IdeSProtease全稱免疫球蛋白G降解酶(ImmunoglubulinG-degradingenzymeofStreptococcuspyogenes,IdeS),,是由人類致病菌釀膿鏈球菌(Streptococcuspyogenes)產(chǎn)生并分泌至胞外的一種半胱氨酸水解酶,。該蛋白酶具有極高的底物特異性,能識(shí)別IgG,,在抗體下鉸鏈區(qū)的特定位點(diǎn)進(jìn)行酶切,,使IgG水解為完整的F(ab’)2片段和Fc片段。IdeS可識(shí)別人源和其他多種動(dòng)物來源的IgG,比如人,、兔,、猴、綿羊以及人動(dòng)物嵌合IgG等,。IdeS具有獨(dú)特的底物選擇性,,可以作為工具酶應(yīng)用于抗體類藥物或抗體融合蛋白藥物的結(jié)構(gòu)表征分析。本產(chǎn)品利用大腸桿菌重組表達(dá),,純度高,,具有良好的酶切活性,是用于表征抗體,、Fc融合蛋白和抗體-藥物復(fù)合物的有價(jià)值的工具,。產(chǎn)品信息規(guī)格2000U/5000U產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(Chinesesynonym)免疫球蛋白G降解酶英文別名(Englishsynonym)IdeSProtease來源(Source)大腸桿菌表達(dá)標(biāo)簽(label)N-terminalHisTag純度(Purity)經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度>95%分子量(Molecularweight)35.3kDa緩沖液組分(Buffer)50mM磷酸鈉,,150mMNaCl(pH6.6),,50%glycerolC5a通過與髓源性抑制細(xì)胞 (MDSCs) 膜上的受體C5aR1結(jié)合,招募MDSCs至炎癥局部,,抑制CD8+ T細(xì)胞增殖與功能,。Recombinant Mouse IL-16
生物學(xué)功能纖維蛋白原在凝血過程中起到?jīng)Q定性作用。當(dāng)血管受損時(shí),,凝血酶激發(fā)纖維蛋白原,,轉(zhuǎn)化為不溶性的纖維蛋白,形成穩(wěn)定的凝塊,,從而實(shí)現(xiàn)止血,。醫(yī)學(xué)應(yīng)用凝血障礙纖維蛋白原注射液可用于先天性或獲得性纖維蛋白原缺乏癥,以及手術(shù)中的異常出血,。功能性食品添加劑免疫球蛋白因其特殊的免疫生理功能,,被研究作為功能性食品添加劑。藥物載體牛血清白蛋白(BSA)常作為藥物分子的載體,,用于研究藥物在體內(nèi)的運(yùn)輸和代謝過程,。前景展望隨著蛋白質(zhì)工程技術(shù)的發(fā)展,牛血漿中纖維蛋白原的大規(guī)模生產(chǎn)和應(yīng)用前景廣闊,。未來研究應(yīng)著重于提高提取效率,、降低成本,并擴(kuò)大其在新藥開發(fā),、組織工程和診斷學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用,。結(jié)論牛血漿中的纖維蛋白原不僅在凝血過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,而且在醫(yī)學(xué)研究中具有重要價(jià)值,。通過優(yōu)化提取和純化工藝,,可以更好地利用這一資源,,為人類健康做出貢獻(xiàn)。Recombinant Human NKG2A&CD94 Protein,mFc Tag由于其在細(xì)胞外基質(zhì)中的存在,,透明質(zhì)酸在細(xì)胞黏附,、遷移、增殖和分化過程中扮演著關(guān)鍵角色,。
利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到編碼土豆羧肽酶抑制劑(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,,CPI)活性多肽基因,克隆于表達(dá)載體pGEX一4T一1的多克隆位點(diǎn)中,,得到重組質(zhì)粒pGCPI,,測序后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體茵EscherichiacoliBL21中。重組茵經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),,超聲波破茵后,,通過谷胱甘肽sepheroseFF親和層析柱一步純化得到融合蛋白,純度大于97%,。融合蛋白經(jīng)凝血酶切割并分離除去谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶后得到純度大于98%的重組CPI,,ELISA鑒定產(chǎn)物具有免疫原性,體外檢測表明其促進(jìn)纖溶的生物功能與天然CPI無明顯差異,。
