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CHO細(xì)胞PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-10

產(chǎn)品特點(diǎn):PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),,是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級(jí)產(chǎn)品,。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙?;?;2.鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性,;3.含更長(zhǎng)連續(xù)性乙烯亞胺片段,,其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應(yīng)用領(lǐng)域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑,,適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,,以固體粉末形式提供,需用戶自行配置(詳情見使用方法),。如想申請(qǐng)PEI試用裝,,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加,!哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價(jià)比比較高,?CHO細(xì)胞PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

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對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞,,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,,可適當(dāng)降低鋪板密度,,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,,可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。更多關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢上海曼博生物!近期還有PEIfree申請(qǐng)活動(dòng),,歡迎咨詢上海曼博生物,!歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)Mine-bio,回復(fù)“PEI轉(zhuǎn)染試劑”即可領(lǐng)??!CHO細(xì)胞PEI轉(zhuǎn)染試劑常見問題PEI轉(zhuǎn)染試劑是不含動(dòng)物源成分的嗎?

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穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細(xì)胞濃度,,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),,去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。若想咨詢更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)信息,,歡迎咨詢上海曼博生物,!也歡迎關(guān)注公眾號(hào)Mine-bio回復(fù)“PEI申請(qǐng)”申請(qǐng)?jiān)囉醚b!

化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中常用的轉(zhuǎn)染方法,,主要包括兩類:陽(yáng)離子脂質(zhì)體和陽(yáng)離子聚合物,。其基本原理是利用陽(yáng)離子的化學(xué)分子與帶有負(fù)電荷的核酸通過正負(fù)電荷作用形成穩(wěn)定的復(fù)合物。一方面使復(fù)合體整體帶上正電荷(多數(shù)細(xì)胞膜表面帶有弱的負(fù)電荷,,通過電荷作用吸引復(fù)合體到細(xì)胞膜表面),;另一方面對(duì)線性的核酸進(jìn)行濃縮,使其體積變小更易穿透細(xì)胞膜,。陽(yáng)離子聚合物類轉(zhuǎn)染試劑可以說是貧窮實(shí)驗(yàn)室的福音了,。早在2012年就有研究小組在大名鼎鼎的Nature Protocol上發(fā)表了PEI作為轉(zhuǎn)染試劑的詳細(xì)方法,到現(xiàn)在被越來越多的實(shí)驗(yàn)室采用,。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)產(chǎn)品內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司,!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-Bio使用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是什么原因?

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PEI轉(zhuǎn)染試劑的殘留檢測(cè)方法是什么,?CHO細(xì)胞PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

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