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iPSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑

來源: 發(fā)布時間:2025-05-13

瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細胞濃度,,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,,每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序),。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當溶液體積較大時,,請用圓底聚丙烯管,,例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。4.孵育細胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測,。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。請自行確定檢測時間,。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,!無需復(fù)雜操作,,PEI試劑簡化基因?qū)肓鞒獭PSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑

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Polysciences 轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,,PEI)的產(chǎn)品,,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,,每相隔二個碳原子,即每“第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當有效的“質(zhì)子海綿”體(proton sponge),。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細胞,。有實驗證明,,分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966(PEI 25K)轉(zhuǎn)染效率表現(xiàn)優(yōu)良。北京高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理PEI轉(zhuǎn)染試劑主要用于大規(guī)模的蛋白表達和病毒包裝,。

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瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前,,用膠原酶消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,,總體積如表1所示,每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復(fù)合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,,例如Falcon5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染3h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。4.孵育細胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達,。請自行確定檢測時間,。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!歡迎關(guān)注公眾號Mine-bio

產(chǎn)品特點:PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),,是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品,。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙?;?;2.鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性,;3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,,其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應(yīng)用領(lǐng)域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑,,適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,以固體粉末形式提供,,需用戶自行配置(詳情見使用方法),。也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多詳情信息,!快速起效,,PEI助力科研人員在短時間內(nèi)獲得轉(zhuǎn)染結(jié)果。

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1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,,可適當降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化,。若有更多關(guān)于PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物。無需昂貴設(shè)備,,PEI試劑實現(xiàn)經(jīng)濟高效率的基因轉(zhuǎn)染方案,。PEI轉(zhuǎn)染試劑蛋白產(chǎn)量

有人知道PEI轉(zhuǎn)染試劑的價格嗎?iPSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑

產(chǎn)品簡介Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺(PEI轉(zhuǎn)染試劑)溶液,,由PEIMAX配置而成,,采用0.1umPES無菌過濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險,。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物,,這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞,并且Transporter5-DNA復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,,有效提高轉(zhuǎn)染效率,。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,,可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn),。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO,、COS,、HELA、昆蟲(SF9,、SF21)等真核細胞系,,可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒,所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染,。Transporter5可節(jié)省試劑準備時間,,加快項目進度。經(jīng)過嚴格的性能檢測,,確保品質(zhì),,在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復(fù)性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,。更多關(guān)于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑,歡迎咨詢上海曼博生物,!iPSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