ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,，總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?),；立足北極海洋區(qū)，致力于從海洋生物中識別新的冷適應(yīng)酶,，用于分子研究,、體外診斷和藥物領(lǐng)域,。以其產(chǎn)品的獨特性質(zhì)及超過30年的生產(chǎn)經(jīng)驗積淀，ArcticZymes Technologies得到國際分子診斷及生物藥物領(lǐng)域客戶的肯定及大力支持,，ArcticZymes產(chǎn)品線已用于診斷產(chǎn)品及生物藥物生產(chǎn)中,。2005年，ArcticZymes在Olso證券交易所上市,，并且持續(xù)得到挪威國家基金的支持,。江蘇中鹽核酸酶售后服務(wù)哪家好呢，歡迎咨詢上海倍篤生物 ,。北京生理鹽條件中鹽核酸酶70950-202

宿主細(xì)胞DNA（HCD）殘留以染色質(zhì)形式存在,，其中有帶負(fù)電荷的DNA、帶正電荷及疏水區(qū)段的組蛋白,，就像膠帶一樣能夠吸附很多物質(zhì),，包括各種雜蛋白、色譜填料,、目的病毒顆粒,。非特異吸附雜蛋白，會影響蛋白雜質(zhì)（如HCP）等的去除,；吸附到色譜填料上,，會降低色譜分離純化效率；吸附到目的病毒顆粒時,，會影響目的產(chǎn)物的穩(wěn)定性,，從而降低目的產(chǎn)物的得率。因此,，從生產(chǎn)工藝層面來講,，一定要去除HCD，從而能夠簡化工藝,、提高目的產(chǎn)物的產(chǎn)量,。陜西培養(yǎng)基條件中鹽核酸酶70950-150鑒于biologics制品更嚴(yán)格的質(zhì)量要求，廠家對M-SAN HQ中鹽核酸酶的生產(chǎn)及質(zhì)控符合更高標(biāo)準(zhǔn),。

文章作者對酶法去除dsDNA進(jìn)行了優(yōu)化研究,，兩種酶濃度梯度為25U/ml、50U/ml及100U/ml,，Mg2+濃度為5mM,，通過PicoGreen檢測dsDNA含量,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對dsDNA去除效果明顯優(yōu)于100U/ml的Benzonase,。此外,，在酶切反應(yīng)速度方面，M-SAN HQ有更明顯的優(yōu)勢,，——在低濃度底物dsDNA（如20ng/ml）條件下,，50U/ml的M-SAN HQ在5分鐘內(nèi)將dsDNA降解到2ng/ml左右；而50U/ml的Benzonase在30分鐘孵育消化后,，dsDNA濃度依然是12ng/ml左右,。

M-SAN HQ中鹽核酸酶，這款核酸酶的適宜pH范圍很廣（pH 7.2 - 8.7）,，且在125 – 250 mM鹽濃度內(nèi)具有良好活性,。在細(xì)胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中，不需調(diào)整任何組分,，直接加入M-SAN HQ即可表現(xiàn)良好核酸酶活性,。相比傳統(tǒng)的全能核酸酶，M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下,，對HCD的去除更高效,、更徹底。Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ) 中鹽核酸酶是用Pichia pastoris表達(dá)的重組非特異內(nèi)切核酸酶,，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中,，在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽濃度下具有較高活性,，較適合鹽濃度為125-250 mM,。

核酸酶活性受到很多因素影響，如鹽濃度,、pH,、底物、溫度等,。因此,，不同客戶、不同項目中核酸酶的使用條件都不一,。目前,，生物制藥行業(yè)對Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉，如生理鹽或低鹽濃度,、脫鹽操作等,。對于大部分使用Benzonase的項目，使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代,，而且溫度,、Mg2+濃度等條件不用做任何調(diào)整,，同樣酶量的M-SAN HQ對宿主細(xì)胞DNA（HCD）的去除效果更好、病毒載體得率更高,。經(jīng)過工藝優(yōu)化后,，可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2，且HCD去除效果及產(chǎn)品得率更高,。染色質(zhì)的雙螺旋結(jié)構(gòu)影響DNA的檢測與酶切處理,，而中鹽核酸酶降解染色質(zhì)效率更高,。陜西培養(yǎng)基條件中鹽核酸酶70950-150

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經(jīng)典的慢病毒載體（LV）的生產(chǎn)工藝如下,，——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系,，轉(zhuǎn)染24小時后LV由轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞生產(chǎn)并排出到培養(yǎng)上清液中；收獲上清培養(yǎng)液后,，加入核酸酶去除HCD污染,，通過澄清步驟去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì)；下游純化步驟分離LV載體,，純化方法包括切向流過濾TFF,、色譜純化及超速離心；純化后的LV病毒顆粒經(jīng)過無菌過濾,，更換到優(yōu)化后的配方中,，灌裝并冷凍保存。每批Car-T生產(chǎn)時取對應(yīng)量的LV病毒,，切忌反復(fù)凍融,，否則LV病毒會失活。北京生理鹽條件中鹽核酸酶70950-202