Genovis集團(tuán)由瑞典GenovisAB和美國全資子公司GenovisInc.組成,。該公司在納斯達(dá)克上市。如需了解更多信息,,請訪問投資者關(guān)系,。Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進(jìn)和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis酶產(chǎn)品,稱為SmartEnzymes,,被世界各地的科學(xué)家使用,,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。通過在2020年收購QEDBioscience,,產(chǎn)品組合已擴(kuò)大到包括用于研究,、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在官網(wǎng)上閱讀有關(guān)QED的更多信息Genovis研發(fā)活動的基石是客戶關(guān)系,,使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求,。與專注于表征新酶、...
與IdeS不同,,Genovis的GingisKHAN(Kgp)是一種半胱氨酸蛋白酶,,可在鉸鏈上方的單個位點(diǎn)(KSCDK/THTCPPC)消化人IgG1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段,。GingisKHAN是一種賴氨酸特異性蛋白酶,。單一的消化位點(diǎn)是人IgG1三維結(jié)構(gòu)的結(jié)果,使這種賴氨酸暴露于酶中,。如果去除N-聚糖,,則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現(xiàn)額外的消化位點(diǎn)。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性,,并且在37°C和pH8下獲得活性,。還原劑(2mM半胱氨酸)與酶一起提供。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的,。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物,,研究...
與IdeS不同,度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 (GLP-1) 分子組成,,它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區(qū)域,。為了分別研究肽和 Fc 區(qū)域,從而鑒定結(jié)構(gòu)域特異性 PTM,,用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時,。為了降低樣品復(fù)雜性,使用內(nèi)切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖,,并用DTT還原鏈間二硫鍵,。反相LC-MS對樣品的分析表明,使用GlySERIAS進(jìn)行連接子消化后,,肽從Fc區(qū)域完全去除,。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點(diǎn),這就是為什么Fc/2和GLP-...
與IdeS不同,,在蛋白質(zhì)zhiliao藥物的質(zhì)量控制過程中,,詳細(xì)分析和識別質(zhì)量屬性非常重要。對于具有柔性連接子的融合蛋白療法,這包括確認(rèn)連接蛋白的質(zhì)量以及蛋白質(zhì)接頭的質(zhì)量,。使用 Genovis的GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域來幫助這種質(zhì)量控制,。然而,,連接子中的大量甘氨酸殘基提供了酶的許多潛在消化位點(diǎn),,導(dǎo)致連接子內(nèi)多個位點(diǎn)同時水解,。消化的產(chǎn)物通常由連接蛋白的幾種變體組成,并保留不同程度的連接子,。雖然觀察到的異質(zhì)性通常不會對蛋白質(zhì)亞基的詳細(xì)表征產(chǎn)生負(fù)面影響,,但有助于直接表征連接子,但有時需要更均勻的消化產(chǎn)物來詳細(xì)分析單個蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域,。生成完整的 Fab片段或從依那西...
不同于IdeS,,Genovis的FabDELLO 是一種蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個位點(diǎn)消化人 IgG1,,在兩小時內(nèi)產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段,,無需還原條件。該酶對具有突變鉸鏈區(qū)域的抗體(如 LALA 突變)具有活性,,并啟用中級 LC-MS 來表征具有突變鉸鏈的抗體的關(guān)鍵質(zhì)量屬性,。FabDELLO 在鉸鏈上方的單個位點(diǎn)消化人 IgG1 (...KSCDK / THTCPPCP...),生成完整的 Fab 和 Fc 片段,。FabDELLO 是一種賴氨酸特異性蛋白酶,。單個消化位點(diǎn)是人 IgG1 的三維結(jié)構(gòu)的結(jié)果,使這種賴氨酸暴露于酶中,。如果去除N-聚糖,,則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現(xiàn)額外的...
