1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化,。歡迎關注公眾號：Mine-bioPEI轉染試劑如何做殘留檢測,？陽離子聚合物PEI轉染試劑授權代理商

瞬時轉染方法1.接種細胞：轉染前，用膠原酶消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，總體積如表1所示,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管,，例如Falcon5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染3h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測,。轉染后快7h即可檢測到轉入基因的表達,。請自行確定檢測時間。更多關于Polysciences PEI相關內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,！歡迎關注公眾號Mine-bio科研級PEI轉染試劑生產(chǎn)商為什么PEI轉染試劑配制的過程中要加酸,？

產(chǎn)品特點：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品,。相比于PEI25K,，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙酰化）,；2.鹽酸鹽形式,，具更高的水溶特性；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應用領域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級的PEI轉染試劑，適用于基礎學術研究和藥物研發(fā)早期階段,，以固體粉末形式提供,，需用戶自行配置（詳情見使用方法）。歡迎關注曼博生物公眾號：Mine-bio

PEIMAX粉末配置方法：1)將1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃燒杯中,；2)放入攪拌轉子,，放置于磁力攪拌器上，設置攪拌程序以形成一個較小的漩渦,；3)等待PEIMAX40K完全溶解,，通常需要5分鐘左右；4)用25mL塑料移液管加入1N氫氧化鈉滴定至pH6.9~7.1,；5)如果不小心超過7.1,，則使用1N的鹽酸和新的塑料移液管將pH重新滴定至6.9~7.1,；6)將溶液轉移到1L玻璃量筒中，加入水定容至1L,；7)用無菌真空過濾膜過濾配制的轉染試劑溶液,；8)按需分裝，4°C儲存（切記不可冷凍）,；注：未經(jīng)配制的粉末有效期為2年,。配置成液體后分裝在合適的瓶子中，并且保存在4℃的轉染試劑將可在6個月之內(nèi)保持性能,。如jin用于蛋白定性研究,，分裝的轉染試劑可延長有效使用期至1年。
PEI轉染試劑在使用時出現(xiàn)沉淀的原因是什么,？

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PEI轉染試劑和脂質(zhì)體轉染試劑的區(qū)別？陽離子聚合物PEI轉染試劑授權代理商

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務必使用高質(zhì)量轉染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）,。通過260nm光吸收測定DNA濃度,，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能,，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性,。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌,、或支原體污染,。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞,。更多Polysciences PEI轉染試劑等相關產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物！近期還有PEI試用裝申請活動,，可關注我們的公眾號：Mine-bio陽離子聚合物PEI轉染試劑授權代理商