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支鏈PEI轉染試劑好用么

來源: 發(fā)布時間:2025-04-24

化學轉染方法是生物醫(yī)學研究中常用的轉染方法,主要包括兩類:陽離子脂質體和陽離子聚合物,。其基本原理是利用陽離子的化學分子與帶有負電荷的核酸通過正負電荷作用形成穩(wěn)定的復合物,。一方面使復合體整體帶上正電荷(多數(shù)細胞膜表面帶有弱的負電荷,,通過電荷作用吸引復合體到細胞膜表面),;另一方面對線性的核酸進行濃縮,,使其體積變小更易穿透細胞膜。陽離子聚合物類轉染試劑可以說是貧窮實驗室的福音了,。早在2012年就有研究小組在大名鼎鼎的Nature Protocol上發(fā)表了PEI作為轉染試劑的詳細方法,,到現(xiàn)在被越來越多的實驗室采用。為什么PEI轉染試劑配制的過程中要加酸,?支鏈PEI轉染試劑好用么

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對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。更多關于PEI轉染試劑相關產(chǎn)品技術問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-Bio.40KPEI轉染試劑說明書PEI轉染試劑是一種合成的聚乙烯亞胺聚合物,。

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細胞轉染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段,目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導入到靶細胞內,。目前主要有三種主流方法:生物轉染,物理轉染和化學轉染,。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體,,以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見,,其侵染效率可以達到90%以上,,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之,。物理轉染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因,無論哪一種都需要特定的設備,,且一分錢一分貨,,性能好的價格也都相對較高。如想申請試用裝,請關注公眾號:Mine-bio,,回復“申請PEI”,,即可參加!

材料:質粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,,0.2μm濾膜過濾,,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,,加入20ml1M的HEPES,,調pH值到7.4,定容至1L,,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%),。根據(jù)細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基,。更多關于PEI轉染試劑相關產(chǎn)品技術問題,,歡迎咨詢上海曼博生物。PEI轉染試劑主要用于大規(guī)模的蛋白表達和病毒包裝,。

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產(chǎn)品特點:PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),,是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品。相比于PEI25K,,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙?;?.鹽酸鹽形式,,具更高的水溶特性,;3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,其質子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應用領域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級的PEI轉染試劑,,適用于基礎學術研究和藥物研發(fā)早期階段,以固體粉末形式提供,,需用戶自行配置(詳情見使用方法),。更多關于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉染試劑,歡迎咨詢上海曼博生物,!有人知道PEI轉染試劑的價格嗎,?40KPEI轉染試劑說明書

PEI轉染試劑和脂質體轉染試劑的區(qū)別?支鏈PEI轉染試劑好用么

材料:質粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,,0.2μm濾膜過濾,,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調pH值到7.4,,定容至1L,,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆谩7椒ǎ?.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,,用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染,。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基,。更多產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物,!支鏈PEI轉染試劑好用么