單光子激發(fā)熒光的過程,，就是熒光分子吸收一個(gè)光子，從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),，躍遷以后,，能量較大的激發(fā)態(tài)分子,，通過內(nèi)轉(zhuǎn)換把部分能量轉(zhuǎn)移給周圍的分子，自己回到比較低電子激發(fā)態(tài)的比較低振動(dòng)能級(jí),。處于比較低電子激發(fā)態(tài)的比較低振動(dòng)能級(jí)的分子的平均壽命大約在 10s 左右,。這時(shí)它不是通過內(nèi)轉(zhuǎn)換的方式來消耗能量，回到基態(tài)，而是通過發(fā)射出相應(yīng)的光量子來釋放能量,，回到基態(tài)的各個(gè)不同的振動(dòng)能級(jí)時(shí),，就發(fā)射熒光。因?yàn)樵诎l(fā)射熒光以前已經(jīng)有一部分能量被消耗,，所以發(fā)射的熒光的能量要比吸收的能量小,，也就是熒光的特征波長要比吸收的特征波長來的長。多光子顯微鏡市場集中,，由于投產(chǎn)生產(chǎn)的成本較高,，技術(shù)難度大，目前涌現(xiàn)的新企業(yè)不多,。嚙齒類多光子顯微鏡作用

要想實(shí)現(xiàn)離散的軸向重新聚焦,，需要在OBJ1的焦平面中放置一個(gè)階梯鏡（圖3b）。當(dāng)入射激光束被OBJ1聚焦到的焦平面恰好與階梯重合時(shí),，被反射的激光將在無窮大的空間中成為準(zhǔn)直光束,，并在OBJ2的焦平面上形成激光光斑。并且返回的激光束會(huì)被GSM消除橫向掃描,，即OBJ2形成的焦點(diǎn)不會(huì)進(jìn)行橫向掃描,，實(shí)現(xiàn)軸向掃描。如果激光點(diǎn)被掃描到與焦平面不一致的階梯,，則會(huì)形成遠(yuǎn)離鏡面的激光焦點(diǎn),，返回的激光束會(huì)在無窮大的空間中會(huì)聚或發(fā)散，進(jìn)而導(dǎo)致由OBJ2形成的激光焦點(diǎn)也在軸向重新聚焦,，通過這種方式即能實(shí)現(xiàn)離散的軸向掃描,。對(duì)于已精確匹配兩個(gè)物鏡光瞳的光學(xué)裝置，不會(huì)引入像差,。為了進(jìn)行連續(xù)的軸向重新聚焦,，將階梯鏡替換為稍微傾斜的平面鏡，同時(shí)入射的激光焦點(diǎn)也需要被傾斜,，使得其以垂直于鏡面的方向入射,，通過相對(duì)入射激光束稍微平移OBJ1即可實(shí)現(xiàn)這種傾斜。美國激光掃描多光子顯微鏡代理國內(nèi)市場多光子顯微鏡銷售渠道,。

   多光子顯微鏡的前景巨大 作為一個(gè)多學(xué)科交叉,、知識(shí)密集、資金密集的高技術(shù)產(chǎn)業(yè),，多光子顯微鏡涉及醫(yī)學(xué),、生物學(xué)、化學(xué),、物理學(xué),、電子學(xué),、工程學(xué)等學(xué)科，生產(chǎn)工藝相對(duì)復(fù)雜,，進(jìn)入門檻較高,，是衡量一個(gè)國家制造業(yè)和高科技發(fā)展水平的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。過去的5年,，多光子顯微鏡市場集中,，由于投產(chǎn)生產(chǎn)的成本較高，技術(shù)難度大,，目前涌現(xiàn)的新企業(yè)不多,。顯微鏡作為一個(gè)傳統(tǒng)的高科技行業(yè)，其作用至今沒有被其他技術(shù)顛覆,，只是不斷融合并發(fā)展相關(guān)技術(shù),，在醫(yī)療和其他精密檢測(cè)領(lǐng)域發(fā)揮著更大的作用。顯微鏡的商業(yè)化發(fā)展已進(jìn)入成熟期,，主要需求來自教學(xué),、生命科學(xué)的研究及精密檢測(cè)等，全球市場呈現(xiàn)平緩的增長態(tài)勢(shì),。然而,，**、,、顯微鏡產(chǎn)品（如多光子顯微鏡,、電子顯微鏡）正拉動(dòng)市場需求，多光子顯微鏡市場發(fā)展?jié)摿薮蟆?

