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In vivoPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項

來源: 發(fā)布時間:2025-02-16

PEI在于可以應用于體內(nèi)試驗,。當初試驗經(jīng)費很有限,,被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,選擇PEI,,以至于相當長的時間內(nèi),,轉(zhuǎn)染試驗都不順利。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,,順序不可錯,輕微混勻,,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,,一定要換液!換含有FBS的完全培養(yǎng)液,!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當提高,。PS:事實證明,,PEI是可行的,已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,,可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司!歡迎關(guān)注曼博生物公眾號:Mine-bio專為細胞實驗設(shè)計,,PEI轉(zhuǎn)染試劑提升基因表達效率,。In vivoPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項

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注意事項質(zhì)粒質(zhì)量:請務必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)),。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性,。細胞條件:使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞,。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染,。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,,請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞,。如想申請PEI試用裝,,歡迎關(guān)注公眾號:Mine-bio,回復“申請PEI”,,即可參加,!聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑殘留檢測方法用PEI轉(zhuǎn)染試劑時出現(xiàn)沉淀什么原因呢?

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1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,,可適當降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化,。歡迎關(guān)注公眾號:Mine-bioPEI轉(zhuǎn)染試劑從96孔板到1000L生物反應器規(guī)模都能提供連續(xù)性的高表達蛋白或病毒。聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑殘留檢測方法

哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比會比較高呢?In vivoPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項

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