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全自動多光子顯微鏡配置

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-03-09

我們要指出的是,,單光子激發(fā)熒光和雙光子激發(fā)熒光,,是從熒光產(chǎn)生的機(jī)理上來區(qū)分的。而共焦則是熒光顯微鏡的一種結(jié)構(gòu),,其目的是為了,,通過共焦結(jié)構(gòu),提高整個(gè)熒光顯微鏡的空間分辨率,。所以共焦熒光顯微鏡可以根據(jù)激發(fā)光源的不同,,實(shí)現(xiàn)單光子共焦熒光成像或者雙光子共焦熒光成像。往往一個(gè)普通的雙光子熒光顯微鏡(沒有共焦結(jié)構(gòu))其空間分辨率也可以達(dá)到單光子共焦熒光顯微鏡的水平,。這樣就可以簡化整個(gè)系統(tǒng),,相對來說,就提高了激發(fā)光源的利用率,,以及熒光的探測效率,,這個(gè)也是我們提倡雙光子熒光成像的原因之一。雙光子熒光共焦顯微鏡由于雙光子效應(yīng)和共焦結(jié)構(gòu),,分辨率則會更高,,而我們通常說的共焦顯微鏡都是指單光子激發(fā)熒光的。利用多光子顯微鏡,,進(jìn)行無損,、高分辨率的生物組織層析成像,。全自動多光子顯微鏡配置

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在生物成像中,我司多光子顯微鏡具有清(清晰),,快(快速),,深(深層),活這四個(gè)方面,。結(jié)合了多光子上轉(zhuǎn)化材料以及時(shí)間編碼的結(jié)構(gòu)光超分辨技術(shù),,實(shí)現(xiàn)了快速(50MHz的掃描速度),超分辨(超衍射極限)成像,。作為一種新的高速,,超高分辨率的成像系統(tǒng),MUTE-SIM可以幫助我們對快速運(yùn)動的生物圖像進(jìn)行分辨率高的成像,。盡管關(guān)于深度成像的應(yīng)用我們沒有進(jìn)一步展示,,但是結(jié)合1560nm近紅外光相對于可見光更佳的穿透性,我們相信該技術(shù)將有利于對生物組織進(jìn)行高速,,超分辨,,高深度地成像,有助于生物影像學(xué)的發(fā)展,。滔博生物TOP-Bright是一家集研發(fā),,生產(chǎn),銷售于一體的專注于神經(jīng)科學(xué)產(chǎn)品及致力于向高校,、科研機(jī)構(gòu)等領(lǐng)域提供實(shí)驗(yàn)室一體化方案的高科技企業(yè),。業(yè)務(wù)服務(wù)范圍已遍布至全國各地幾百家實(shí)驗(yàn)室。目前公司主營產(chǎn)品是享譽(yù)全球的國際品牌和產(chǎn)品,這些儀器設(shè)備都是科學(xué)研究所必備且不可替代的基礎(chǔ)儀器,。進(jìn)口多光子顯微鏡層析成像光子顯微鏡利用光學(xué)透鏡和光學(xué)元件將樣品中的光反射或透射到目鏡中,,從而形成圖像。

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對于雙光子成像而言,,離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個(gè)比較大的深度限制因素,,而對于三光子(3P)成像這兩個(gè)問題大大減小,但是三光子成像由于熒光團(tuán)的吸收截面比2P要小得多,,所以需要更高數(shù)量級的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強(qiáng)度的熒光信號,。功能性3P顯微鏡比結(jié)構(gòu)性3P顯微鏡的要求更高,它需要更快速的掃描,,以便及時(shí)采樣神經(jīng)元活動,;需要更高的脈沖能量,以便在每個(gè)像素停留時(shí)間內(nèi)收集足夠的信號,。復(fù)雜的行為通常涉及到大型的大腦神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),,該網(wǎng)絡(luò)既具有局部的連接又具有遠(yuǎn)程的連接。要想將神經(jīng)元活動與行為聯(lián)系起來,,需要同時(shí)監(jiān)控非常龐大且分布普遍的神經(jīng)元的活動,,大腦中的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)會在幾十毫秒內(nèi)處理傳入的刺激,,要想了解這種快速的神經(jīng)元動力學(xué),就需要MPM具備對神經(jīng)元進(jìn)行快速成像的能力,。快速M(fèi)PM方法可分為單束掃描技術(shù)和多束掃描技術(shù),。

