穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí)，請(qǐng)用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),，去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。若想咨詢更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)信息,，歡迎咨詢上海曼博生物,！快速起效，PEI助力科研人員在短時(shí)間內(nèi)獲得轉(zhuǎn)染結(jié)果,。上海高質(zhì)量PEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理

接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí),，請(qǐng)用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí)，去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)問題，歡迎咨詢上海曼博生物,！安徽PEI轉(zhuǎn)染試劑PEI轉(zhuǎn)染試劑主要成分是什么,？

對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當(dāng)降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,，可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio,，相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences，后續(xù)購(gòu)買請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)備新品牌,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,，歡迎咨詢上海曼博生物!

產(chǎn)品簡(jiǎn)介Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級(jí)的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液，由PEIMAX配置而成,，采用0.1umPES無菌過濾器,，完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn),。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,，并且Transporter5-DNA復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,，有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,，可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293,、CHO、COS,、HELA,、昆蟲（SF9、SF21）等真核細(xì)胞系,，可作用于大到135,000個(gè)核苷酸的質(zhì)粒,，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。Transporter5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時(shí)間,，加快項(xiàng)目進(jìn)度,。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測(cè)，確保品質(zhì),，在新藥研發(fā)過程中是一款快速,、重復(fù)性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,。PEI轉(zhuǎn)染試劑使用的注意事項(xiàng)有哪些,？

產(chǎn)品特點(diǎn)：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級(jí)產(chǎn)品,。相比于PEI25K,，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙酰化）,；2.鹽酸鹽形式,，具更高的水溶特性；3.含更長(zhǎng)連續(xù)性乙烯亞胺片段,，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應(yīng)用領(lǐng)域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,，以固體粉末形式提供,，需用戶自行配置（詳情見使用方法）。也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio,，查看更多詳情信息,！PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種穩(wěn)定的具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子,。不同分子量PEI轉(zhuǎn)染試劑殘留檢測(cè)方法

PEI轉(zhuǎn)染試劑和其他轉(zhuǎn)染試劑相比有什么優(yōu)勢(shì)呢？上海高質(zhì)量PEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理

細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中常規(guī)的研究手段,，目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染,，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染,。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體，以慢病毒,、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見,，其侵染效率可以達(dá)到90%以上，但常因安全性等問題,，很多實(shí)驗(yàn)室對(duì)其敬而遠(yuǎn)之,。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因,，無論哪一種都需要特定的設(shè)備,，且一分錢一分貨，性能好的價(jià)格也都相對(duì)較高,。如想申請(qǐng)?jiān)囉醚b,，請(qǐng)關(guān)注公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)“申請(qǐng)PEI”,，即可參加,！上海高質(zhì)量PEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理