超微量分光光度計(jì)在核酸定量和分析中的應(yīng)用:
分光光度測(cè)定法是一項(xiàng)定量和分析生物成分的成熟技術(shù),。其中,,核酸是生物實(shí)驗(yàn)室**常檢測(cè)的生物成分之一。確定這些樣品的濃度和純度對(duì)許多下游實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要,。
核酸主要吸收260nm下的紫外光,,其濃度可以應(yīng)用朗伯比爾定律通過(guò)它們的相關(guān)消光系數(shù)和樣品光程計(jì)算出來(lái)。
首先,,260nm的紫外光直接照射樣品,,并且穿過(guò)樣品,而另一邊的光電檢測(cè)器則測(cè)定有多少光被吸收,。通過(guò)對(duì)照參比(一般是樣品稀釋液),,可以定量樣品中的核酸濃度。
Micro Drop微陣列檢測(cè)功能可以篩選有效的熒光標(biāo)記雜交探針用于芯片試驗(yàn),。江蘇全光譜波長(zhǎng)超微量分光光度計(jì)探針檢測(cè)
超微量分光光度計(jì)比色法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度:
蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物,,比色法測(cè)定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng),,產(chǎn)生有色物質(zhì),。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān),從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度,。
比色方法一般有BCA,,Bradford,Lowry等幾種方法,。
Lowry法:以**早期的Biuret反應(yīng)為基礎(chǔ),并有所改進(jìn),。蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng),,產(chǎn)生藍(lán)色的反應(yīng)物,。但是與Biuret相比,Lowry法敏感性更高,。缺點(diǎn)是需要順序加入幾種不同的反應(yīng)試劑;反應(yīng)需要的時(shí)間較長(zhǎng);容易受到非蛋白物質(zhì)的影響;含EDTA,,Tritonx-100等物質(zhì)的蛋白不適合此種方法。
重慶雙檢測(cè)模式超微量分光光度計(jì)核酸檢測(cè)熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,。
Micro Drop蛋白質(zhì)檢測(cè)功能:
Protein & Labels檢測(cè)類型:
Protein & Labels可以用來(lái)檢測(cè)蛋白的濃度(A280nm)和熒光染料的濃度(蛋白芯片標(biāo)記物),。它還可通過(guò)吸光值的比值來(lái)檢測(cè)金屬蛋白(如血色素)的純度。
Micro Drop能夠準(zhǔn)確檢測(cè)100pmol/μl的熒光染料和20mg/ml的蛋白(BSA)而不用稀釋,。
1. 在功能鍵中選擇蛋白質(zhì),,在檢測(cè)方式中選擇Protein & Labels。
2. 輸入樣品編號(hào),。
3. 從樣品下拉框中選擇檢測(cè)樣品的類型,,默認(rèn)的設(shè)定為1 Abs=1mg/ml。
4. 選擇濃度單位,,默認(rèn)的單位是mg/ml,。
5. 使用下拉菜單來(lái)選擇染料,默認(rèn)的染料1為Cy3,,染料2為Cy5,。
6. 可以選擇基線校正,默認(rèn)的校準(zhǔn)波長(zhǎng)為340nm,,也可以重新輸入一個(gè)校準(zhǔn)波長(zhǎng),。
7. 選擇疊加顯示可以在采樣曲線框中顯示多個(gè)檢測(cè)樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
8. 用干凈的無(wú)塵紙擦干凈上下基座,,使用合適的液體建立空白對(duì)照,,空白對(duì)照液體能夠溶解目標(biāo)溶液??瞻讓?duì)照液體的pH值和離子濃度應(yīng)和檢測(cè)樣品一樣,。
在分光光度計(jì)中,將不同波長(zhǎng)的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時(shí),,便可得到與不同波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)的吸收強(qiáng)度,。如以波長(zhǎng)(λ)為橫坐標(biāo),吸收強(qiáng)度(A)為縱坐標(biāo),,就可繪出該物質(zhì)的吸收光譜曲線,。利用該曲線進(jìn)行物質(zhì)定性、定量的分析方法,,稱為分光光度法,,也稱為吸收光譜法。用紫外光源測(cè)定無(wú)色物質(zhì)的方法,,稱為紫外分光光度法,;用可見(jiàn)光光源測(cè)定有色物質(zhì)的方法,,稱為可見(jiàn)光光度法。它們與比色法一樣,,都以Lambert-Bee定律為基礎(chǔ),。上海寶予德科學(xué)儀器有限公司歡迎大家來(lái)電咨詢!MicroDrop基座模式下光程1.0,、0.2,、0.1和0.05mm自動(dòng)調(diào)整。
A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長(zhǎng),,比較好測(cè)量值的范圍為0.1至1.0,。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,,使之在此范圍內(nèi),;如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準(zhǔn)確,,樣品內(nèi)有懸浮物等)影響,。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請(qǐng)注意,,這個(gè)值跟儀器無(wú)關(guān),,核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,,因?yàn)闃悠分械碾s質(zhì)和顆粒這些不純物的干擾通常 會(huì)對(duì)光有一定吸收,,其值<0.1);
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長(zhǎng).
