熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱(chēng),，其中*有代表性的是來(lái)自螢火蟲(chóng)體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類(lèi)螢光素酶，分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,，在luciferin氧化的過(guò)程中，會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence),，可通過(guò)熒光測(cè)定儀設(shè)備測(cè)定luciferin氧化過(guò)程中釋放的生物熒光,，常應(yīng)用于啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。熒光素酶的具體應(yīng)用,，主要有以下兩個(gè)方面：(一)：pGL3-Basic---用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)與啟動(dòng)子活性分析,。把待分析啟動(dòng)子區(qū)段構(gòu)建到F-Luciferase上游，和轉(zhuǎn)錄因子共轉(zhuǎn)染分析F-Luciferase活性即可反應(yīng)啟動(dòng)子的活性高低,。該質(zhì)粒通常需要結(jié)合持續(xù)性表達(dá)R-Luciferase的載體作為內(nèi)參以校正不同樣品之間轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率,。(二)：psiCHECK2---miRNA與其靶點(diǎn)相關(guān)分析,包括miRNA靶基因驗(yàn)證、lncRNA與circRNA吸附miRNA驗(yàn)證等,。  需要把miRNA潛在結(jié)合靶點(diǎn)克隆到R-Luciferase (hRLuc) 3’UTR區(qū)域,，然后與待測(cè)miRNA共同轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)測(cè)定R-Luciferase活性高低，F(xiàn)-Luciferase (hLuc+)作為校正內(nèi)參校正不同樣品之間轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率,。MTT法又稱(chēng)MTT比色法,，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。堿性磷酸酶

在正常免疫應(yīng)答過(guò)程中,，人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 可以驅(qū)使白細(xì)胞定向遷移到受傷或gan染部位以保護(hù)機(jī)體防御外來(lái)致病物,，但是在特定的環(huán)境中,，免疫細(xì)胞也會(huì)因過(guò)度活化而攻擊正常組織，導(dǎo)致自身免疫性疾病,。人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 因此也和許多自身免疫性和過(guò)敏性等疾病相關(guān)聯(lián),，包括多發(fā)性硬化癥、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,、動(dòng)脈硬化,、哮chuan和移植排斥等。

如甲狀腺,鹽水可提取核抗原抗體(ENA),抗核抗體,DNA,抗心磷脂抗體,類(lèi)風(fēng)濕因子,循環(huán)免疫復(fù)合物,抗胰島細(xì)胞抗體,胰蛋白酶原,Sm,大皰性類(lèi)皰瘡,蛋白酶,短膜蟲(chóng)法,肝-腎,肝-腎-胃,肌內(nèi)膜抗體,角蛋白抗體,抗核抗體,抗核糖體蛋白抗體,抗聚角蛋白微絲蛋白抗體,抗鏈O,抗卵巢抗體,抗平滑肌抗體,抗線(xiàn)粒體抗體,抗心肌抗體,抗組蛋白抗體,粒細(xì)胞彈性蛋白酶,皮膚抗體,腎上腺抗體,腎小球基底膜,腎小球基底膜抗體,髓過(guò)氧化物酶,條紋肌抗體,網(wǎng)硬蛋白抗體,胃壁細(xì)胞抗體,胃蛋白酶,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,細(xì)菌性滲透性增強(qiáng)因子等,。 免疫學(xué)ELISA試劑盒FACS可以用于分離表達(dá)GFP的細(xì)胞和不表達(dá)GFP的細(xì)胞,。

細(xì)胞毒性是由合成化合物、細(xì)胞自然產(chǎn)生毒性或免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞(如細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞,自然殺傷細(xì)胞等)引起的細(xì)胞殺傷事件,。目前主要通過(guò)對(duì)受損細(xì)胞釋放的相關(guān)底物(如乳酸脫氫酶-LDH)進(jìn)行定量,從而判斷細(xì)胞膜的受損情況,。本期，將為大家講解有關(guān)細(xì)胞毒性的檢測(cè)產(chǎn)品,、原理及特點(diǎn)等內(nèi)容,。

細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)是生物相容性測(cè)試的一種，檢測(cè)藥物或者新型材料在生物環(huán)境中的毒性情況,，即通過(guò)檢測(cè)材料或者藥物對(duì)細(xì)胞的增殖或者生長(zhǎng)的影響,，來(lái)評(píng)價(jià)藥物或材料的毒性或者活性，主要用于藥物活性篩選,、細(xì)胞增殖測(cè)定,、細(xì)胞毒性測(cè)定、抗**藥效測(cè)定等,；常用MTT法或者CCK-8法檢測(cè),，另外也可以通過(guò)Live/dead雙染法進(jìn)行細(xì)胞成像，更直觀(guān)的記錄細(xì)胞的存活情況,。

細(xì)胞增殖是通過(guò)細(xì)胞分裂引起的細(xì)胞數(shù)量增加,，在整個(gè)生命周期中對(duì)正常組織發(fā)育和維持是必須的。一些類(lèi)型的細(xì)胞會(huì)處于持續(xù)增殖狀態(tài),，如皮膚和骨髓細(xì)胞,，但許多成人組織中的細(xì)胞會(huì)處于非增殖狀態(tài)，只有在損傷或感ran時(shí),，才能被激huo來(lái)補(bǔ)充細(xì)胞,。與之相反，細(xì)胞周期關(guān)鍵基因突變引起的細(xì)胞增殖失調(diào)是各類(lèi)cancer的標(biāo)志,，會(huì)造成**異常的不受控制的生長(zhǎng),。增殖檢測(cè)一般用于分析分裂中的細(xì)胞數(shù)量的變化,，進(jìn)而反應(yīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)及活性,，細(xì)胞增殖檢測(cè)是細(xì)胞分析和藥物研發(fā)中經(jīng)常會(huì)使用的手段。目前廣泛應(yīng)用于**生物學(xué),，分子生物學(xué),，藥代動(dòng)力學(xué)等領(lǐng)域。慢病毒攜帶的基因組可整合到宿主基因組,，使宿主細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定表達(dá)外源基因,。