Genovis提供具有低水平內(nèi)Du素的FabRICATOR(IdeS)凍干酶,用于IgG的鉸鏈以下消化,。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段,。FabRICATORLowEndotoxin以凍干粉的形式提供兩種不同規(guī)格:2000和5000單位,,分別用于消化2mg或5mgIgG。該產(chǎn)品配方每瓶的內(nèi)Du素含量較低,,2000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.04EU/瓶,5000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.10EU/瓶,。有效消化,,內(nèi)DU素水平低;適用于靈敏的體內(nèi)或基于細(xì)胞的檢測,??捎糜谌鐔蝺r結(jié)合、二硫鍵擾...
與IdeS不同,Genovis的FabULOUS(SpeB)是一種半胱氨酸蛋白酶,,可在來自多個不同物種和亞類的IgG的鉸鏈區(qū)域消化,,產(chǎn)生Fab和Fc片段。人,、小鼠,、大鼠、山羊和綿羊的IgG被FabULOUS消化,,產(chǎn)生Fab和Fc片段,。人IgG1的主要消化位點(diǎn)是......KTHT...例如,制備的Fab片段可用于親和力研究,、Fab糖基化研究和結(jié)構(gòu)研究,。對來自多個物種和亞類的IgG有活性–上鉸鏈區(qū)域的消化物;快速-在一小時內(nèi)生成Fab和Fc片段,;有效消化小鼠IgG1,。FabULOUS來源于化膿性鏈球菌,在大腸桿菌中表達(dá),。FabULOUS的分子量為29kDa,,該酶含有His標(biāo)簽。這包括FabRIC...
為了讓所有實驗室都能同時快速自動消化多種抗體,,Genovis的FabRICATORMagIC的設(shè)計具有靈活性,,適用于一系列自動化平臺。我們在ThermoScientific?KingFisher?純化系統(tǒng)上優(yōu)化了FabRICATORMagIC的工作流程,,但它可以轉(zhuǎn)移到其他自動化平臺,,如果沒有自動化,在振動臺上也能同樣出色地工作,。消解后,,將含有處理樣品的深孔板直接轉(zhuǎn)移到LC-MS的自動進(jìn)樣器中進(jìn)行快速色譜分析,或轉(zhuǎn)移到其他分析方法進(jìn)行分析,。FabRICATORMagIC與在消解緩沖液中添加0.05%聚山梨醇酯20兼容,,以極大限度地減少自動化系統(tǒng)中可能發(fā)生的純粹壓力。使用KingFisher儀器處...
當(dāng)你應(yīng)用像肽圖這樣的方法時,,你可以從Genovis中級方法中獲得的信息量就沒有那么多了,。一個主要的區(qū)別是你不能像在肽水平上那樣將修改定位到單個氨基酸。然而,,中級分析比肽圖譜具有快速和簡單的巨大優(yōu)勢,,因為需要分析的色譜峰要少得多,數(shù)據(jù)處理任務(wù)要簡單得多,。此外,,在中級實驗中,,手工實驗步驟要少得多,F(xiàn)abALACTICA(IdeS)酶切消化方法不需要針對不同的人體IgG1進(jìn)行優(yōu)化,。一旦在氨基酸水平上進(jìn)行了PTM表征,,我們非常認(rèn)為中級表征肽圖的一種補(bǔ)充方法,可以在更常規(guī)的基礎(chǔ)上應(yīng)用,。中級分析更適用于高通量或監(jiān)測類型的方法,,并可用于支持肽圖分析。Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb...
Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)與IdeS酶一樣是特異性蛋白酶,。在二維核磁共振波譜 (2D-NMR) 之后,,可以通過 HOS 分析在精確的原子水平上評估 mAb 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性。從Genovis的FabALACTICA Immobilized獲得均相Fab和Fc片段的工作流程,,是評估嵌合單克隆抗體英夫利昔單抗中HOS的理想選擇,,在海報“FabALACTICA產(chǎn)生純和均相的mAb亞基,促進(jìn)2D-NMR波譜分析”中進(jìn)行了描述,。來自生成的 Fab 和 Fc 片段的高質(zhì)量信號和光譜分辨率導(dǎo)致能夠觀察 Fab 和 Fc 之間的結(jié)構(gòu)變化,、氧化和非氧化樣品之間的差異,并通...
