培養(yǎng)實(shí)例2和對(duì)比培養(yǎng)例2的培養(yǎng)結(jié)果比較:蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基和1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100%;在相同條件下培養(yǎng)28d時(shí),,與1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基相比,,1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的幼苗長(zhǎng)勢(shì)更佳,在平均株高,、蓮座葉大小,、根長(zhǎng)、花朵數(shù)量等方面均優(yōu)于1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基,;并且,,采用上述培養(yǎng)方法,不論是1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基還是1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基,,均能獲得形態(tài)完整的花粉,,且花粉活力高達(dá)%,其特點(diǎn)在于選擇了蘭茲貝格型擬南芥作為培養(yǎng)對(duì)象,,且選擇了高度適中的培養(yǎng)盒進(jìn)行培養(yǎng),,克服了傳統(tǒng)培養(yǎng)方法無法獲得擬南芥整個(gè)生育期無菌苗的缺點(diǎn),所獲無菌花***可直接用于花*離體培養(yǎng)等研究?jī)?nèi)容,。如圖2所示,。培養(yǎng)實(shí)例3:油菜無菌苗培養(yǎng)與培養(yǎng)實(shí)例1不同的地方在于:步驟(1)所用種子為中雙11號(hào)油菜種子,其余完全同培養(yǎng)實(shí)例1,。1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:中雙11號(hào)油菜種子在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,,培養(yǎng)9d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯,、平均株高為,,葉色濃綠,莖稈粗壯,、平均莖中粗為,,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為(>),、平均主根長(zhǎng)為,。如圖3所示。對(duì)比培養(yǎng)例3:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,,其余完全同培養(yǎng)實(shí)例3,,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。無血清培養(yǎng)基有助于細(xì)胞在無血清環(huán)境中的生長(zhǎng),。黑龍江DMEM/F12培養(yǎng)基
導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)基變質(zhì)失效,。控制細(xì)胞培養(yǎng)基中**和霉菌,,是延長(zhǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基有效期的方法之一,。清大天一在參考《中華******典》2005版二部附錄第100頁的口服給*制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn),,并嚴(yán)于該標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品的**數(shù)每1g不得超過200個(gè),,霉菌數(shù)每1g不得超過50個(gè),。稱取樣品1g,加入無菌純化水10mL溶解,,混勻即得試樣,。按中華******典2005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進(jìn)行,檢查項(xiàng)目為**數(shù),、霉菌數(shù),。檢查法采用平皿法。細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)這是一個(gè)性能特性表述的要求,。細(xì)胞培養(yǎng)基的功能就是培養(yǎng)哺乳類動(dòng)物細(xì)胞,,因此經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)效果的檢驗(yàn)是產(chǎn)品***劣的直觀表述,這也是很多生物制*用戶要求的一項(xiàng)指標(biāo),。目前國(guó)內(nèi)尚無細(xì)胞培養(yǎng)和計(jì)數(shù)的法定方法,,可參考《體外培養(yǎng)的原理與技術(shù)》中細(xì)胞計(jì)數(shù)法論述的內(nèi)容給出。按產(chǎn)品說明書配制培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),,前四天用含10%小牛血清的培養(yǎng)液培養(yǎng),,觀察細(xì)胞形態(tài)并計(jì)數(shù),檢查細(xì)胞培養(yǎng)基是否有促生長(zhǎng)的能力,。后三天用不含小牛血清的培養(yǎng)液維持培養(yǎng),,觀察細(xì)胞形態(tài)并計(jì)數(shù),檢查細(xì)胞培養(yǎng)基中是否有不利細(xì)胞生長(zhǎng)的***,。本試驗(yàn)用細(xì)胞為VERO細(xì)胞,。四、細(xì)胞培養(yǎng)基的使用方法細(xì)胞培養(yǎng)基的種類繁多,,細(xì)胞培養(yǎng)方式也較多,。廣東MEM a培養(yǎng)基介紹DMEM培養(yǎng)基適用于多種類型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。
1),、初代培養(yǎng):繡球外植體,,將葉片剪去,自來水沖洗干凈,。在超凈工作臺(tái)上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75%酒精中消毒30s,用無菌水沖洗3~4次,。使用白貓漂白水和無菌水按1:4的體積比配制消毒液,,將外植體放入消毒液浸泡40min,其中白貓漂白水為上海白貓(集團(tuán))有限公司生產(chǎn)的“白貓”牌家用漂白水,。消毒完成,,將外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng),,建立無菌再生系統(tǒng),誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,,溫度25℃,,光照時(shí)間16h;黑暗條件下,,溫度23℃,,光照時(shí)間8h,培養(yǎng)6~8周,。其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ms+~~,,誘導(dǎo)培養(yǎng)基的ph值為。(2),、繼代培養(yǎng):以建立的無菌再生系統(tǒng)為對(duì)象,,將無菌外植體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基,其中增殖培養(yǎng)基為ms+~~,,培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,,溫度25℃,光照時(shí)間16h,;黑暗條件下,,溫度23℃,光照時(shí)間8h,,培養(yǎng)8~12周,。每隔8~12周轉(zhuǎn)接入新的增殖培養(yǎng)基,增殖培養(yǎng)基的ph值為,。(3),、生根培養(yǎng):經(jīng)過繼代培養(yǎng)的繡球組培苗,取2~3cm的頂芽,,放入生根培養(yǎng)基,,其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+~~,生根培養(yǎng)基的ph值為,。誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,,溫度25℃,光照時(shí)間16h,;黑暗條件下,,溫度23℃,光照時(shí)間8h,,培養(yǎng)8~12周,。。
