酸法處理時,,反應(yīng)強(qiáng)烈,,水解徹底,,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時,,根據(jù)酸濃度,、水解溫度、水解時間等條件的不同,,可以得到分子量不均的膠原水解物,。但是在即使中等濃度酸徹底水解過程中色氨酸也會全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會部分被破壞,,且設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,。因此,酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準(zhǔn)確控制酸度,、溫度,、時間等影響因素。由于各種不足,,酸法很少單獨(dú)使用,,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,,在檸檬酸()和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白,。在處理后的豬皮中加()處理一段時間,然后再用NaCL鹽析,,現(xiàn)在提取率為,,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,,在,,在4℃,20000r條件下離心20min,,現(xiàn)在應(yīng)用DEAE-SephadexA-50進(jìn)行離子交換層析,,之后透析,再用NaCL鹽析,,現(xiàn)在得到純化的膠原蛋白Ⅱ型,。采用酶法提取膠原蛋白時,,必須嚴(yán)格控制提取條件。北京小分子膠原蛋白肽廠家
膠原蛋白的熱變性溫度可以通過測定膠原蛋白溶液增比黏度的變化來確定,。其方法是將膠原蛋白樣品溶于一定量的緩沖溶液中,,并配制成一定濃度的溶液,然后用烏式黏度計測量溶液在一定溫度區(qū)間內(nèi)保持一定時間后的增比黏度,,以增比黏度對溫度作圖,,當(dāng)增比黏度變化50%時所對應(yīng)的溫度即為熱變性溫度。熱變性溫度還可通過拉曼光譜和差示掃描量熱法等進(jìn)行測定,。有人測得鱸魚,、鯽魚和鳙魚魚皮膠原蛋白的熱變性溫度分別為25、27和30℃,,它們的棲息水溫分別為26~27,、29和32℃,亞氨基酸含量分別為,、,,與3種魚皮膠原的熱變性溫度相吻合Ⅱ型膠原和Ⅺ型膠原Ⅱ型膠原由三條α1肽鏈組成,即[α1(Ⅱ)]3,,富含羥賴氨酸,,并且糖化率高,含糖量可達(dá)4%,,是軟骨中的主要膠原,。另外,即使同一生物,,皮和骨膠原蛋白的熱變形溫度也可能不一,,像來自日本海鱸、鮐魚,、大頭鯊和眼斑鲀的皮膠原蛋白的變性溫度為℃,,而骨膠原蛋白的變性溫度則為℃。附帶結(jié)論是骨膠原蛋白的變性溫度范圍整體上比皮膠原蛋白的變性溫度范圍要高,。而且骨膠原蛋白和皮膠原蛋白在不同pH時的溶解度不同,。這表明皮和骨膠原蛋白的分子特性和構(gòu)型存在差異。天津復(fù)合膠原蛋白哪個牌子好膠原蛋白肽是由膠原或明膠經(jīng)蛋白酶降解處理后制成的一種膠原蛋白前體產(chǎn)品,。
以膠原蛋白為基質(zhì)作真皮輔以上皮成分構(gòu)成的組織工程人工皮膚藥物緩釋膠以膠原蛋白為主要成分的給藥系統(tǒng)應(yīng)用非常比較廣,,可以把膠原蛋白水溶液塑造成各種形式的給藥系統(tǒng),如眼科方面的膠原蛋白保護(hù)物,、燒傷或創(chuàng)傷使用的膠原海綿,、蛋白質(zhì)傳輸?shù)奈⒘!⒛z原蛋白的凝膠形式,、透過皮膚給藥的調(diào)控材料以及基因傳輸?shù)募{米微粒等,。此外,,還可作為組織工程包括細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的基質(zhì)、人工血管和瓣膜的支架材料等,。自體皮膚移植一直是治好二度和三度燒傷的全球標(biāo)準(zhǔn)方法,,然而對于嚴(yán)重?zé)齻牟∪耍鄙俸线m的可移植的皮膚成了較嚴(yán)峻的問題,,有人利用生物工程技術(shù)通過嬰兒皮膚細(xì)胞培育出嬰兒皮膚組織,,這種膠原蛋白組織在沒有自體移植的情況下,在3周到18個月不等的時間里可治好不同程度的燒傷,,而且新長出的皮膚也很少表現(xiàn)出肥大增生和抗性,。還有人用人工合成的聚-DL-乳酸-羥基乙酸(PLGA)和天然膠原蛋白來培育三維的人皮膚纖維原細(xì)胞,結(jié)果表明:細(xì)胞在合成網(wǎng)狀物上生長更快,,而且內(nèi)外幾乎同步生長,,增殖細(xì)胞和分泌的胞外基質(zhì)更均一,,把這種纖維植入無皮的大鼠背部,,2周后就長出了真皮組織,4周后就長出了上皮組織,。
