,、售中及售后服務(wù)，并能根據(jù)用戶(hù)需求,，定制產(chǎn)品和配套整體解決方案,。因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司以先進(jìn)工藝為基礎(chǔ)、以產(chǎn)品質(zhì)量為根本,、以技術(shù)創(chuàng)新為動(dòng)力,，開(kāi)發(fā)并推出多項(xiàng)具有競(jìng)爭(zhēng)力的nVista，nVoke,，3D bioplotte,，invivo產(chǎn)品，確保了在nVista,，nVoke,，3D bioplotte，invivo市場(chǎng)的優(yōu)勢(shì),。