一些應(yīng)用(如結(jié)合研究)具有高度靈敏度,,因此在制備中需要不含殘留酶的純抗體片段,。因此,Genovis的 IgG 特異性蛋白酶也以固定化酶提供,,可快速輕松地生成均質(zhì) F(ab')2 和 Fc/2 片段,。FabRICATOR Immobilized 含有固定化的 FabRICATOR (IdeS),用于制備來自多種 IgG 的 F(ab')2 和 Fc 片段(對于兔 IgG,,請咨詢),,而小鼠 IgG2a 和 IgG3 可以使用含有 FabRICATOR Z Immobilized 的 FabRICATOR Z Fab2 試劑盒進(jìn)行處理 。 為了生成和純化完整的 F(ab')2 和 Fc/2 片段,,使...
Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,,是在鉸鏈下方對IgG進(jìn)行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點(diǎn)的抗體,,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。酶解后,,可以使用反相HPLC,、質(zhì)譜或其他分析方法分析片段??贵w消化和亞基生成的自動化使生物反應(yīng)器的在線監(jiān)測應(yīng)用成為可能,,例如,作為2D-LC-MS設(shè)置的一部分,,將反應(yīng)器直接耦合到MS,。這種自動化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時間、樣品處理時間并提高了通量,。如FabRICATOR Immobilized,,可快速輕松地生成均質(zhì) F(a...
為什么客戶想在他們的工作試用Genovis的FabRICATOR(IdeS)。FabRICATOR的高特異性(在鉸鏈下方有單個消化位點(diǎn))以及它對IgG種和亞類表現(xiàn)出活性的事實使其成為高效表征一系列不同分子的理想工具,。FabRICATOR的另一大優(yōu)勢是速度,。在大多數(shù)IgG上,您可以在短短30分鐘內(nèi)生成F(ab’)2和Fc/2片段,,這一速度簡化了方法開發(fā),,并允許快速有效的中層表征,使客戶能夠在不比做完整質(zhì)量實驗長太多的時間內(nèi)獲得更多關(guān)于分子的信息,。Genovis發(fā)現(xiàn)更多的緩沖液與溶液中的FabRICATOR消解相容(更多信息),。Genovis已經(jīng)測試了PBS和150mM醋酸銨,pH7,,結(jié)果良好,。并...
IgA 消化酶的 IgASAP 家族特異性消化血清和分泌型人 IgA 以生成 Fab 和 Fc 片段。IgASAP Sub1 特異性消化人 IgA1,,而 IgASAP Sub1+2 同時消化人 IgA1 和 IgA2m1,。 Sub1+2 特異性消化鉸鏈上方的 IgA1 和 IgA2m1。兩種酶都產(chǎn)生完整且均質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段,。為了獲得純和完整的Fab片段,,使用Genovis的GingisKHAN Fab Kit進(jìn)行人IgG1的消化和抗體片段的后續(xù)純化。通過與 GingisKHAN 孵育,,然后在 CaptureSelect? 人 CH1 離心柱上親和純化,,在曲妥珠單抗上證明了完整的...
抗體由于其大小和復(fù)雜性,是一種難以表征的分子,。偶聯(lián)藥物有效載荷是對抗Ai癥等疾病的一種有吸引力的方法,,但進(jìn)一步增加了異質(zhì)性的復(fù)雜性和風(fēng)險??贵w藥物偶聯(lián)物 (ADC) 需要像任何其他基于 IgG 的生物制藥一樣進(jìn)行仔細(xì)和詳細(xì)的表征,,并且需要適當(dāng)?shù)姆治龉ぷ髁鞒獭enovis的FabRICATOR(IdeS)酶將ADC消化成其亞基,,可以詳細(xì)表征這類復(fù)雜的藥物,。Genovis的內(nèi)切糖苷酶 IgGZERO和 GlycINATOR 還可以研究完整的 ADC,但降低復(fù)雜性并提高分辨率,。鉸鏈上方的單個暴露賴氨酸殘基,生成的片段可用于結(jié)晶和高階(HOS)NMR研究,、結(jié)合研究等。云南GingisREXIdeS蛋...
Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)與IdeS酶一樣是特異性蛋白酶,。在二維核磁共振波譜 (2D-NMR) 之后,,可以通過 HOS 分析在精確的原子水平上評估 mAb 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性,。從Genovis的FabALACTICA Immobilized獲得均相Fab和Fc片段的工作流程,是評估嵌合單克隆抗體英夫利昔單抗中HOS的理想選擇,,在海報“FabALACTICA產(chǎn)生純和均相的mAb亞基,,促進(jìn)2D-NMR波譜分析”中進(jìn)行了描述。來自生成的 Fab 和 Fc 片段的高質(zhì)量信號和光譜分辨率導(dǎo)致能夠觀察 Fab 和 Fc 之間的結(jié)構(gòu)變化,、氧化和非氧化樣品之間的差異,,并通...
Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動消化IgG,。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段,。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶,。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體。它們專為自動化平臺而設(shè)計,,但在無法實現(xiàn)自動化的情況下,,在振動臺上的表現(xiàn)同樣出色。酶切消解后,,樣品可直接轉(zhuǎn)移到LC-MS的自動進(jìn)樣器進(jìn)行快速色譜分析,,或轉(zhuǎn)移到其他分析方法進(jìn)行分析。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇,、工藝開發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關(guān)的大量樣...
Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶 可用于 IgG 的所有人類亞類以及人源化和嵌合 IgG,。該酶對其他物種的 IgG 也有活性,包括來自大鼠,、猴子,、兔子和綿羊的某些類別的 IgG。因此,,F(xiàn)abRICATOR的高特異性在某些情況下會使其對鉸鏈區(qū)域的突變敏感,,并損害酶活性。來自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成,,與 FabRICATOR 相比,,F(xiàn)abRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。然而,,小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列,,并且不被 FabRICATOR Z 消化。對于這種抗體種類,,F(xiàn)abULOUS 和 Fa...
Genovis將固定化酶固定在磁珠上,,用于在鉸鏈下方自動消化IgG。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點(diǎn)的抗體,,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段,。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體,。它們專為自動化平臺而設(shè)計,,但在無法實現(xiàn)自動化的情況下,在振動臺上的表現(xiàn)同樣出色,。酶切消解后,樣品可直接轉(zhuǎn)移到LC-MS的自動進(jìn)樣器進(jìn)行快速色譜分析,,或轉(zhuǎn)移到其他分析方法進(jìn)行分析,。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關(guān)的大量樣...
與肽圖譜相比,,根據(jù)Genovis科學(xué)家的經(jīng)驗,,尤其是對于像抗體這樣的分子,許多人在常規(guī)實驗中做了太多的肽圖譜,,而中級水平(Middle-level)的方法可以很好地工作,。中級方法(IdeS酶切抗體)需要更少的實際操作步驟和較少的示例處理,所有這些都意味著過程中出錯的事情更少,。我們的許多酶可以作為平臺方法,,同樣的方法適用于絕大多數(shù)的抗體,這不是肽圖的情況下,,可能需要優(yōu)化整個樣品制備,,LC分離,質(zhì)譜設(shè)置和數(shù)據(jù)分析的每個不同的抗體分析,。這些變化可能是很小的,,但沒有一種適用于所有肽圖的方法。由于分析和數(shù)據(jù)分析的簡單性,,中級方法非常適合自動化和高通量的工作流程,。肽圖當(dāng)然可以自動用于樣品制備,但高通量肽圖...
