人間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達,,并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望,。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,但它未被批準(zhǔn)用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化,。因此,,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的,。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究,。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導(dǎo),。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!為提供更好的服務(wù),,上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH,。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負責(zé),。什么試劑可以增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率呢?高效慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)
聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導(dǎo),。在增強各種細胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中,轉(zhuǎn)導(dǎo)效率隨polybrene濃度的增加而增加,。但轉(zhuǎn)導(dǎo)增強的同時也會對細胞產(chǎn)生一定毒性作用,,polybrene不僅對細胞增殖有劑量依賴性抑制作用,還會不同程度的影響各類細胞的生長潛力。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,!快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成的。
陽離子聚合物的硫酸魚精蛋白(PS)Zui早被美國食品和藥物管理局批準(zhǔn)用于zhi liao肝素過量,。1989年,,Cornetta和Andersonshou ci提出PS可作為聚凝胺的替代品用于增強病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。在部分細胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中,,PS在不影響細胞增殖或分化潛能下使轉(zhuǎn)導(dǎo)效率提高1倍,,因此聚凝胺在基因zhi liao中的地位逐漸被取代。但PS不能增強慢病毒介導(dǎo)的原代小鼠T細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo),,對人CD34+外周血干細胞轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響也很小,,從而限制了它在一些基因zhi liao中的應(yīng)用,。此外,PS作為較早使用的增強劑之一,也常用于評定其他轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑效果的聯(lián)合測試,。
Lentiboost可增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,,高達90%以上,研究證明對于細胞增殖無不良影響,,且在T細胞中觀察到一定的促增殖效果,。可減少MOI,,從而降低物料成本,。均勻增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細胞的數(shù)量,但不會過度增加單個細胞病毒載體拷貝數(shù)(VCN),,符合FDA/EMA對ATMP產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn),。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,,通過降低細胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,促進慢病毒與細胞膜的融合,,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實驗中,并有相關(guān)藥物已上市銷售,。為提供更好的服務(wù),,上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor,,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負責(zé),。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑是什么試劑呢?
研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響,。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力,。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,,良好的生長狀態(tài)是達到高gan ran效率的保證,一般選擇細胞形態(tài)較好,、輪廓清晰,、處于對數(shù)生長期的細胞進行g(shù)an ran可提高gan ran效率。更多關(guān)于LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物,!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio國產(chǎn)和進口的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑哪個好呢,?快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案
新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒,。高效慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)
目前,,CAR-T細胞主要通過病毒載體制備,大多數(shù)情況下由慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒做載體,。慢病毒載體(LVs)由于其有效的將基因整合進靶細胞基因組,,穩(wěn)定的基因表達等特點,被認為是Zui有希望的基因zhi liao載體,。與其他病毒載體相比,,慢病毒載體的整合模式具有更低的致Ai風(fēng)險,以及隨機整合基因風(fēng)險低,,因此,,用慢病毒載體生產(chǎn)CAR-T細胞更加安全有效,而且靈活,。更重要的是慢病毒相較于其他病毒載體,,生產(chǎn)成本相對較低。另外,,慢病毒載體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分化細胞,,也可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分化細胞,因此,,慢病毒載體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)更為guang fan的細胞,,包括那些難轉(zhuǎn)導(dǎo)的血液前體細胞,神經(jīng)細胞,,淋巴細胞和巨噬細胞,。更多關(guān)于Revvity Gene Delivery GmbH(SIRION Biotech GmbH)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物,!高效慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)