樣本制備后的保存 為了盡可能地減少轉(zhuǎn)錄組的變化,，在對細胞進行清洗和計數(shù)后，單細胞懸液應當保存于冰上,，直至用于后續(xù)的上機和文庫制備步驟,。在理想狀況下，一旦制備好樣本,，應當在3min鐘內(nèi)將其用于下游步驟,。然而，您還有必要了解各類細胞的不同性質(zhì),，因為這可能會影響細胞應在冰上保存的時間，以及它們在制備后多久便應當被盡快使用,。例如,，有些細胞（如PBMC）如果在冰上放置一段時間，它們就開始形成團塊,。這些團塊很難解離,，增加了堵塞的風險，而且每個團塊被當成單細胞計數(shù),，又降低了細胞計數(shù)的準確性,。此外，有些細胞更加粘稠,，形成團塊的速度更快,。對于這些細胞，必須盡量減少制備和使用之間的時間差,。單細胞測序平臺,，烈冰提供高性價比服務方案。天津10X單細胞測序服務公司

單細胞RNA-seq,、RNA-seq和逆轉(zhuǎn)錄qPCR（RT-qPCR）都采用一個共同過程,，即分離RNA并將其轉(zhuǎn)化為cDNA進行分析。不過,，每種分析在開展方式和獲得的數(shù)據(jù)上有所不同,。RNA-seq和RT-qPCR都是先從大量細胞中分離RNA,，然后將其轉(zhuǎn)化為cDNA。RNA-seq是使用cDNA來構(gòu)建新一代測序文庫,，從而測定整個轉(zhuǎn)錄組的基因表達,。RT-qPCR則是從cDNA中擴增特定靶點，并通過熒光測定表達水平,。RT-qPCR限于已知靶點,，而RNA-seq可實現(xiàn)無偏倚的全轉(zhuǎn)錄組基因表達分析。然而,，這兩者只能提供細胞群體內(nèi)基因表達的平均情況,。單細胞RNA-seq則在分離RNA之前將單細胞分離到微孔或單個微反應容器中。然后用細胞特異性的條形碼標記RNA,，確保來自每個細胞的cDNA可以追溯到起源細胞,。與RNA-seq相似，帶有條形碼的cDNA也被用于構(gòu)建新一代測序文庫,，從而能夠?qū)γ總€細胞的整個轉(zhuǎn)錄組進行基因表達測定,。長沙10X Chromium X單細胞測序服務高通量測序技術(shù)是對傳統(tǒng)測序一次顛覆性的改變，一次對幾十萬到幾百萬條核酸序列進行測定,。

單細胞轉(zhuǎn)錄組測序是在單細胞水平上高通量測序分析基因表達譜的技術(shù),，突破傳統(tǒng)高通量測序的局限性，組織解離后,，單個樣本一次上機能捕獲500-20000個細胞,， 基于每個細胞分別建庫測序，獲得單個細胞的基因結(jié)構(gòu)和基因表達狀態(tài),，并鑒定細胞的類型,，可以在不同樣本間從細胞類型的組成和豐度角度進行比較，反映細胞間的異質(zhì)性,。而2021年橫空出世的10X Genomics Chromium X平臺實現(xiàn)了單塊chip上的百萬級別通量的細胞捕獲,，系統(tǒng)實現(xiàn)16個通道同時運行，每個通道可捕獲2000-20000個細胞（不混樣）,，并支持原Chromium Controller體統(tǒng)外的多種細胞捕獲百萬級別通量實驗,，可準確鑒別稀有細胞類型和適配大規(guī)模單細胞研究。

相對于Smart-Seq技術(shù)在細胞數(shù)量上的問題,，10X平臺普遍提供的細胞數(shù)量都在1000-20000不等的測序細胞量,，這個量級的測序細胞量已經(jīng)可以說能夠完全覆蓋絕大部分組織的Single Cell群體類型。因此,，這兩種技術(shù)對于基于基因表達進行準確細胞分型上,，無論是從細胞數(shù)量上來說還是表達檢測可靠性來說，都會更實用。同時依托Random Cell Label技術(shù),，使得其對于NovaSeq,、HiSeq X Ten、Hiseq 4000等設備存在的Index hooping現(xiàn)象,，相對于Smart-Seq數(shù)據(jù)來說,，影響幾乎可以忽略不計（10X Genomics官方網(wǎng)站曾給出hooping測試結(jié)果，顯示無影響,。烈冰測序服務已助力300余篇國際期刊研究文章發(fā)表,。

烈冰科技作為國內(nèi)率先同時擁有10X Genomics和BD Rhapsody雙分選平臺的測序服務商及云計算服務供應商，經(jīng)過多年實戰(zhàn),，擁有豐富的單細胞懸液制備和分選經(jīng)驗,，實測BD Rhapsody對能夠高效捕獲粒細胞。針對不同的分選平臺,、建庫方法,，實戰(zhàn)總結(jié)搭建出不同的數(shù)據(jù)預處理工作流程；烈冰科技NovelBrain?生物大數(shù)據(jù)平臺能有效支撐生命科學研究,、醫(yī)療健康等領(lǐng)域?qū)Υ髷?shù)據(jù)分析的需求,。高通量測序?qū)嶒炂脚_，包括NovaSeq 6000,、10X Chromium X,、BD FACSMelody、PANNORAMIC數(shù)字切片掃描儀等,，配合一支來自海內(nèi)外名校,、多學科交叉型的高素質(zhì)綜合團隊，為您的科學研究保駕護航,。烈冰單細胞多組學測序助您探究細胞類型特異性和基因調(diào)控網(wǎng)絡特征。成都10X單細胞測序多組學測序

經(jīng)驗豐富的實驗團隊,，為獲得示組織內(nèi)真實表達水平的高質(zhì)量冷凍切片提供硬件和技術(shù)保障,。天津10X單細胞測序服務公司

科研的魅力之處，在于無窮盡的探尋生命的本底,，通過單細胞測序,，我們對組織的分子基礎的研究也從初級到深層，并在單細胞層面逐漸達成一致,，那么不禁要問一句,，組織的空間位置到底重不重要？空間異質(zhì)性是功能的關(guān)鍵特征,，細胞的位置信息更能反應細胞命運調(diào)控機制和細胞譜系發(fā)生過程,。因此時間和空間即像組織的AB面，而不可否認的是,，此時空間坐標的記錄,，像一個還未長大的娃娃,，雖未觸及分子基礎研究的深層，但仍在努力攀登探尋生命本底的下一個高峰,。天津10X單細胞測序服務公司

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