膠原蛋白好處:分娩后的婦女,,大部分會有乳房下垂,松弛,,乳房顏色深,,***出現(xiàn)特點(diǎn),提前補(bǔ)充膠原蛋白可以抑制色素產(chǎn)生,,減少色斑形成,,修復(fù)皮膚,淡化***,,增加皮膚彈性,、促進(jìn)皮膚光潔度;膠原蛋白能***嗎?可以。膠原蛋白能促進(jìn)乳房結(jié)締組織生成,,確保乳房的挺拔健美,。膠原蛋白好處四:同時富含蛋白質(zhì)降解成分,通過***起到滋潤皮膚的作用,,有利于皮膚的保健,,使用后會使面色紅潤,肌膚細(xì)嫩,,有光澤,,彈性好,而且有一定的祛癍效果,,所以也用以護(hù)膚養(yǎng)顏,。一般膠原蛋白肽的原材料,,一般來自于人力喂養(yǎng)豬牛的皮革。
膠原蛋白中甘氨酸(Gly),、丙氨酸(Ala),、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量較高,特別是甘氨酸,,約占總氨基酸的27%,,也有報道說占1/3,即每隔兩個其它氨基酸殘基(X,,Y)即有一個甘氨酸,,故其肽鏈可用(Gly-X-Y)n來表示。每個原膠原分子由三條α-肽鏈組成,,α-肽鏈自身為α螺旋結(jié)構(gòu),,肽鏈中每三個氨基酸殘基中就有一個要經(jīng)過此三股螺旋中間區(qū),而此處空間十分狹窄,,只有甘氨酸適合于此位置,,由此可解釋其氨基酸組成中每隔兩個氨基酸殘基出現(xiàn)一個甘氨酸的特點(diǎn)。特別注意,,X,、Y均表示任意的氨基酸,只不過X通常是脯氨酸,,Y通常指羥脯氨酸,。同時還含有少量3-羥脯氨酸(3-hydroxyproline)和5-羥賴氨酸(5-hydroxylysine,Hyl),。羥脯氨酸殘基可通過形成分子內(nèi)氫鍵穩(wěn)定膠原蛋白分子,。三條α-肽鏈借范德化力、氫鍵及共價交聯(lián)則以平行,、右手螺旋形式纏繞成“草繩狀”三股螺旋結(jié)構(gòu),,使膠原具有很高的拉伸強(qiáng)度。需要的膠原蛋白,,其實是一種由3個氨基酸分子組成的膠原蛋白即“膠原三肽”,。天津海參膠原蛋白廠家
分子量大約在3000道爾頓,膠原蛋白肽可促進(jìn)骨的形成,。北京小分子膠原蛋白肽廠家
酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,,需用一些蛋白酶,如膠原酶,、胃蛋白酶,、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白,。所使用的蛋白酶主要分3種:動物蛋白酶(如胰蛋白酶,,胃蛋白酶),,植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),,微生物蛋白酶(如堿性蛋白酶,,中性蛋白酶)。在對酶法水解膠原蛋白的研究中,,以堿性蛋白酶應(yīng)用較多,。將膠原進(jìn)行限制性降解,即將末端肽切割下來,,由于膠原肽鏈間的共價鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,,末端肽被切下后,含三螺旋結(jié)構(gòu)的主體部分可溶于稀有機(jī)酸而被提取出來,。用酶處理,,可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產(chǎn)率,;而且還不會破壞膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu),,保持其特性。影響酶提取的因素有很多,,如酶濃度,、酶與底物的比例,、酶解時間,、酶解溫度、pH值以及料液比等,。在實際操作中,,大多數(shù)采用酶復(fù)合法提取膠原蛋白,較多的是使用胃蛋白酶提取,,有機(jī)酸多為乙酸,。北京小分子膠原蛋白肽廠家
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