Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒,,是一種基于WST-8(化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),,適用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
實驗原理:WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品,,在電子耦合試劑存在的情況下,,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物(formazan)。顏色的深淺與細胞的增殖成正比,,與細胞毒性成反比,。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值,間接反映活細胞數(shù)量,。
用途:CCK-8法應(yīng)用非常廣fan,,如藥物篩選、細胞增殖測定,、細胞毒性測定,、**藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。 CCK-8試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細胞活性和細胞毒性檢測的快速,、高靈敏度試劑盒,。人神經(jīng)傳導(dǎo)與膜轉(zhuǎn)運定量PCR芯片試劑盒
CCK8試劑盒提供了一種靈敏度高,操作簡便,,使用安全,重現(xiàn)性好的細胞增殖與活性檢測方法,。與傳統(tǒng)的MTT相比無需有機溶劑和放射性同位素,,步驟少,無損失,,結(jié)果準確,!本試劑盒檢測非常便捷,。試劑盒jin一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作 ,。無須使用同位素,,所有的檢測步驟jin在同一塊96孔板內(nèi)完成,。不必洗滌細胞,,不必收集細胞,,也不必采用額外的步驟去溶解formazan,??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測,。1. MTT實驗生成的甲臜不是水溶性的,,需要使用DMSO等有機溶劑溶解,;而本方法產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,不僅省去了溶解的步驟,,更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差,。2. 與MTT方法相比,本方法線性范圍更寬,,靈敏度更高,。本方法對細胞無毒性,,因此加入WST-8顯色后,,可以在不同時間反復(fù)用酶標儀讀數(shù)多次測定從而找到*佳測定時間,。3. 本方法所用試劑在培養(yǎng)基中比MTT更加穩(wěn)定,,實驗效果重復(fù)性好,。4. MTT具有毒性,,同時其生成的甲臜需要有機溶劑溶解,,會對操作人員身體造成危害。本試劑無毒,,使用中無需有機溶劑,,操作更加安全,。5. 本試劑盒在4℃避光可長期保存,,使用無需配制,,即開即用。6. 酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾(扣除空白孔即可)微生物草酰乙酸轉(zhuǎn)羥化酶ELISA試劑盒ALP陽性,,未分化的細胞染成紅色,,為監(jiān)測干細胞分化/未分化提供了有效的系統(tǒng)。
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)zhi的診斷試劑離不開優(yōu)zhi的原料,,如抗原抗體,,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,,而抗原或抗體的標記物如酶標結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn),。
每種試劑都有其佳反應(yīng)模式,,其中溫度和溫育時間控制是重要因素,。因孵育溫度高,反應(yīng)時間長,,會造成整板本底高,陽性率高,。溫育般用濕盒或水浴,,ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放,,以保證各板溫度都能迅速平衡,,為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,。作為記錄測定結(jié)果的儀器,,酶標儀的性能穩(wěn)定與否,,決定結(jié)果的可靠度,。先酶標儀應(yīng)定期進行保養(yǎng),對濾光片要定期校正,;其次酶標儀波長設(shè)置要正確,好使用雙波長,,個檢測波長,,個參比波長,,以消除微孔板底部劃痕,、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,,在用酶標儀讀數(shù)時好先擦試微孔板底部并壓平板條,。由于各種酶標儀性能有所不同,,使用中應(yīng)詳細閱讀說明書,。 幾乎不受環(huán)境pH影響。
WST-1細胞活力和增殖檢測試劑盒描述:
通過存在于活細胞中的琥珀酸四唑還原酶將四唑鎓鹽還原成有色甲compounds化合物,,提供了測量細胞活力和增殖的靈敏且準確的方法,。然而,*常用的四唑鹽MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物]的缺點是由MTT產(chǎn)生的甲dye染料極不溶于水,,因此分光光度定量需要額外的提取步驟,。ScienCell WST-1細胞活力和增殖測定使用四唑鹽WST-1[2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺苯基)-2H四唑]。WST-1在代謝活性細胞上產(chǎn)生高度水溶性的福爾馬贊,,允許直接和用戶友好的細胞活力和增殖的比色測量,。 細胞毒性非常低,,因此加入WST-8顯色后,,可以在不同時間反復(fù)用酶標儀讀數(shù)從而找到較好測定時間,。生物素elisa試劑盒
磷酸化特異性ELISA試劑盒專為研究信號通路中涉及的細胞內(nèi)蛋白的研究人員而設(shè)計。人神經(jīng)傳導(dǎo)與膜轉(zhuǎn)運定量PCR芯片試劑盒
其局限性:① ELISA數(shù)據(jù)不能提供單個細胞產(chǎn)生因子的能力和頻率;②因受刺激細胞群的細胞因子產(chǎn)生是短暫的,,并且不同細胞因子基因的表達動力學(xué)可以變化,,故可能需要在幾個時間點收集測試樣品以更好地表征實驗動物或培養(yǎng)細胞群的細胞因子產(chǎn)生,。③在任何一個時間點測量的細胞因子蛋白濃度可能反映細胞因子分泌,細胞因子攝取的并發(fā)過程,。通過細胞和細胞因子蛋白降解,。由于這些過程,,測量的細胞因子蛋白水平可能xian zhu低估細胞的實際細胞因子產(chǎn)生潛力。④試劑不統(tǒng)一,,標準不統(tǒng)一,,故定量不準確等,。人神經(jīng)傳導(dǎo)與膜轉(zhuǎn)運定量PCR芯片試劑盒
上海中喬新舟生物科技有限公司
1,、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞,。
2,、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清,、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基,。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清,、原代細胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒,、細胞生長因子,、ELISA試劑盒,、定量PCR芯片試劑盒,、DNA/RNA及細胞裂解物等,。
4,、細胞系(株):種類豐富(1000余種),,已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基,。
5,、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒,、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品,。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標記,、熒光素酶標記,、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細菌基因敲除,、細胞基因敲除,、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實驗,。