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PolyplusPEI轉(zhuǎn)染試劑運(yùn)輸方式

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-04-08

Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級(jí)的即用型線(xiàn)性聚乙烯亞胺(PEI轉(zhuǎn)染試劑)溶液,由PEI MAX配置而成,,采用0.1um PES無(wú)菌過(guò)濾器,,完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn)。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物,,這些復(fù)合物很容易通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,,并且Transporter 5-DNA 復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,有效提高轉(zhuǎn)染效率,。適用于工藝開(kāi)發(fā),、臨床前和早期臨床研究,可無(wú)縫過(guò)渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn),。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293,、CHO、COS,、HELA,、昆蟲(chóng)(SF9、SF21) 等真核細(xì)胞系,,可作用于大到135,000個(gè)核苷酸的質(zhì)粒,,所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。 Transporter 5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時(shí)間,,加快項(xiàng)目進(jìn)度,。經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的性能檢測(cè),,確保品質(zhì),,在新藥研發(fā)過(guò)程中是一款快速、重復(fù)性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,。產(chǎn)品特點(diǎn):非GMP,研究級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液,;高轉(zhuǎn)染效率,;無(wú)縫過(guò)渡到MAXgene GMP;易放大,,可預(yù)測(cè)產(chǎn)量,;用于工藝開(kāi)發(fā),臨床前和早期臨床研究,。PEI轉(zhuǎn)染試劑如何溶解和配置,?PolyplusPEI轉(zhuǎn)染試劑運(yùn)輸方式

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對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!MirusPEI轉(zhuǎn)染試劑作用原理PEI轉(zhuǎn)染試劑是不是可以保存在4度,?

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接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比,,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序),。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),,請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),,去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)問(wèn)題,,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物,!

Polysciences 轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,,PEI)的產(chǎn)品,,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,,已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子,,每相隔二個(gè)碳原子,,即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”體(proton sponge),。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,。有實(shí)驗(yàn)證明,分子量為25000的線(xiàn)性PEI即Polysciences 23966(PEI 25K)轉(zhuǎn)染效率表現(xiàn)優(yōu)良。PEI轉(zhuǎn)染試劑用什么溶劑配制?

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PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗(yàn),。當(dāng)初試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)很有限,,被逼無(wú)奈只能放棄脂質(zhì)體2000,,選擇PEI,以至于相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi),,轉(zhuǎn)染試驗(yàn)都不順利。下面是幾點(diǎn)關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點(diǎn):1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說(shuō)明書(shū),,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時(shí),,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,,順序不可錯(cuò),輕微混勻,,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時(shí),,一定要換液,!換含有FBS的完全培養(yǎng)液!因?yàn)镻EI對(duì)細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗(yàn)涉及到穩(wěn)定篩選,,建議把血清濃度適當(dāng)提高,。PS:事實(shí)證明,PEI是可行的,,已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了,。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交KyforaBio,相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為KyforaBiobyPolysciences,,后續(xù)購(gòu)買(mǎi)請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)備新品牌。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,,可咨詢(xún)上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司,!哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性?xún)r(jià)比會(huì)比較高呢?PolyplusPEI轉(zhuǎn)染試劑運(yùn)輸方式

MAXgene GMP是一種cGMP級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑,。PolyplusPEI轉(zhuǎn)染試劑運(yùn)輸方式

產(chǎn)品簡(jiǎn)介T(mén)ransporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級(jí)的即用型線(xiàn)性聚乙烯亞胺(PEI轉(zhuǎn)染試劑)溶液,,由PEIMAX配置而成,,采用0.1umPES無(wú)菌過(guò)濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn)。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物,,這些復(fù)合物很容易通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,并且Transporter5-DNA復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,,有效提高轉(zhuǎn)染效率,。適用于工藝開(kāi)發(fā),、臨床前和早期臨床研究,可無(wú)縫過(guò)渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn),。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO,、COS,、HELA、昆蟲(chóng)(SF9,、SF21)等真核細(xì)胞系,,可作用于大到135,000個(gè)核苷酸的質(zhì)粒,,所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。Transporter5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時(shí)間,,加快項(xiàng)目進(jìn)度,。經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的性能檢測(cè),,確保品質(zhì),在新藥研發(fā)過(guò)程中是一款快速,、重復(fù)性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,。更多關(guān)于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑,,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物,!PolyplusPEI轉(zhuǎn)染試劑運(yùn)輸方式