材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾,，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,，加入20ml1M的HEPES,，調(diào)pH值到7.4,，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染,。轉(zhuǎn)染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。更多產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物,！轉(zhuǎn)染效率好的PEI轉(zhuǎn)染試劑是哪個品牌？四川PEI轉(zhuǎn)染試劑價格

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到宜轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化,。更多產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物,！四川PEI轉(zhuǎn)染試劑價格用PEI轉(zhuǎn)染試劑時,，一般和DNA的比例是多少?

PEI在于可以應用于體內(nèi)試驗。當初試驗經(jīng)費很有限,，被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,，選擇PEI，以至于相當長的時間內(nèi),，轉(zhuǎn)染試驗都不順利,。下面是幾點關于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書，所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,，一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,，順序不可錯，輕微混勻,，靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,，一定要換液！換含有FBS的完全培養(yǎng)液,！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,，建議把血清濃度適當提高。PS：事實證明,，PEI是可行的,，已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了。更多關于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物,！也歡迎關注我們的公眾號：Mine-bio ,，私信回復關鍵詞“PEI申請“即可申請PEI試用裝！

PEIMAX粉末配置方法：1)將1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃燒杯中,；2)放入攪拌轉(zhuǎn)子,，放置于磁力攪拌器上，設置攪拌程序以形成一個較小的漩渦,；3)等待PEIMAX40K完全溶解,，通常需要5分鐘左右；4)用25mL塑料移液管加入1N氫氧化鈉滴定至pH6.9~7.1,；5)如果不小心超過7.1,，則使用1N的鹽酸和新的塑料移液管將pH重新滴定至6.9~7.1；6)將溶液轉(zhuǎn)移到1L玻璃量筒中,，加入水定容至1L,；7)用無菌真空過濾膜過濾配制的轉(zhuǎn)染試劑溶液；8)按需分裝,，4°C儲存（切記不可冷凍）,；注：未經(jīng)配制的粉末有效期為2年。配置成液體后分裝在合適的瓶子中,，并且保存在4℃的轉(zhuǎn)染試劑將可在6個月之內(nèi)保持性能,。如jin用于蛋白定性研究，分裝的轉(zhuǎn)染試劑可延長有效使用期至1年,。如想申請PEI試用裝,，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種高分子化學類轉(zhuǎn)染試劑.

細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導入到靶細胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染，物理轉(zhuǎn)染和化學轉(zhuǎn)染,。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體,，以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見,，其侵染效率可以達到90%以上,，但常因安全性等問題，很多實驗室對其敬而遠之,。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因，無論哪一種都需要特定的設備，且一分錢一分貨,，性能好的價格也都很性感,。上海曼博生物是Polysciences官方授權du jia代理商，更多關于轉(zhuǎn)染試劑相關問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！也歡迎關注我們的公眾號：Mine-bio查看更多技術文章,！回復關鍵詞“PEI申請”可申請試用裝,！哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比較高？四川PEI轉(zhuǎn)染試劑價格

PEI轉(zhuǎn)染試劑會不會有毒性,？四川PEI轉(zhuǎn)染試劑價格

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）,。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）,。如有可能,，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞,。確保培養(yǎng)基沒有被細菌,、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。更多關于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物,！也歡迎關注我們的公眾號：Mine-bio ，私信回復關鍵詞“PEI申請“即可申請PEI試用裝,！四川PEI轉(zhuǎn)染試劑價格