透明質(zhì)酸酶,,英文名稱Hyaluronidase,一類能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸活性的酶的總稱,,結(jié)構(gòu)上由4個(gè)相同亞基構(gòu)成,,每個(gè)亞基分子量接近14kDa,該酶是一種糖蛋白,,包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺,。功能上該酶可隨機(jī)裂解透明質(zhì)酸,、軟骨素和硫酸軟骨素中的β-N-乙酰己糖胺-[1→4]糖苷鍵,。常與膠原酶聯(lián)合使用于降解細(xì)胞外基質(zhì),從而從組織中分離活細(xì)胞,。本品來源于牛睪丸,,活力值為400–1,000units/mg,合適的pH值為4.5–6.0,。產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(ChineseSynonym)玻璃糖醛酸酶,;玻璃酸酶英文別名(EnglishSynonym)Hyaluronoglucosaminidase;Hyaluronate4-glycanohydrolaseCAS號(hào)(CASNO.)37326-33-3來源(Source)牛睪丸分子量(MolecularWeight)~55kDa類型(Type)I-S外觀(Appearance)淡黃色至米黃色至褐色粉末PNGase F可以用于釋放糖鏈,,進(jìn)而通過質(zhì)譜等技術(shù)進(jìn)行糖鏈的詳細(xì)結(jié)構(gòu)分析,。
大腸桿菌系統(tǒng)通常是小分子細(xì)胞質(zhì)蛋白或結(jié)構(gòu)域表達(dá)的宿主。用大腸桿菌生產(chǎn)蛋白質(zhì),,由于只需要簡單的培養(yǎng)基和條件,,因此費(fèi)用低且方便。此外,除了無細(xì)胞表達(dá),,它是速度的系統(tǒng),,大腸桿菌倍增時(shí)間(約20min)比酵母(2h)、昆蟲細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞都快,。一般來說,,在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白包括:1.將一個(gè)編碼目標(biāo)蛋白的質(zhì)粒導(dǎo)入宿主菌;2.培養(yǎng)細(xì)胞至對數(shù)生長期,;3.誘導(dǎo)蛋白表達(dá),。選擇合適的表達(dá)載體合適的宿主選定后,相應(yīng)的有許多工程化克隆位點(diǎn)和用于驅(qū)動(dòng)蛋白表達(dá)的非編碼序列的載體可用,。啟動(dòng)子通常是可誘導(dǎo)的,,以在細(xì)胞生長到合適的密度前阻止目標(biāo)蛋白表達(dá)。大部分載體還提供目標(biāo)蛋白與一系列蛋白標(biāo)簽構(gòu)建融合蛋白的選擇,。常用的大腸桿菌表達(dá)載體分為以下兩大類:E.coliRNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的載體泛素化是一種蛋白質(zhì)翻譯后修飾過程,,涉及將泛素分子共價(jià)結(jié)合到靶蛋白上。這個(gè)過程由一系列酶促反應(yīng)組成,。Recombinant Mouse DDT Protein,His Tag
全長膜蛋白由于其天然構(gòu)象,,是跨膜蛋白藥物開發(fā)中的好的抗原。在細(xì)胞中的表達(dá)水平通常較低,。Recombinant Mouse IL-16
產(chǎn)品描述纖維蛋白原(Fibrinogen,,F(xiàn)g),即凝血因子I,,分子量約340kDa,,由α、β,、γ三對不同多肽鏈組成,,多肽鏈間以二硫鍵相連。α鏈分子量63.5kDa,,β鏈分子量56kDa,,γ鏈分子量47kDa,纖維蛋白原約含4%碳水化合物,。纖維蛋白原參與凝血的原理:在凝血酶作用下,,α鏈與β鏈分別釋放出A肽與B肽,生成纖維蛋白單體,。在此過程中,,由于釋放了酸性多肽,負(fù)電性降低,,單體易于聚合成纖維蛋白多聚體,,但此時(shí)單體之間借氫鍵與疏水鍵相連,,尚可溶于稀酸和尿素溶液中。進(jìn)一步在Ca2+與活化的ⅩⅢ因子作用下,,單體之間以共價(jià)鍵相連,,則變成穩(wěn)定的不溶性纖維蛋白凝塊,完成凝血過程,。來源于不同物種(如來源于牛,、貓、狗,、豚鼠,、人、綿羊,、小鼠和大鼠等)的纖維蛋白原具有相似的結(jié)構(gòu)和性質(zhì),。因此,一般來源于一種哺乳動(dòng)物的纖維蛋白原可與其他來源的凝血酶交叉反應(yīng),,相反地來自一種哺乳動(dòng)物蛋白的凝血酶液也可注入多種動(dòng)物,,發(fā)生凝血反應(yīng)。Recombinant Mouse IL-16