與IdeS不同,,在蛋白質(zhì)zhiliao藥物的質(zhì)量控制過程中,,詳細(xì)分析和識別質(zhì)量屬性非常重要。對于具有柔性連接子的融合蛋白療法,,這包括確認(rèn)連接蛋白的質(zhì)量以及蛋白質(zhì)接頭的質(zhì)量,。使用 Genovis的GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域來幫助這種質(zhì)量控制。然而,,連接子中的大量甘氨酸殘基提供了酶的許多潛在消化位點(diǎn),,導(dǎo)致連接子內(nèi)多個位點(diǎn)同時水解。消化的產(chǎn)物通常由連接蛋白的幾種變體組成,,并保留不同程度的連接子,。雖然觀察到的異質(zhì)性通常不會對蛋白質(zhì)亞基的詳細(xì)表征產(chǎn)生負(fù)面影響,,但有助于直接表征連接子,但有時需要更均勻的消化產(chǎn)物來詳細(xì)分析單個蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域,。使用GlySERIAS 的連接子...
Genovis的FabRICATOR MagIC自動樣品制備可用于分析和監(jiān)測不同的CQA,。mAb在生產(chǎn)或儲存過程中的氧化就是這樣一種CQA,可能會影響zhiliao產(chǎn)品的質(zhì)量,。為了展示FabRICATOR MagIC如何解決這個問題,,對6種mAb的混合物進(jìn)行強(qiáng)制降解(室溫下3個月),并通過反相LC-MS進(jìn)行分析,。當(dāng)在完整水平上分析mAb時,,可以檢測到mAb5豐度的顯著差異,同時出現(xiàn)許多新的峰,。然而,,無法獲得可靠的質(zhì)量數(shù)據(jù)。使用FabRICATOR MagIC,,mAb5變化的來源在Fab區(qū)域內(nèi),。隨后還原為 Fc/2、LC 和 Fd' 片段,,可以識別差異是由于 mAb5 Fd' 片段上的色氨酸氧化...
Genovis是一家瑞典生物技術(shù)公司,,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes工具酶,。Genovis提供一系列獨(dú)特,、快速且易于使用的酶學(xué)工具,主要用于生物制藥行業(yè)和學(xué)術(shù)界,。我們在全球范圍內(nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?,,用于單克隆抗體、ADC,、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā),、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應(yīng)用信息,,如果您有興趣,,可以和我們一起做一個“SmartStories”,也可以聯(lián)系我們,。IgASAP Sub1+2 特異性消化鉸鏈上方的 IgA1 和 IgA2m1,,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段。甘肅F...
與IdeS不同,,度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 (GLP-1) 分子組成,,它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區(qū)域。為了分別研究肽和 Fc 區(qū)域,從而鑒定結(jié)構(gòu)域特異性 PTM,,用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時,。為了降低樣品復(fù)雜性,使用內(nèi)切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖,,并用DTT還原鏈間二硫鍵,。反相LC-MS對樣品的分析表明,使用GlySERIAS進(jìn)行連接子消化后,,肽從Fc區(qū)域完全去除,。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點(diǎn),這就是為什么Fc/2和GLP-...
Genovis提供具有低水平內(nèi)Du素的FabRICATOR(IdeS)凍干酶,,用于IgG的鉸鏈以下消化,。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點(diǎn)的抗體,,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORLowEndotoxin以凍干粉的形式提供兩種不同規(guī)格:2000和5000單位,,分別用于消化2mg或5mgIgG,。該產(chǎn)品配方每瓶的內(nèi)Du素含量較低,2000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.04EU/瓶,,5000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.10EU/瓶,。有效消化,內(nèi)DU素水平低,;適用于靈敏的體內(nèi)或基于細(xì)胞的檢測,。并通過反相LC-MS進(jìn)行分...
Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)與IdeS酶一樣是特異性蛋白酶。在二維核磁共振波譜 (2D-NMR) 之后,,可以通過 HOS 分析在精確的原子水平上評估 mAb 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性,。從Genovis的FabALACTICA Immobilized獲得均相Fab和Fc片段的工作流程,是評估嵌合單克隆抗體英夫利昔單抗中HOS的理想選擇,,在海報“FabALACTICA產(chǎn)生純和均相的mAb亞基,,促進(jìn)2D-NMR波譜分析”中進(jìn)行了描述。來自生成的 Fab 和 Fc 片段的高質(zhì)量信號和光譜分辨率導(dǎo)致能夠觀察 Fab 和 Fc 之間的結(jié)構(gòu)變化,、氧化和非氧化樣品之間的差異,,并通...
與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,,可在鉸鏈上方的一個特定位點(diǎn)消化人IgA1,,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1,。消化在1小時內(nèi)完成,,并且由于酶的特異性,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風(fēng)險,。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性?;钚允窃?7°C下,,但也可以在室溫下使用增加孵育時間進(jìn)行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,,并在大腸桿菌中表達(dá),。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為148kDa,。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,,裝在1000個單位的小瓶中...
對于攜帶突變鉸鏈的 Fc 融合蛋白或抗體來說,F(xiàn)ab 和 Fc 片段的生成可能具有挑戰(zhàn)性,。Genovis的GingisKHAN酶在鉸鏈上方一個可觸及的賴氨酸位點(diǎn)消化人IgG1,,在足夠溫和的還原條件下保留鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵,從而產(chǎn)生完整的Fab和Fc片段,。對于融合蛋白,,消化通常在鉸鏈上方獲得,但融合伴侶的結(jié)構(gòu)和氨基酸序列可能導(dǎo)致其他暴露的消化位點(diǎn),。如果去除保守的 Fc N-聚糖,,F(xiàn)c 中的第二個切割位點(diǎn)也可能被GingisKHAN酶切。將精選的單克隆人 IgG1 抗體和 Fc 融合蛋白與 GingisKHAN 在 37°C 下孵育 1 小時,,并通過 HPLC 進(jìn)行分析,。Genovis的FabRIC...
Genovis提供凍干和固定化的FabRICATOR(IdeS),為客戶提供了許多選擇,,以滿足他們的需求,。 凍干形式用于高度靈活的方法開發(fā)的目的,并隨時準(zhǔn)備使用,,只需重組和添加到IgG樣本,。 凍干酶的靈活性也意味著它可以應(yīng)用于更高的通量和自動化的工作流程。 Genovis還提供了在瓊脂糖樹脂上固定化的酶,,在隨時可用的旋轉(zhuǎn)柱中,,這可以極大限度地減少在樣品中殘留的酶,這可能是有利的,。 對于更多的制備應(yīng)用,,我們提供FabRICATOR Fab2試劑盒,這是IgG片段生成和純化的強(qiáng)大工具,。 這包括FabRICATOR固定化柱和CaptureSelect Fc純化柱,,用于亞基的親和純化,。 由于FabRI...
與肽圖譜相比,根據(jù)Genovis科學(xué)家的經(jīng)驗,,尤其是對于像抗體這樣的分子,,許多人在常規(guī)實驗中做了太多的肽圖譜,而中級水平(Middle-level)的方法可以很好地工作,。中級方法(IdeS酶切抗體)需要更少的實際操作步驟和較少的示例處理,,所有這些都意味著過程中出錯的事情更少。我們的許多酶可以作為平臺方法,,同樣的方法適用于絕大多數(shù)的抗體,,這不是肽圖的情況下,可能需要優(yōu)化整個樣品制備,,LC分離,,質(zhì)譜設(shè)置和數(shù)據(jù)分析的每個不同的抗體分析。這些變化可能是很小的,,但沒有一種適用于所有肽圖的方法,。由于分析和數(shù)據(jù)分析的簡單性,中級方法非常適合自動化和高通量的工作流程,。肽圖當(dāng)然可以自動用于樣品制備,,但高通量肽圖...