常見的肝細(xì)胞系有HepG2,，Hepa1-6等，HepG2是來源于一個(gè)15歲白人的肝組織,；Hepa1-6來源于小鼠肝,，兩者都屬于永生細(xì)胞系，當(dāng)然也有永生細(xì)胞系具有的通性缺點(diǎn),，如與正常肝臟細(xì)胞相比遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,，生物學(xué)特性會隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加而發(fā)生遷移等。原代細(xì)胞是指從機(jī)體獲取組織細(xì)胞后的培養(yǎng),。由于離體時(shí)間短,，因此其能夠保持在體內(nèi)的生物學(xué)特性,，與細(xì)胞系相比，是更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型,。肝臟是作為機(jī)體“”的代謝,，其組成是極其復(fù)雜的，除了肝細(xì)胞,，還包含眾多內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞等組分，各類細(xì)胞功能各異并相互交流,，共同決定肝臟的代謝表型,。因此，當(dāng)我們要研究某一表型究竟是由于肝細(xì)胞自身的變化引起的,，還是由其他細(xì)胞類型所介導(dǎo)的時(shí),，使用小鼠肝臟組織是無法說清問題的，使用原代肝細(xì)胞能夠避免其他細(xì)胞的影響,，從而得到更加準(zhǔn)確地結(jié)論,。原代細(xì)胞相對于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，更加可控,，可給予的實(shí)驗(yàn)干預(yù)也更多,。 原代肝細(xì)胞廠家直供優(yōu)勢。歡迎來電咨詢上海中喬新舟,！山東雞 家禽原代肝細(xì)胞中喬新舟

原代肝細(xì)胞培養(yǎng)物可用作置換組織或,。利用原代細(xì)胞重建受損組織或替換無功能的細(xì)胞或組織的研究正在進(jìn)行中,。培養(yǎng)技術(shù)和研究正在胚胎和成人干細(xì)胞培養(yǎng)上進(jìn)行,。這些細(xì)胞具有分化為許多不同類型的細(xì)胞和的能力。通過控制這些細(xì)胞的發(fā)育和分化,，我們也許能夠多種醫(yī)學(xué)疾病,。原代細(xì)胞也已普遍用于3D生物打印應(yīng)用中。干細(xì)胞療法：從骨髓,、血液或胚胎中分離出來的干細(xì)胞涉及原代細(xì)胞培養(yǎng),。患者自己的干細(xì)胞或來自供體的干細(xì)胞在體外生長,，以產(chǎn)生足夠的細(xì)胞，這些細(xì)胞可用于再生組織或替代功能缺陷的細(xì)胞,。這個(gè)領(lǐng)域正在探索中,，以設(shè)計(jì)針對遺傳疾病,、脊髓損傷,、退行性疾病和的療法,。 山東雞 家禽原代肝細(xì)胞中喬新舟原代肝細(xì)胞的詳細(xì)介紹,。歡迎來電咨詢上海中喬新舟！

    HBV是一種包膜DNA病毒,，只能在高度分化的人肝細(xì)胞中復(fù)制,。HBV的復(fù)制模板以游離的、共價(jià)閉合的環(huán)狀DNA（cccDNA）形式存在于細(xì)胞的核中,。批準(zhǔn)使用的核苷（酸）類似物可以有效抑制病毒血癥,，但它們無一靶向cccDNA，也就不能有效地徹底乙肝,。因此,，進(jìn)行體外研究來鑒定和開發(fā)新的抗病毒策略，尤其是沉默或降解cccDNA的策略非常有必要,。由于肝細(xì)胞是HBV的天然靶細(xì)胞,，因此新鮮制備或高質(zhì)量的冷凍人原代肝細(xì)胞（PHH）是HBV體外研究的金標(biāo)準(zhǔn)。PHH是非轉(zhuǎn)化細(xì)胞,，對HBV高度易感并有效支持HBV復(fù)制的所有步驟,。但由于從分離后接種到塑料培養(yǎng)皿上它們就開始去分化，在一段時(shí)間的體外培養(yǎng)后會失去對HBV的敏感性（即使是在比較好的2D培養(yǎng)條件下）,。