世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要布局在德國和日本,，德國是以徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司為，而日本以尼康和奧林巴斯公司為,，2020年,，上述企業(yè)占據(jù)著世界多光子激光掃描顯微鏡市場 64.44%的市場份額，其發(fā)展戰(zhàn)略左右著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向,。目前世界市場對(duì)多光子激光掃描顯微鏡的需求在增長,，中國市場這方面的需求增長更快，未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將具有很大的發(fā)展?jié)摿?。國?nèi)顯微鏡制造市場目前斷層嚴(yán)重,。目前我國顯微鏡行業(yè)發(fā)展缺乏技術(shù)沉淀，20 年以上經(jīng)營積累的企業(yè)十分稀缺,，深度精密制造,、光學(xué)重要部件設(shè)計(jì)及工藝嚴(yán)重制約產(chǎn)業(yè)升級(jí)。目前中國顯微鏡中如多光子顯微鏡,、共聚焦掃描和電子顯微鏡等主要集中在徠卡顯微系統(tǒng),、蔡司,、尼康、奧林巴斯等國外企業(yè),。國內(nèi)具備生產(chǎn)顯微鏡能力的企業(yè)屈指可數(shù),，若國內(nèi)顯微鏡企業(yè)能打破技術(shù)壁壘，切入顯微鏡市場,，企業(yè)的生產(chǎn)經(jīng)營將騰躍至一個(gè)更高的格局,。多光子顯微鏡可以進(jìn)行深層成像，且具有三維成像的能力,，可以應(yīng)用于拍攝不透明的厚樣品,。

多光子激發(fā)掃描顯微成像系統(tǒng)的不足。只能對(duì)熒光成像,。如果樣品包括能夠吸收激發(fā)光的色團(tuán),，如色素，樣品可能受到熱損傷,。分辨率略有降低,，雖然可以通過同時(shí)利用共焦的小孔得到改善，但是信號(hào)會(huì)有損耗,。受昂貴的超快激光器限制,，多光子掃描顯微鏡的成本較高。多光子激發(fā)顯微鏡應(yīng)用舉例,。動(dòng)物和腦片神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能,、動(dòng)物腦皮層的成像、胚胎發(fā)育過程的長時(shí)間動(dòng)態(tài)觀測(cè),、多光子激發(fā)光解籠,、細(xì)胞內(nèi)微區(qū)鈣動(dòng)力學(xué)、多光子激發(fā)自發(fā)熒光,、其它應(yīng)用,。多光子顯微鏡技術(shù)的優(yōu)勢(shì)如何？又有哪些應(yīng)用,？清醒動(dòng)物多光子顯微鏡數(shù)據(jù)處理

全球多光子顯微鏡主要消費(fèi)地區(qū)分析,，包括消費(fèi)量及份額等。嚙齒類多光子顯微鏡作用

快速光柵掃描有多種實(shí)現(xiàn)方式,，使用振鏡進(jìn)行快速2D掃描,，將振鏡和可調(diào)電動(dòng)透鏡結(jié)合在一起進(jìn)行快速3D掃描，但可調(diào)電動(dòng)透鏡由于機(jī)械慣性的限制在軸向無法快速進(jìn)行焦點(diǎn)切換,，影響成像速度,，現(xiàn)可使用空間光調(diào)制器（SLM）代替。遠(yuǎn)程聚焦也是一種實(shí)現(xiàn)3D成像的手段,，如圖2所示,。在LSU模塊中,，掃描振鏡進(jìn)行橫向掃描，ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M,，通過調(diào)控M的位置實(shí)現(xiàn)軸向掃描,。該技術(shù)不僅可以校正主物鏡L2引入的光學(xué)像差，還可以進(jìn)行快速的軸向掃描,。想要獲得更多神經(jīng)元成像,，可以通過調(diào)整顯微鏡的物鏡設(shè)計(jì)來擴(kuò)大FOV，但是具有大NA和大FOV的物鏡通常重量較大,，無法快速移動(dòng)以進(jìn)行快速軸向掃描,，因此大型FOV系統(tǒng)依賴于遠(yuǎn)程聚焦、SLM和可調(diào)電動(dòng)透鏡,。嚙齒類多光子顯微鏡作用