1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化,。歡迎關注公眾號：Mine-bio哪里可以買到23966-1,？國產PEI轉染試劑

穩(wěn)定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。歡迎關注我們的公眾號：Mine-bio 化學合成PEI轉染試劑用途哪個品牌的PEI轉染試劑性價比高,？

產品簡介：Transporter5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉染試劑）溶液，由PEIMAX配置而成,，采用0.1umPES無菌過濾器,，完全消除支原體污染風險。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,，這些復合物很容易通過內吞作用進入細胞,，并且Transporter5-DNA復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉染效率,。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,，可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產。Transporter5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293,、CHO,、COS、HELA,、昆蟲（SF9,、SF21）等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質粒,，所以較大的質粒也可以成功地轉染,。Transporter5可節(jié)省試劑準備時間，加快項目進度,。經過嚴格的性能檢測,，確保品質，在新藥研發(fā)過程中是一款快速,、重復性好,、可用于批量產的轉染試劑。產品特點：非GMP,，研究級PEI轉染試劑溶液,；高轉染效率；無縫過渡到MAXgeneGMP,；易放大,，可預測產量；用于工藝開發(fā),，臨床前和早期臨床研究,。請關注我們的公眾號：Mine-bio

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務，以創(chuàng)新和為價值理念,，通過自身研發(fā)團隊,，以及與國內外專業(yè)科研團隊強強聯(lián)合,，不斷創(chuàng)新,，為生命科學和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產品和服務。生物醫(yī)學工程是綜合應用生命科學與工程科學的原理和方法,，從工程學角度在分子,、細胞、組織,、乃至整個人體系統(tǒng)多層次認識人體的結構,、功能和其他生命現(xiàn)象，研究用于防病,、治病,、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料,、制品、裝置和系統(tǒng)技術的總稱,。也歡迎關注我們的公眾號：Mine-bio,，查看更多技術文章！PEI轉染試劑主要用于用于抗體,、蛋白和病毒載體生產,。

PEIMAX粉末配置方法：1)將1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃燒杯中；2)放入攪拌轉子,，放置于磁力攪拌器上,，設置攪拌程序以形成一個較小的漩渦；3)等待PEIMAX40K完全溶解,，通常需要5分鐘左右,；4)用25mL塑料移液管加入1N氫氧化鈉滴定至pH6.9~7.1；5)如果不小心超過7.1,，則使用1N的鹽酸和新的塑料移液管將pH重新滴定至6.9~7.1,；6)將溶液轉移到1L玻璃量筒中，加入水定容至1L,；7)用無菌真空過濾膜過濾配制的轉染試劑溶液,；8)按需分裝，4°C儲存（切記不可冷凍）,；注：未經配制的粉末有效期為2年,。配置成液體后分裝在合適的瓶子中，并且保存在4℃的轉染試劑將可在6個月之內保持性能,。如jin用于蛋白定性研究,，分裝的轉染試劑可延長有效使用期至1年。
用PEI轉染時,，一般和DNA的比例會是多少?40KPEI轉染試劑

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對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。Polysciences轉染與遞送相關產品已正式移交Kyfora Bio,，相關產品標簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences,，后續(xù)購買請認準備新品牌。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,，歡迎咨詢上海曼博生物!國產PEI轉染試劑