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長(zhǎng):
A260/A280:是核酸純度的指示值,。純度好的DNA或RNA,,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應(yīng)該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA),。如果比值低于1.8 或者2.0,,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5,。若比值小于2.0標(biāo)明樣品被碳水化合物(糖類),、鹽類或有機(jī)溶劑污染,需要純化樣品,。
熒光分光光度計(jì)有兩個(gè)單色器,,而一般紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)只有一個(gè)單色器。北京超微量分光光度計(jì)探針檢測(cè)
每種核酸的分子構(gòu)成不一,,因此其換算系數(shù)不同,。定量不同類型的核酸,事先要選擇對(duì)應(yīng)消光因子。江蘇全光譜波長(zhǎng)超微量分光光度計(jì)探針檢測(cè)
超微量分光光度計(jì)新晉小生——寶予德MicroDrop簡(jiǎn)介:
一機(jī)多用:既可使用超微量基座,,也可使用常規(guī)比色皿,,想怎么測(cè)就怎么測(cè)!
開(kāi)機(jī)即用:交貨后即可使用 – 安裝時(shí)不需要進(jìn)行任何調(diào)節(jié),。
上樣量少:上樣范圍0.5μl-2μl,節(jié)約珍貴的樣本,。
無(wú)線連接:無(wú)需數(shù)據(jù)線連接電腦,,從此告別雜亂的數(shù)據(jù)連接線,儀器可自發(fā)WiFi信號(hào),。
全光譜范圍:可檢測(cè)185-910nm波長(zhǎng)下樣本的吸光值,,檢測(cè)范圍廣,基座模式下因?yàn)榭s短了光程,,檢測(cè)濃度范圍非常廣闊,,dsDNA:2-15000ng/ul,無(wú)需稀釋樣品,,簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程,,減少實(shí)驗(yàn)誤差,能夠滿足極大部分用戶的需求,。
檢測(cè)快速:全波長(zhǎng)掃描時(shí)間只需5s,,每個(gè)樣品所需要的時(shí)間不到5秒鐘,快速的檢測(cè)速度為大量的樣品檢測(cè)節(jié)省了寶貴時(shí)間,。
美觀簡(jiǎn)約:自重2.1kg,,便于移動(dòng),,占地面積小,,節(jié)省實(shí)驗(yàn)臺(tái)面空間。
數(shù)據(jù)存儲(chǔ):可自定義選擇數(shù)據(jù)存儲(chǔ),,不僅能夠自動(dòng)保存檢測(cè)原始數(shù)據(jù),,也可導(dǎo)出Excel數(shù)據(jù)表,方便計(jì)算后續(xù)實(shí)驗(yàn)的加樣量,。
江蘇全光譜波長(zhǎng)超微量分光光度計(jì)探針檢測(cè)