單細胞測序實驗再樣本細胞上機分選簽,，需要對細胞數(shù)量、細胞活性進準判斷,，這對Single Cell分選標記,、建庫、下機數(shù)據(jù)的質量都具有著決定性的作用,。如若細胞計數(shù)偏高,，將會影響建庫的成功率；計數(shù)偏低,，則會提高雙細胞的比例,；而細胞活率過低，就會使測序數(shù)據(jù)的利用率大打折扣,，因此把好單細胞懸液質量這一關尤為重要,。而在鋪板過程中，由于不同操作人員手法具有不可避免的差異,，不同的液體流速將直接影響單細胞的入孔效果,。因此烈冰生物BD Rhapsody單細胞分選平臺配套了專門定制的電動移液器，其具有Prime Treat,、Cell Load,、Bead Load、Wash,、Lysis,、Retrieval多種操作模式，來對應各種不同的操作,。通過已經(jīng)設定的程序來控制液體的流速,，大幅度降低人為操作習慣帶來的差異，保證實驗操作的一致性,。BD 單細胞捕獲平臺搭配BD Scanner,，全流程實時質控,，項目質量盡在掌握。廣東BD VDJ單細胞測序

對于單細胞測序而言,，常常需要先構建細胞圖譜,，在此基礎上再開展后續(xù)各項分析，并且數(shù)據(jù)分析時以細胞聚類（cell cluster）為討論對象,，而不是像常規(guī)Bulk測序一樣以組別為分析對象,，因此單細胞測序項目對樣本入組要求沒有Bulk測序那樣嚴格，但是單細胞測序,，特別是目的為圖譜研究時,，需要通過提高樣本復雜度（增加樣本數(shù)），盡可能的構建某一疾病類型,、群體細胞圖譜信息,。因此，單細胞測序實驗設計時首先需要保證生物學重復,，不同樣本來源的樣本建議單獨進行細胞解離和捕獲,、建庫、測序,，以保證捕獲到足夠的細胞數(shù),，單個樣本分別捕獲細胞時，后續(xù)分析除了整體分析以外,，還可以做單樣本分析,，保證分析的完備準確性,。蘇州BD VDJ單細胞測序烈冰測序服務已助力300余篇國際期刊研究文章發(fā)表,。

您的珍貴樣本，還可以放心依賴烈冰生物BD Rhapsody單細胞捕獲系統(tǒng),，BD RhapsodyTM單細胞捕獲系統(tǒng)采用微孔技術,，對細胞的捕獲沒有偏好性，實現(xiàn)高達80%的微孔板捕獲率,，由于單個微孔板中容納了22萬+個微孔,，而現(xiàn)階段單細胞測序實驗技術通常要求單個樣本捕獲3000-5000，至高達10000個細胞,，即可滿足科研探索需求,，因此這種“泊松分布”的原理類似于上樣細胞的無限稀釋過程，但22萬+微孔的存在,，也對大體量細胞數(shù)目的科學研究有很好的包容性,，細胞通量分為可擴展至100-40000個細胞的捕獲（單個微孔板），滿足您的多重需求,。

什么時候要用到去死細胞的操作呢,？跟進烈冰生物多年單細胞測序服務經(jīng)驗來看,，當細胞懸液進行質量和活性檢測后，考慮對細胞活性在50%-70%的懸液進行去除死細胞的操作,。而太低活性的懸液（小于30%）,，懸液中細胞大量死亡，可能已經(jīng)丟失了原組織內的細胞比例和狀態(tài),，失真嚴重,，建議重新收集樣本進行新的實驗，保證數(shù)據(jù)的高質量和實驗結果的準確性,。但需要注意到,，去除死細胞的操作會損失一定的細胞數(shù)量，因此希望您在提供樣本時,，盡可能提供足量的細胞,，以備實驗過程中可能存在的細胞死亡的問題，BD Rhapsody單細胞捕獲平臺對樣本起始細胞量的要求較低,，一般提供10萬個細胞以上均可滿足需求,，特殊樣本可詳細咨詢烈冰生物。烈冰斥巨資引進Novaseq6000,，開啟更大通量測序新紀元,。

