一個美國客戶做了對照實驗,,比較Benzonase和SAN HQ高鹽核酸酶純化病毒載體的效率,。實驗設(shè)計如下,,HEK293細胞轉(zhuǎn)染及培養(yǎng)后,分別取了150Million的293細胞進行裂解,,分別在各自適宜的條件下(即SAN HQ組反應(yīng)條件為500mM鹽濃度,,而Benzonase組反應(yīng)條件是150mM鹽濃度)加入等量的酶(0、2kU,、3kU,、4kU、5kU,、6kU),,37°孵育1hr,加入Picogreen染料后檢測DNA的殘留量,。結(jié)果發(fā)現(xiàn),,SAN HQ高基因療法制造商面臨的挑戰(zhàn)與抗體療法剛出現(xiàn)時單克隆抗體制造商面臨的挑戰(zhàn)相似。例如,,在生產(chǎn),、儲存和處理過程中,單克隆抗體也會受到低滴度,、產(chǎn)品和工藝相關(guān)雜質(zhì)和降解的挑戰(zhàn),。盡管與重組單克隆抗體相比,單劑量AAV產(chǎn)品與工藝相關(guān)雜質(zhì)相關(guān)的風(fēng)險可能更低(取決于雜質(zhì)的類型,、劑量和給藥途徑),,但這也不能忽視。由于這些相似性,,制藥商,、化學(xué)品和輔料供應(yīng)商有機會進行合作,并開發(fā)創(chuàng)新的解決方案,,以實現(xiàn)穩(wěn)健和成本效益高的AAV產(chǎn)品生產(chǎn),。鹽核酸酶組用更少的酶得到了更好的去除效果(即2kU的SAN HQ消化結(jié)果明顯優(yōu)于6kU的Benzonase),且SAN HQ的高純化效率是非血清型依賴的,。常州高鹽核酸酶價格哪家好呢,,歡迎咨詢上海倍篤生物 。湖北哪些高鹽核酸酶銷售電話
ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期,,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?),。在生物制品生產(chǎn),如AAV載體及腺病毒載體疫苗生產(chǎn)中,,宿主細胞DNA殘留是關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù)之一,,高鹽濃度下,宿主DNA與蛋白質(zhì)能夠更高效解離,,從而更容易被降解,。ArcticZymes廠家管控整個供應(yīng)鏈及生產(chǎn)流程,協(xié)助客戶進行文件審計及現(xiàn)場審計,。1.高鹽濃度下,,宿主DNA與蛋白質(zhì)能夠更高效解離,從而更容易被降解,。在AAV生產(chǎn)過程中鹽濃度是純化工藝的重要參數(shù)之一,,高鹽濃度能夠減少目標產(chǎn)物聚集、增加目標產(chǎn)物溶解度及提高目標產(chǎn)物產(chǎn)量,。江西70960-001高鹽核酸酶量大優(yōu)惠在AAV生產(chǎn)過程中鹽濃度是純化工藝的重要參數(shù)之一,。
從細胞中釋放AAV載體的基本機械技術(shù)是反復(fù)冷凍/解凍,,然后是低速離心步驟然而,但是這種技術(shù)很難放大生產(chǎn),。機械均質(zhì),,如法式壓濾,是另一種裂解方法,,在這種方法中,,細胞膜在高壓剪切力作用下發(fā)生破裂。雖然這種方法是可放大的,,但是由于剪切應(yīng)力引起的聚集和沉淀,,往往會導(dǎo)致產(chǎn)品損失。而化學(xué)裂解方式,,例如Triton X-100在病毒載體純化過程有較高的總收率,,而且易于放大。但是也有其局限性,。研究表明,,Triton X-100造成了一些急性口服毒性、眼睛損傷,、皮膚刺激和慢性水生毒性,。因此,該去垢劑在2016年被歐洲化學(xué)品管理局(European Chemicals Agency)被列為需要高度關(guān)注的物質(zhì),。
目前基因藥物領(lǐng)域常用的病毒載體有腺病毒,、慢病毒、重組腺相關(guān)病毒(rAAV)以及逆轉(zhuǎn)錄病du等,,其中AAV因其免疫原性極低,、安全性高、宿主細胞范圍廣,、擴散能力強,、表達穩(wěn)定以及特異性強等優(yōu)勢脫穎而出。據(jù)NIH統(tǒng)計,,已有超過200個正在進行或已完成的基因藥物臨床試驗使用rAAV載體,。盡管rAAV基因藥物已顯示出巨大的前景,但是強大,、穩(wěn)健而且可放大的基因載體生產(chǎn)制造工藝一直是CGT行業(yè)的痛點,。目前rAAV生產(chǎn)平臺主要有三種:三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系(TransientTransfection, TT)、桿狀病毒表達載體體系(Baculovirusexpression vector,,BEV)和包裝細胞體系(Packaging/Producercell line,,PCL)。SAN HQ高鹽核酸酶是用Pichia pastoris表達的重組非特異性內(nèi)切核酸酶,。
ArcticZymes Technologies有兩條產(chǎn)品線,,分別針對分子診斷和生物藥物生產(chǎn)兩個領(lǐng)域,。在分子診斷領(lǐng)域,產(chǎn)品有蝦堿酶(SAP),、UNG酶,、等溫擴增酶(IsoPol)、連接酶,、蛋白酶,、內(nèi)切核酸酶及外切核酸酶等,,涉及核酸抽提,、擴增及測序等應(yīng)用。在生物藥物生產(chǎn)領(lǐng)域,,全球創(chuàng)新的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases, SANs)系列產(chǎn)品以其獨特優(yōu)勢,,在細胞基因藥物及RNA藥物生產(chǎn)中表現(xiàn)出更好的性能。其中,,鹽活性核酸酶SANs系列產(chǎn)品包含兩款產(chǎn)品,,分別是SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶;兩款酶的差別在于發(fā)揮酶活的鹽濃度范圍分別是生理鹽濃度范圍和400-600mM高鹽濃度范圍,。上海高鹽核酸酶售后服務(wù)哪家好呢,,歡迎咨詢上海倍篤生物 。湖北哪些高鹽核酸酶價格表
ArcticZymes Technologies旨在是研究和開發(fā)具有獨特特性的酶,。湖北哪些高鹽核酸酶銷售電話
在生物工藝流程中,,需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染,而核酸酶作為外源成份,,也需要在生產(chǎn)流程中去除,。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑,、離子交換和親合層析法等,。AAV衣殼亞種之間因表面電荷的差異導(dǎo)致不同的的等電點,——空衣殼pI在6.3左右,,包裝了完整基因組DNA后的病毒顆粒pI大致為5.9,。而來自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右,SAN HQ高鹽核酸酶pI 9.6左右,。因此,,在同樣的條件下,從AAV溶液中去除SAN HQ高鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易,、更徹底,。湖北哪些高鹽核酸酶銷售電話