對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞，可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到宜轉(zhuǎn)染效率,。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。更多產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物,！有人知道PEI轉(zhuǎn)染試劑的價(jià)格嗎？PEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，總體積如表1所示,，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),，請(qǐng)用圓底聚丙烯管,，例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),，去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基，替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè),。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定檢測(cè)時(shí)間,。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,！歡迎關(guān)注公眾號(hào)Mine-bioPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)無(wú)需復(fù)雜操作，PEI試劑簡(jiǎn)化基因?qū)肓鞒獭?/p>

Polysciences 轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine,，PEI）的產(chǎn)品,，因其較高的轉(zhuǎn)染效果，已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子,，每相隔二個(gè)碳原子，即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”體(proton sponge),。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,。有實(shí)驗(yàn)證明,，分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966（PEI 25K）轉(zhuǎn)染效率表現(xiàn)優(yōu)良。

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,，依托于集團(tuán)公司泉心泉意深厚的資源和超過(guò)400家國(guó)內(nèi)客戶群體,，生命科學(xué)領(lǐng)域一站式供應(yīng)鏈體系，以及高風(fēng)險(xiǎn)生物危險(xiǎn)材料進(jìn)出口平臺(tái)的優(yōu)勢(shì),，曼博生物嚴(yán)格篩選國(guó)際創(chuàng)新且經(jīng)過(guò)同行驗(yàn)證過(guò)的產(chǎn)品和技術(shù),，引入中國(guó)市場(chǎng)，開發(fā)、孵育和推廣,，致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術(shù)帶入中國(guó),，集中在為細(xì)胞/基因領(lǐng)域、/免疫,，抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,，包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)染試劑,、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù)，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無(wú)縫轉(zhuǎn)化,。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,，歡迎咨詢上海曼博生物！也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-Bio.PEI轉(zhuǎn)染試劑,，科學(xué)界的得力助手,，加速基因功能研究步伐。

對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞，可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio,，相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences,，后續(xù)購(gòu)買請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)備新品牌。PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,。江蘇MSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑

PEI轉(zhuǎn)染試劑可以轉(zhuǎn)染HEK293系列,。PEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

1.對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞，可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。若有更多關(guān)于PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,，歡迎咨詢上海曼博生物,。PEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)