多光子激光掃描顯微鏡行業(yè)發(fā)展,,世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要布局在德國和日本,德國是以徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司為,,而日本以尼康和奧林巴斯公司為,,2020年,上述企業(yè)占據(jù)著世界多光子激光掃描顯微鏡市場64.44%的市場份額,,其發(fā)展戰(zhàn)略左右著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向,。目前世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求在增長,中國市場這方面的需求增長更快,,未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將具有很大的發(fā)展?jié)摿?。高速掃描,高分辨率,,多光子顯微鏡助力科研進(jìn)步,。

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   與傳統(tǒng)的單光子寬場熒光顯微鏡相比,多光子顯微鏡(MPM)具有光學(xué)切片和深度成像的功能,,極大地促進(jìn)了研究人員對整個(gè)大腦深部神經(jīng)的認(rèn)識,。2019年,JeromeLecoq等從腦深部神經(jīng)元成像,、大數(shù)量神經(jīng)元成像,、高速神經(jīng)元成像三個(gè)方面討論了相關(guān)的MPM技術(shù)。為了將神經(jīng)元活動與復(fù)雜行為聯(lián)系起來,,通常需要對大腦皮層深處的神經(jīng)元進(jìn)行成像,,這就要求MPM具備深度成像的能力。激發(fā)光和發(fā)射光會被生物組織高度散射和吸收,,這是限制MPM成像深度的主要因素,。雖然增加激光強(qiáng)度可以解決散射問題,但會帶來其他問題,,如燒焦樣品,、散焦和近表面熒光激發(fā)。增加MPM成像深度的比較好方法是使用更長的波長作為激發(fā)光,。另外,,對于雙光子(2P)成像而言,離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個(gè)比較大的深度限制因素,,而對于三光子(3P)成像這兩個(gè)問題大大減小,,但是三光子成像由于熒光團(tuán)的吸收截面比2P要小得多,,所以需要更高數(shù)量級的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強(qiáng)度的熒光信號。融合先進(jìn)激光技術(shù),,多光子顯微鏡實(shí)現(xiàn)高速,、高清晰度成像。Ultima Investigator多光子顯微鏡成像分辨率

精確觀測生物分子相互作用,,多光子顯微鏡推動生命科學(xué)研究發(fā)展,。全自動多光子顯微鏡配置

多光子顯微鏡對成像深度的改善利用紅光或紅外光激發(fā),光散射?。ㄐ×W拥纳⑸渑c波長的四次方的成反比),。不需要***,能更多收集來自成像截面的散射光子,。***不能區(qū)分由離焦區(qū)域或焦點(diǎn)區(qū)發(fā)射出的散射光子,,多光子在深層成像信噪比好。單光子激發(fā)所用的紫外或可見光在光束到達(dá)焦平面之前易被樣品吸收而衰減,,不易對深層激發(fā),。多光子熒光成像的特點(diǎn)。深度成像∶與共聚焦相比能更好地對厚散射物質(zhì)成像,。信噪比∶多光子吸收采用的波長是單光子吸收的2倍以上,,所以顯微試樣中的瑞利散射更小,熒光測定的信噪比更高,。觀察活細(xì)胞∶離子測量(i.e.Ca2+),,GFP,發(fā)育生物學(xué)等—減少了光毒性和光漂白,,能對細(xì)胞長時(shí)間觀察,。全自動多光子顯微鏡配置