體外動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要大量谷氨酰胺,利用量常超過其他必須氨基酸利用量的總和,。維生素是維持細(xì)胞生長(zhǎng)的生物活性物質(zhì),,在細(xì)胞代謝中起調(diào)節(jié)及控制作用。維生素可分為水溶性和脂溶性兩類,,水溶性維生素主要包括泛酸,、維生素B12、葉酸,、煙酰胺,、吡哆醛、硫胺素,、核黃素,、維生素C、膽堿,、肌醇等,;脂溶性維生素主要包括維生素A、D,、E,、K等;有的培養(yǎng)液中還直接采用ATP和輔酶A,;大部分培養(yǎng)基中還有生物素,。許多維生素參與構(gòu)成各種酶的活性基團(tuán)的成分,沒有它們,,酶便沒有活性,,代謝活動(dòng)將無法進(jìn)行。比如,,泛酸可以在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)變成?;d體蛋白和輔酶(如輔酶A),參與糖類,、脂類和蛋白質(zhì)代謝中的催化反應(yīng),;維生素B12則在細(xì)胞內(nèi)參與葉酸的合成和脂肪酸的合成等。不同配方的細(xì)胞培養(yǎng)基中維生素的濃度有較大差異,。例如,,DMEM培養(yǎng)基中維生素的含量約為MEM培養(yǎng)基的兩倍,其原因是一方面不同種類維生素的作用不同,,另一方面不同種類的細(xì)胞對(duì)維生素的需求也可能有較大差異,,相應(yīng)細(xì)胞培養(yǎng)基的配方中維生素的含量也可能不同。無機(jī)鹽是細(xì)胞維持生命活動(dòng)所不可缺少的營(yíng)養(yǎng)成分,,主要有Na+,、K+,、Ca2+、Mg2+,、Cl-、PO43—,、SO42—,、HCO3-等,主要作用為維持細(xì)胞培養(yǎng)液滲透壓平衡,。MEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)研究,。
Nutrientagar)培養(yǎng)基品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬-50萬培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng)1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對(duì).再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源,。2.培養(yǎng)基的制備記品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬-50萬【分享】146種培養(yǎng)基的制備和大家一起分享bbs/images/品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬-50萬培養(yǎng)基制備的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)名稱:培養(yǎng)基制備的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)關(guān)鍵詞:培養(yǎng)基制備標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的:如何使用成品培養(yǎng)基干粉制備各種合格的分離培養(yǎng)基,。背景知識(shí):選填項(xiàng)目原理:選填項(xiàng)目主體內(nèi)容:操作步驟1.在玻璃容器中加入所需蒸餾水的二分之一量,品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬-50萬酵母培養(yǎng)基的制備一,、目的要求了解合成培養(yǎng)基,、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。學(xué)習(xí)和掌握麥芽汁培養(yǎng)基,、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基,、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用,。江蘇RPMI1640培養(yǎng)基有哪些
RPMI1640培養(yǎng)基能夠維持細(xì)胞的代謝活性,。黑龍江DMEM/F12培養(yǎng)基
本發(fā)明涉及植物**培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,尤其是涉及一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法,。背景技術(shù):繡球(hydrangeamacrophylla)為虎耳草科繡球?qū)俾淙~灌木,別名八仙花,、**花、粉團(tuán)花,、雪球花,、草繡球等,是園林上應(yīng)用***的觀賞植物,。原產(chǎn)于我國(guó)長(zhǎng)江流域及以南,,自然株高2m。葉對(duì)生,,倒卵或橢圓形,,邊緣有鋸齒,傘房花序頂生,,直徑20cm,,近球形,。花色多變,,青白色,,漸轉(zhuǎn)粉紅色,再轉(zhuǎn)紫紅色,,花色美艷,。其花色又常隨土壤的酸堿度而改變,土壤ph值4~6時(shí),花色多呈藍(lán)色,;ph值,,則呈紅色。繡球花葉片翠綠,,花色鮮艷,,盛開時(shí)花團(tuán)錦簇,美麗多姿,,每簇花可開2個(gè)月之久,,觀賞期長(zhǎng)。由于繡球花的孕性花極為少數(shù),,所以不易結(jié)種,,常用分株、壓條或扦插方法繁殖,,但分株,、壓條繁殖倍率低,速度慢,,而扦插繁殖又會(huì)受到季節(jié)的限制,,不能常年生產(chǎn)苗木,很難滿足市場(chǎng)的需求,。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足,,本發(fā)明的目的之一是提供一種繁殖周期短,效率高,,成本低的繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法,。本發(fā)明的上述發(fā)明目的是通過以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的:一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法,具體步驟如下:s1:外植體選擇,;s2:外植體消毒,;s3:誘導(dǎo)培養(yǎng);s4:增殖培養(yǎng),;s5:生根培養(yǎng),,其中。黑龍江DMEM/F12培養(yǎng)基