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核酸PEI轉染試劑轉染步驟

來源: 發(fā)布時間:2024-10-12

1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板,,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化,。更多關于PEI轉染試劑相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物,!近期還有PEIfree申請活動,,歡迎咨詢上海曼博生物!歡迎關注我們的公眾號Mine-bio,,回復“PEI轉染試劑”即可領?。EI轉染試劑是不含動物源成分的嗎,?核酸PEI轉染試劑轉染步驟

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產品簡介Transporter5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺(PEI轉染試劑)溶液,,由PEIMAX配置而成,采用0.1umPES無菌過濾器,,完全消除支原體污染風險,。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,這些復合物很容易通過內吞作用進入細胞,,并且Transporter5-DNA復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,,有效提高轉染效率。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,,可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產。Transporter5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293,、CHO,、COS、HELA,、昆蟲(SF9,、SF21)等真核細胞系,可作用于大到135,000個核苷酸的質粒,,所以較大的質粒也可以成功地轉染,。Transporter5可節(jié)省試劑準備時間,,加快項目進度。經過嚴格的性能檢測,,確保品質,,在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復性好,、可用于批量產的轉染試劑,。江蘇PEI轉染試劑怎么樣PEI轉染試劑的殘留檢測方法是什么?

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上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務,,以創(chuàng)新和為價值理念,,通過自身研發(fā)團隊,以及與國內外專業(yè)科研團隊強強聯合,,不斷創(chuàng)新,,為生命科學和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產品和服務。生物醫(yī)學工程是綜合應用生命科學與工程科學的原理和方法,,從工程學角度在分子,、細胞、組織,、乃至整個人體系統(tǒng)多層次認識人體的結構,、功能和其他生命現象,研究用于防病,、治病,、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料、制品,、裝置和系統(tǒng)技術的總稱,。近期還有PEIfree試用裝申請活動,歡迎咨詢上海曼博生物,!關注曼博生物公眾號:Mine-bio,,私信回復關鍵詞:PEI申請,即可參加試用裝申請活動,。

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瞬時轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶),。調整細胞濃度,,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達,。請自行確定適合檢測時間,。如想申請試用裝,請關注公眾號:Mine-bio,,回復“申請PEI”,,即可參加!哪個品牌的PEI轉染試劑比較好?核酸PEI轉染試劑轉染步驟

用PEI轉染時,,一般和DNA的比例是多少呢?核酸PEI轉染試劑轉染步驟

抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產品,,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質,轉染試劑,、病毒轉導試劑,、基因編輯工具等產品和定制服務,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化,;以及提供藥物開發(fā)和探索的抗體文庫定制和商業(yè)授權靈活的CHO工程細胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產,,以此希望幫助國內科研工作者快速地接觸世界范圍內的技術,分享研發(fā)工具進步帶來的技術紅利,,終為細胞,、基因產業(yè)以及再生醫(yī)學行業(yè)等乃至整個生命科學行業(yè)賦能!更多關于轉染試劑相關產品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio查看更多技術文章!回復關鍵詞“PEI申請”可申請試用裝,!核酸PEI轉染試劑轉染步驟