慢病毒載體（Lentiviralvector）較逆轉(zhuǎn)錄病毒載體有更廣的宿主范圍，慢病毒能夠有效感ran非周期性和有絲分裂后的細(xì)胞,。慢病毒載體能夠產(chǎn)生表達(dá)shRNA的高滴度的慢病毒,，在周期性和非周期性細(xì)胞、干細(xì)胞,、受精卵以及分化的后代細(xì)胞中表達(dá)shRNA,，實(shí)現(xiàn)在多種類(lèi)型的細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因小鼠中特異而穩(wěn)定的基因表達(dá)的功能性沉默，為在原代的人和動(dòng)物細(xì)胞組織中快速而高效地研究基因功能,，以及產(chǎn)生特定基因表達(dá)降低的動(dòng)物提供了可能性,。慢病毒作為siRNA的攜帶者，不但具備特異性地使基因表達(dá)沉默的能力,，而且充分發(fā)揮了慢病毒載體自身所具備的優(yōu)勢(shì),，為基因功能的研究提供了更強(qiáng)有力的工具。慢病毒載體可以將外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色體上,，從而達(dá)到持久性表達(dá)目的序列的效果,。對(duì)于一些較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，如原代細(xì)胞,、干細(xì)胞,、不分化的細(xì)胞等，使用慢病毒載體,，能大da提高目的基因或目的shRNA的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,，且目的基因或目的shRNA整合到宿主細(xì)胞基因組的幾率大da增加，能夠比較方便快捷地實(shí)現(xiàn)目的基因或目的shRNA的長(zhǎng)期,、穩(wěn)定表達(dá),。研究者可以利用光來(lái)檢測(cè)、測(cè)量和控制分子信號(hào),、細(xì)胞和細(xì)胞群,，以便了解它們的活動(dòng)。Human MYLK-MYLKP1 Pseudogene Transcription Analysis qPCR Kit

GFP可以標(biāo)記轉(zhuǎn)基因修飾的ES細(xì)胞,，然后可以將其用于轉(zhuǎn)入小鼠并產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因小鼠,。堿性磷酸酶

就eGFP而言，相對(duì)于GFP,，其熒光強(qiáng)度更強(qiáng),、熒光性質(zhì)更穩(wěn)定,。mCherry是從DsRed演化來(lái)的性能*好的一個(gè)單體紅色熒光蛋白，可以和GFP系列熒光蛋白共用,，實(shí)現(xiàn)多色標(biāo)記,。熒光蛋白活性和被融合的目標(biāo)蛋白功能相互沒(méi)有明顯影響。這些熒光標(biāo)簽蛋白,，其融合表達(dá)目的蛋白后具有以下優(yōu)點(diǎn)：1.不用破碎組織細(xì)胞和不加任何底物,，直接通過(guò)熒光顯微鏡就能在活細(xì)胞中發(fā)出綠色熒光，實(shí)時(shí)顯示目的基因的表達(dá)情況,，而且熒光性質(zhì)穩(wěn)定,，被譽(yù)為活細(xì)胞探針。2.其自發(fā)熒光,，不需用目的基因的抗體或原位雜交技術(shù)就可推知目的基因在細(xì)胞中的定位等情況,。3.同時(shí)細(xì)胞內(nèi)的其它產(chǎn)物不會(huì)干擾標(biāo)簽蛋白檢測(cè)，從而使其檢測(cè)更顯得快速,、簡(jiǎn)便,、靈敏度高而且重現(xiàn)性。4.其低消耗,、高靈敏度檢測(cè),，十分適用于高通量的藥物篩選。因此現(xiàn)eGFP表達(dá)標(biāo)簽被廣fan地應(yīng)用于基團(tuán)表達(dá)調(diào)控,、轉(zhuǎn)基因功能研究,、蛋白在細(xì)胞中的功能定位、遷移變化及藥物篩選等方面,。5.mCherry紅色熒光蛋白在標(biāo)記病毒顆粒,，研究病毒和宿主細(xì)胞之間更有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)。如用mRFP或mCherry標(biāo)記HIV病毒顆粒,，研究HIV和宿主細(xì)胞問(wèn)的相互作用以及HIV侵染宿主細(xì)胞的過(guò)程．用mRFP標(biāo)記慢病毒顆粒,，研究慢病毒在小鼠體內(nèi)的復(fù)制過(guò)程等。堿性磷酸酶

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1,、原代細(xì)胞：ScienCell（中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理）人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞,。

2、培養(yǎng)基：原代細(xì)胞**低血清,、無(wú)血清,、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。

3,、細(xì)胞培養(yǎng)試劑：胎牛血清,、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒,、細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、ELISA試劑盒,、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等,。

4、細(xì)胞系（株）：種類(lèi)豐富（1000余種）,，已通過(guò)STR鑒定,；提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。

5,、自研產(chǎn)品：支原體檢測(cè)/qing除試劑盒,、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品,。

6,、技術(shù)服務(wù)：綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記,、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,，細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除,、小鼠基因敲除,、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。