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廣東酶標(biāo)儀檢驗(yàn)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-24

熒光酶標(biāo)儀是用來進(jìn)行熒光的檢測(cè).通過激發(fā)光柵分光后的特定波長(zhǎng)的光照射到被熒光物質(zhì)標(biāo)定的樣品上后,,會(huì)發(fā)出波長(zhǎng)更長(zhǎng)的發(fā)射光,,通過發(fā)射光柵后到達(dá)檢測(cè)器,。熒光的強(qiáng)度與樣品的濃度呈一定的比例。熒光檢測(cè)靈敏度高,可實(shí)時(shí)檢測(cè),,使用方便,檢測(cè)模式多樣,但是容易受外界干擾,,激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響,,干擾檢測(cè),。
化學(xué)發(fā)光是來自生物化學(xué)反應(yīng)中的自發(fā)光,可分為輝光型和閃光型兩種類型,。輝光型發(fā)光持久,,穩(wěn)定,能持續(xù)一段時(shí)間,;閃光型發(fā)光時(shí)間短,,變化快,穩(wěn)定性不強(qiáng),,需要應(yīng)用自動(dòng)加樣器才可以進(jìn)行,。化學(xué)發(fā)光中發(fā)出的光子數(shù)與樣品量呈一定比例關(guān)系,,化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀靈敏度非常高,,動(dòng)力學(xué)范圍廣。
酶標(biāo)儀內(nèi)置濾光片輪,,可選擇試驗(yàn)所需的不同波長(zhǎng)的濾光片來進(jìn)行分光,。廣東酶標(biāo)儀檢驗(yàn)

如何測(cè)定的吸光度范圍?
通常,酶標(biāo)儀的吸光度測(cè)定范圍在0-2.5之間即可以滿足ELISA的測(cè)定要求,。早期的酶標(biāo)儀可測(cè)定的吸光度一般在0-2.5之間,,但現(xiàn)在基本上都做了拓寬,可達(dá)到3.5以上,,并且能保持很好的精密度與線性,。
對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何,。
酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,,亦有單通道)檢測(cè),一般為硅光管或光導(dǎo)纖維,,除測(cè)定通道外,,有的酶標(biāo)儀還有一個(gè)參比通道,每次測(cè)定可進(jìn)行自我校準(zhǔn),。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)功能如何,,均可通過酶標(biāo)儀測(cè)定的吸光度范圍、線性度,、精密度和準(zhǔn)確度等體現(xiàn)出來,。光學(xué)系統(tǒng)好的話,則上述指標(biāo)也應(yīng)較佳,。測(cè)定的精密度與測(cè)定通道之間的均一性有直接關(guān)系,。單通道可避免因通道不同所致的差異。
浙江多功能酶標(biāo)儀波長(zhǎng)范圍廣酶標(biāo)儀比較廣用于醫(yī)院、血站,、防疫站,、生物制品等部門。

選擇酶標(biāo)儀的檢測(cè)波長(zhǎng):
405nm:ELISA檢測(cè),,底物是PNPP,;
405-420:ELISA檢測(cè),底物是ABTS,;
450nm:
1. 科研應(yīng)用:
細(xì)胞增殖檢測(cè)CCK-8,;ELISA檢測(cè),底物是TMB,;
ELISA檢測(cè),,底物是OPD(pH5.0,OPD比較**長(zhǎng)450,;pH1.0,,OPD比較**長(zhǎng)492);
2. 醫(yī)療應(yīng)用:
丙肝,、乙肝檢測(cè),;HIV檢測(cè);甲胎蛋白的測(cè)定AFP(肺免疫學(xué)檢測(cè)),;CA15-3(乳腺的測(cè)定),;單純皰病毒的檢測(cè)等等。
3. 農(nóng)業(yè)檢測(cè):
動(dòng)物疫病檢測(cè),,禽類疫病檢測(cè),;
4. 食品與環(huán)境安全:
檢測(cè),獸藥殘留檢測(cè),,添加劑檢測(cè),,檢測(cè)。
490nm:細(xì)胞增殖檢測(cè)MTT,;
540nm:一氧化氮(NO)檢測(cè),;
562nm:蛋白質(zhì)濃度測(cè)定(BCA);
595nm:蛋白質(zhì)濃度測(cè)定(考馬斯亮藍(lán)染色),;

