M199細(xì)胞培養(yǎng)基1950年Morgan等設(shè)計(jì)的具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液,,即M-199。除BSS外,,含有53種成分,,為多方面培養(yǎng)基,主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng),。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長(zhǎng)期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞,,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞?,F(xiàn)普遍用于病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn),。McCoy5A培養(yǎng)基1959年MeCoy為肉瘤細(xì)胞設(shè)計(jì),,BSS+40種成分??芍С侄喾N(如骨髓,、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長(zhǎng),,除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外,,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)支持,。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細(xì)胞,、人淋巴細(xì)胞、HT-29,、BHL-100等上皮細(xì)胞,。 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基有什么特點(diǎn)?上海中喬新舟告訴您,。上海子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基滅菌
胞培養(yǎng)液的構(gòu)成細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長(zhǎng)的液體環(huán)境,,一般指完全培養(yǎng)液,添加了血清,、水解乳蛋白,、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液。1.細(xì)胞培養(yǎng)基&血清模式血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長(zhǎng)和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來說是需要的,,因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng),,如MEM培養(yǎng)基,,較為常用的量為5%~10%的比例,而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3%左右,,細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響,。2.細(xì)胞培養(yǎng)基&乳歐液模式化學(xué)合成培養(yǎng)基現(xiàn)雖已大規(guī)模使用,但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用,,以補(bǔ)充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸,、小肽物質(zhì)。較為常用的方式是用漢氏(Hanks’BSS)或歐式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白(一般為5‰濃度),,即成乳漢(歐)液,,再與化學(xué)合成培養(yǎng)基(一般為MEM)按比例混合使用。3.細(xì)胞培養(yǎng)基&各類添加劑(生長(zhǎng)因子等)模式成分復(fù)雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物,,包括蛋白質(zhì),、多肽、核苷,、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物,、酸及脂類等。已發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的血清濃度減少時(shí),,這些成分都是必需的,。既使在使用血清的情況下,這些成分也可幫助細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)及維持某些特殊細(xì)胞系的生長(zhǎng),。 天津扁桃體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基類型上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的市場(chǎng)應(yīng)用分析,。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
不同細(xì)胞培養(yǎng)基存儲(chǔ)過程中的注意事項(xiàng)通常液體細(xì)胞培養(yǎng)基避免-20℃凍存,,因?yàn)榻鈨鰰r(shí)可能會(huì)有營(yíng)養(yǎng)成份析出,,影響培養(yǎng)效果。正常情況下于2~8℃避光保存,,使用前從冰箱取出,,放入室溫進(jìn)行平衡。通常的液體培養(yǎng)基有效期是6個(gè)月到12個(gè)月,。液體細(xì)胞培養(yǎng)基盡量避免長(zhǎng)期貯存,,其中的谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)而慢慢分解,如果細(xì)胞生長(zhǎng)不良,,可考慮檢測(cè)培養(yǎng)基中的谷氨酰胺含量確定是否再補(bǔ)加谷氨酰胺,。市售商業(yè)化液體細(xì)胞培養(yǎng)基有具體的有效期,對(duì)于使用干粉細(xì)胞培養(yǎng)基自行配制成液體以后,,也應(yīng)低溫(2~8℃)貯存,。除培養(yǎng)基中如谷氨酰胺易降解之外,培養(yǎng)基中的其他成份隨著溫度的升高也可能會(huì)發(fā)生降解或是析出,。
HamF10細(xì)胞培養(yǎng)基1963年Ham設(shè)計(jì),,含微量元素,,可在血清含量低時(shí)用,適用于克隆化培養(yǎng),。F10適用于倉鼠,、人二倍體細(xì)胞,特適于羊水細(xì)胞培養(yǎng),。DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基Ham'sF12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的,,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)。由于營(yíng)養(yǎng)成分豐富,,且可以使用較少血清,,故也常作為無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。上皮細(xì)胞培養(yǎng)基有哪些種類,?上海中喬新舟告訴您,。
DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,起初是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的,。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用,。初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要,,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L,,這就是大家常說的低糖和高糖了。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,特別適用于生長(zhǎng)速度快,、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,也適用于附著性較差,,但又不希望它脫離原來生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng),。例如CHO細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)乙肝疫苗,、CHO細(xì)胞表達(dá)EPO。 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的制作方法難嗎,?上海中喬新舟告訴您,。上海子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基滅菌
上海中喬新舟簡(jiǎn)述 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)。歡迎來電咨詢上海中喬新舟,!上海子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基滅菌
動(dòng)物細(xì)胞大多數(shù)需要輕微的堿性條件,,適宜pH在7.2~7.4之間,。細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值通常需經(jīng)校正的pH計(jì)來測(cè)定。在細(xì)胞生長(zhǎng)過程中,,隨細(xì)胞數(shù)量的增多和代謝活動(dòng)的加強(qiáng),,二氧化碳不斷被釋放,培養(yǎng)液變酸,,pH值發(fā)生變化,。酚紅是細(xì)胞培養(yǎng)基中常用的pH指示劑,但依靠細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅等pH指示劑進(jìn)行判斷,,需要實(shí)驗(yàn)員的經(jīng)驗(yàn)積累,,存在較大的主觀性。實(shí)際上,,個(gè)性化細(xì)胞培養(yǎng)基或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅含量較少或是不含酚紅,,只能通過pH計(jì)或者pH電極進(jìn)行pH值的檢測(cè),結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠,。上海子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基滅菌
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1,、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2,、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清,、無血清、無異源蛋白無動(dòng)物成分培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒,、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒,、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒,、定量PCR芯片試劑盒,、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4,、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),,已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基,。
5,、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒,、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品,。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記,、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除,、小鼠基因敲除,、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。