針對單細胞測序的細胞上樣數(shù)，為什么不建議捕獲到的細胞數(shù)量越高越好,？一味地追求高數(shù)量的細胞捕獲可能會存在一些問題,。例如在上機細胞懸液濃度固定時，如果目標細胞捕獲數(shù)增加到8000甚至10000,，上樣細胞懸液體積勢必增加,，在細胞懸液質量不是很理想（細胞活性<90%、碎片率>5%,、結團率均>5%）的情況下,，引入的背景信號會增加，分析結果不理想的直接體現(xiàn)包括：cell,、non-cell無法有效區(qū)分和Fraction reads in cells偏低,。當cell和non-cell無法有效區(qū)分時，會使得數(shù)據(jù)出現(xiàn)假陽性和假陰性結果,！當目標細胞捕獲數(shù)很大時,，多細胞率會增加，數(shù)據(jù)分析時,，此部分“cell”表現(xiàn)為基因檢測數(shù)和UMI檢測數(shù)是正常cell的N倍（N是一個GEM包裹的細胞數(shù)）,，導致所有細胞的統(tǒng)計數(shù)據(jù)（單個細胞基因檢測中位數(shù)、單個細胞UMI檢測中位數(shù)）虛高,。此部分“cell”雖然可以通過設置數(shù)據(jù)分析閾值進行過濾,，但是容易會有此類數(shù)據(jù)的殘留和正常高基因檢測細胞的人為去除,！十二年測序經(jīng)驗，烈冰生物單細胞多組學領域的佼佼者,。陜西BD VDJ單細胞轉錄組測序

單細胞測序是高通量測序下的又一重大技術突破,。廣東BD VDJ單細胞測序

據(jù)不完全統(tǒng)計，截至2022年6月,，烈冰生物助力發(fā)表單細胞文章近40篇,，從平臺應用比例來看，應用10X Genomics和BD Rhapsody兩大平臺發(fā)文比例各占50%左右,，研究類型涵蓋疾病發(fā)展,，靶點探索，免疫研究,，神經(jīng)發(fā)育,，干細胞分化，植物發(fā)育,，退行病變,，糖尿病，COVID-19等等研究,；從發(fā)表期刊水平來看,，烈冰生物聯(lián)合發(fā)表的單細胞文章，CNS一區(qū)期刊占比在30%以上,，其中包括immunity三篇,，Nature子刊3篇（Nature cell biology,Nature Plants，Nature communication）,風濕類領域ARD期刊1篇,，CUT 1篇,，Advanced Science多篇，IF大于10分以上文章占比高達68.5%,，烈冰專屬單細胞測序服務團隊,，將與您攜手譜寫下一篇“高分”新文章,。廣東BD VDJ單細胞測序

上海烈冰生物醫(yī)藥科技有限公司擁有生物科技,、醫(yī)藥科技、信息科技,、計算機科技領域內的技術開發(fā),、技術服務、技術轉讓,、技術咨詢,，市場營銷策劃，市場信息咨詢與調查（不得從事社會調查,、社會調研,、民意調查,、民意測驗），從事貨物及技術的進出口業(yè)務,，計算機,、軟件及耗材（除專控）,，軟件開發(fā)【依法須經(jīng)批準的項目,，經(jīng)相關部門批準后方可開展經(jīng)營活動】等多項業(yè)務，主營業(yè)務涵蓋單細胞測序,，生物大數(shù)據(jù)云分析平臺,，空間轉錄組測序，單細胞多組學測序,。目前我公司在職員工以90后為主,，是一個有活力有能力有創(chuàng)新精神的團隊。誠實,、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,，也是我們做人的基本準則。公司致力于打造***的單細胞測序,，生物大數(shù)據(jù)云分析平臺,，空間轉錄組測序，單細胞多組學測序,。公司深耕單細胞測序,，生物大數(shù)據(jù)云分析平臺，空間轉錄組測序,，單細胞多組學測序,，正積蓄著更大的能量，向更廣闊的空間,、更寬泛的領域拓展,。