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國(guó)產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑廠(chǎng)家

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-06-25

注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒),。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)),。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性,。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞,。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌、或支原體污染,。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞,。近期還有PEIfree申請(qǐng)活動(dòng),,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!關(guān)注曼博生物公眾號(hào):Mine-bio,,私信回復(fù)關(guān)鍵詞:PEI申請(qǐng),,即可參加試用裝申請(qǐng)活動(dòng)。哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑比較好?國(guó)產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑廠(chǎng)家

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抗體藥物研發(fā)客戶(hù)提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì),,轉(zhuǎn)染試劑,、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無(wú)縫轉(zhuǎn)化,;以及提供藥物開(kāi)發(fā)和探索的抗體文庫(kù)定制和商業(yè)授權(quán)靈活的CHO工程細(xì)胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn),,以此希望幫助國(guó)內(nèi)科研工作者快速地接觸世界范圍內(nèi)的技術(shù),分享研發(fā)工具進(jìn)步帶來(lái)的技術(shù)紅利,,終為細(xì)胞,、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫(yī)學(xué)行業(yè)等乃至整個(gè)生命科學(xué)行業(yè)賦能!更多Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑等相關(guān)產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!近期還有PEI試用裝申請(qǐng)活動(dòng),,可關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,,后臺(tái)回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”參加活動(dòng)

PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗(yàn)。當(dāng)初試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)很有限,,被逼無(wú)奈只能放棄脂質(zhì)體2000,,選擇PEI,以至于相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi),,轉(zhuǎn)染試驗(yàn)都不順利,。下面是幾點(diǎn)關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點(diǎn):1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說(shuō)明書(shū),所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時(shí),,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,,順序不可錯(cuò),輕微混勻,,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時(shí),,一定要換液!換含有FBS的完全培養(yǎng)液,!因?yàn)镻EI對(duì)細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗(yàn)涉及到穩(wěn)定篩選,,建議把血清濃度適當(dāng)提高。PS:事實(shí)證明,,PEI是可行的,,已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物,!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio ,私信回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)“即可申請(qǐng)PEI試用裝,!PEI轉(zhuǎn)染試劑會(huì)有毒性嗎?

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上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,,依托于集團(tuán)公司泉心泉意深厚的資源和超過(guò)400家國(guó)內(nèi)客戶(hù)群體,生命科學(xué)領(lǐng)域一站式供應(yīng)鏈體系,,以及高風(fēng)險(xiǎn)生物危險(xiǎn)材料進(jìn)出口平臺(tái)的優(yōu)勢(shì),,曼博生物嚴(yán)格篩選國(guó)際創(chuàng)新且經(jīng)過(guò)同行驗(yàn)證過(guò)的產(chǎn)品和技術(shù),,引入中國(guó)市場(chǎng),開(kāi)發(fā),、孵育和推廣,,致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術(shù)帶入中國(guó),集中在為細(xì)胞/基因領(lǐng)域,、/免疫,,抗體藥物研發(fā)客戶(hù)提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì),,轉(zhuǎn)染試劑,、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無(wú)縫轉(zhuǎn)化,。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物,!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-Bio使用PEI轉(zhuǎn)染時(shí),,一般和DNA的比例是多少?進(jìn)口PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么

用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí),,一般和DNA的比例是多少呢?國(guó)產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑廠(chǎng)家

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),,去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。近期還有PEIfree申請(qǐng)活動(dòng),歡迎咨詢(xún)上海曼博生物,!歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)Mine-bio,,回復(fù)“PEI轉(zhuǎn)染試劑”即可領(lǐng)取,!國(guó)產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑廠(chǎng)家