    目前,，NAFLD動(dòng)物模型和細(xì)胞模型仍然是研究NAFLD發(fā)病機(jī)制及藥物防治的重要手段。動(dòng)物模型雖然能很好地模擬體內(nèi)環(huán)境,，但是存在造模周期長,、個(gè)體差異大、實(shí)驗(yàn)結(jié)果難以控制等問題,，而細(xì)胞模型個(gè)體差異小,、影響因素較少、實(shí)驗(yàn)條件可控性強(qiáng)[8-11],。鑒于細(xì)胞模型能較好地克服動(dòng)物模型的不利因素,，因此,，建立NAFLD體外細(xì)胞模型對于研究其發(fā)病機(jī)制,，為進(jìn)一步防治NAFLD具有重要的理論意義與普遍的實(shí)用價(jià)值,。肝脂肪變性細(xì)胞模型是公認(rèn)的研究NAFLD有效的細(xì)胞模型，目前多采用肝細(xì)胞株HepG2,，通過給予不同比例與濃度的游離脂肪酸(freefattyacids,FFA)混合物(油酸∶棕櫚酸=2∶1),，誘導(dǎo)造模[12-13]，但因HepG2細(xì)胞株來源于腫瘤細(xì)胞,，與正常生理?xiàng)l件下的肝細(xì)胞仍存在著差異[14],。因此采用健康C57BL/6J小鼠的原代肝細(xì)胞建立脂肪變性細(xì)胞模型，旨在建立一種更接近于臨床的肝細(xì)胞脂肪變性模型,，為NAFLD的研究奠定基礎(chǔ),。 上海中喬新舟的 原代肝細(xì)胞怎么樣？歡迎來電咨詢上海中喬新舟,！

傳代培養(yǎng)：1.倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),，確定細(xì)胞是否需要傳代。2.培養(yǎng)液瓶打開后,，過酒精燈火焰,，置酒精燈火焰周圍。3.拿出直頭滴管,，套上橡皮吸頭,，過火，放入培養(yǎng)液瓶中,。4.打開培養(yǎng)瓶,，瓶口過火，將培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液輕輕倒入廢液缸,，用2-3mLPBS洗去殘留的舊培養(yǎng)基,。5.培養(yǎng)瓶加入，用量以薄薄蓋滿一層為宜,，37℃消化,，倒置顯微鏡下觀察到細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫離胰酶,，然后將胰酶倒掉,，加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基。6.取彎頭滴管反復(fù)吹打細(xì)胞使其脫壁并分散,，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,，制成細(xì)胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中,。蓋上瓶蓋,，適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn)，以利于CO2氣體的進(jìn)入，將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱,。7.對半貼壁培養(yǎng)細(xì)胞,，不需胰酶，直接吹打,，加入新鮮培養(yǎng)基,，然后分裝到各瓶中。 原代肝細(xì)胞的定制尺寸,。歡迎來電咨詢上海中喬新舟,！山東雞 家禽原代肝細(xì)胞中喬新舟

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    凍存：1.吸取傳代后的細(xì)胞懸液,，離心，去除培養(yǎng)液,，加入凍存液,，分裝凍存管（凍存管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為（5～10）×106個(gè)/ml，2ml凍存管中一般放1～）,。2.按步凍存冷凍保存方法一：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/min,；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5～-10℃/min,；到-100℃時(shí),，則可迅速浸入液氮中。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之程序降溫機(jī)中每分鐘降1～3℃至-80℃以下,，再放入液氮長期保存,。復(fù)蘇：1.取出冷凍管，立即放入37℃水浴箱中快速解凍,，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,，移入無菌操作臺內(nèi)。2.打開凍存管,，將細(xì)胞懸液吸到離心管中,。，棄去上清液,。4.加適當(dāng)培養(yǎng)液后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,，37℃培養(yǎng)，第二天觀察生長情況,。 山東雞 家禽原代肝細(xì)胞中喬新舟

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