濾光片是酶標(biāo)儀中重要的光學(xué)元件,,它的作用是根據(jù)不同的波長(zhǎng)選擇性地透過或反射光線,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品信號(hào)的分離和增強(qiáng),。濾光片可以分為干涉濾光片和吸收濾光片兩種,,前者是利用多層薄膜之間的干涉效應(yīng)來實(shí)現(xiàn)波長(zhǎng)選擇,后者是利用染料或金屬等材料對(duì)特定波長(zhǎng)的吸收來實(shí)現(xiàn)波長(zhǎng)選擇,。干涉濾光片具有透過率高,、帶寬窄,、溫度穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),是目前酶標(biāo)儀中常用的濾光片類型,。
酶標(biāo)儀中常用的濾光片有三種:激發(fā)濾光片,、發(fā)射濾光片和參考濾光片,。激發(fā)濾光片位于光源和樣品之間,,用于選擇合適的激發(fā)波長(zhǎng)來激發(fā)樣品發(fā)出熒光或化學(xué)發(fā)光。發(fā)射濾光片位于樣品和探測(cè)器之間,,用于選擇合適的發(fā)射波長(zhǎng)來檢測(cè)樣品發(fā)出的熒光或化學(xué)發(fā)光,。參考濾光片位于參考探測(cè)器前面,用于消除環(huán)境因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響,,提高檢測(cè)精度,。
國(guó)內(nèi)多家機(jī)構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心和計(jì)劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性,。

酶標(biāo)儀的使用:
1. 準(zhǔn)備工作:在使用酶標(biāo)儀之前,,需要將儀器進(jìn)行預(yù)熱,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的濾光片,。同時(shí),,需要將標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測(cè)樣品的反應(yīng)體系準(zhǔn)備好。
2. 測(cè)量吸光度:將標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測(cè)樣品分別加入反應(yīng)體系中,,然后將反應(yīng)體系放入酶標(biāo)儀中進(jìn)行測(cè)量,。在測(cè)量過程中,需要選擇合適的波長(zhǎng)和濾光片,,并設(shè)置好空白對(duì)照組,。
3. 計(jì)算結(jié)果:根據(jù)測(cè)量結(jié)果,可以計(jì)算出待測(cè)樣品中物質(zhì)的含量,。具體計(jì)算方法如下:
(1)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值和物質(zhì)含量,。
(2)根據(jù)待測(cè)樣品的吸光度值和標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出待測(cè)樣品中物質(zhì)的含量。
(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析,。
光吸收的檢測(cè)技術(shù)成熟,,成本低,操作簡(jiǎn)單,。山西酶標(biāo)儀檢驗(yàn)

酶標(biāo)儀常用波長(zhǎng)為:405nm,,450nm,490nm與630nm,。廣東酶標(biāo)儀檢驗(yàn)

寶予德K3 Plus酶標(biāo)儀測(cè)量參數(shù):
1. 單波長(zhǎng)檢測(cè):在一個(gè)波長(zhǎng)下測(cè)量吸光度(也稱為終點(diǎn)法),。
2. 雙波長(zhǎng)檢測(cè):用兩個(gè)波長(zhǎng)測(cè)量吸光度,**終結(jié)果為***次的測(cè)量結(jié)果減去第二次測(cè)量的結(jié)果,。
3. 雙時(shí)法檢測(cè):在兩個(gè)不同的時(shí)間點(diǎn)測(cè)量板的吸光度,。**終結(jié)果為第二次測(cè)量的結(jié)果減去***次測(cè)量的結(jié)果。
4. 動(dòng)力學(xué)檢測(cè):測(cè)量吸光度變化率。
5. 多波長(zhǎng)檢測(cè):每一列的吸光值用各自不同的波長(zhǎng)檢測(cè),。只在基礎(chǔ)酶聯(lián)程序中可用,。
K3 Plus酶標(biāo)儀**于測(cè)量通過微孔板的吸光度值,采用8通道垂直檢測(cè)光路光密度檢測(cè)理念,,**多可同時(shí)配置8塊濾光片,,波長(zhǎng)范圍400~750nm,儀器性能穩(wěn)定,,更大的彩色液晶觸摸屏,,可視用戶界面,簡(jiǎn)單易用,,在各種科研應(yīng)用中具有出色的靈活性,。
廣東酶標(biāo)儀檢驗(yàn)

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