ArcticZymes Technologies提供獨特特性的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases,,SANs)系列產(chǎn)品,,主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶。這兩款酶都是非特異核酸內(nèi)切酶,,跟Benzonase一樣能高效降解任何形式(雙鏈,、單鏈、線狀,、環(huán)狀)的DNA和RNA,;都來自于深海microbes,通過Pichia pastoris發(fā)酵生產(chǎn)得到,。這兩款酶的區(qū)別在于發(fā)揮酶活的適宜鹽濃度不同,,——M-SAN HQ中鹽核酸酶的適宜鹽濃度在175mM-250mM,而SAN HQ高鹽核酸酶的適宜鹽濃度在400mM-600mM,。江蘇高鹽核酸酶價格哪家好呢,,歡迎咨詢上海倍篤生物 。威海70921-202高鹽核酸酶使用方法
ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期,,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?),。在生物制品生產(chǎn),如AAV載體及腺病毒載體疫苗生產(chǎn)中,,宿主細胞DNA殘留是關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù)之一,,高鹽濃度下,宿主DNA與蛋白質(zhì)能夠更高效解離,,從而更容易被降解,。ArcticZymes廠家管控整個供應(yīng)鏈及生產(chǎn)流程,協(xié)助客戶進行文件審計及現(xiàn)場審計,。1.高鹽濃度下,,宿主DNA與蛋白質(zhì)能夠更高效解離,從而更容易被降解,。在AAV生產(chǎn)過程中鹽濃度是純化工藝的重要參數(shù)之一,,高鹽濃度能夠減少目標產(chǎn)物聚集、增加目標產(chǎn)物溶解度及提高目標產(chǎn)物產(chǎn)量,?;笔a區(qū)70921-202高鹽核酸酶工廠直銷SAN HQ高鹽核酸酶是一種新型的、耐高鹽的工程化內(nèi)切酶,;
由于Triton X-100的降解產(chǎn)物對環(huán)境影響很大,,自2023年12月22日起,歐盟將禁止使用Triton X-100生產(chǎn)試驗性醫(yī)療產(chǎn)品等,。請注意,,含有≤0.1% (w/w) Triton X-100表面活性劑的物質(zhì)不被視為危險物質(zhì),,仍然可以進口到歐洲。由于該產(chǎn)品通常不用作生物制品或先進療法的賦形劑,,因此在歐洲以外生產(chǎn)的大多數(shù)藥物在其開發(fā)商考慮在歐盟生產(chǎn)之前不需要生產(chǎn)變更,。此外,已經(jīng)獲得許可的藥物及其賦形劑不受該規(guī)則約束,。所有其它希望在歐盟生產(chǎn)生物藥物和研究產(chǎn)品的生產(chǎn)商都必須尋求Triton X-100的替代品并驗證它們對各自用途的適用性,。為了支持客戶項目更好在歐盟區(qū)域申報上市,ArcticZymes Technologies于2019年推出了Triton X-100 Free的SAN HQ TF高鹽核酸酶,。與SAN HQ高鹽核酸酶相比,,SAN HQ TF用Tween-20替代了Triton X-100,酶活性能完全一致,。目前,,SAN HQ和SAN HQ TF都有項目在臨床階段,相關(guān)性能都得到了行業(yè)客戶的認可,。
跟其他類型的核酸酶一樣,,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,分為可逆滅活及不可逆滅活,。金屬離子螯合劑如EDTA會可逆抑制兩者的活性,,加入的EDTA濃度一般是溶液中Mg2+濃度的2倍左右即可完全抑制活性,;后續(xù)補加過量的Mg2+即可恢復(fù)核酸酶活性,。加熱、還原劑(如DTT),、咪唑,、甘油及表面活性劑(如高于15%濃度的Triton X-100、SDS,、尿素等)等都可以使其不可逆失活,。在生物工藝流程,需要結(jié)合上下游應(yīng)用需要選擇合適的方法去除或滅活核酸酶,。致力于從深海微生物中識別新的冷適應(yīng)酶,,用于分子研究、體外診斷和制藥領(lǐng)域,。
三種AAV載體的生產(chǎn)體系(三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系,、桿狀病毒表達載體體系以及包裝細胞體系) 中都會出現(xiàn)三種衣殼:完整衣殼(full capsid)、部分衣殼(partial capsid),,和空衣殼(empty capsid),。其中完整衣殼包含正確的DNA序列,是人們所期待的產(chǎn)品,;部分衣殼和空衣殼包含部分不包含目的基因,,屬于生產(chǎn)中的雜質(zhì),,約占細胞生產(chǎn)的總AAV顆粒的50%-90%??找職?部分衣殼有如下幾種危害:1), 影響產(chǎn)品的純度,,2), 增加終產(chǎn)品的免疫原性,3), 與完整衣殼競爭infection細胞上的載體結(jié)合受體,,抑制完整衣殼的轉(zhuǎn)導(dǎo),,4),增加總體病毒載量。部分衣殼與空衣殼地存在嚴重地影響了AAV產(chǎn)品的安全性和有效性,,因此監(jiān)管機構(gòu)強烈建議在整個生產(chǎn)過程中監(jiān)控空/完整衣殼比(空殼率),。黃山高鹽核酸酶售后服務(wù)哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 ,。常州倍篤生物高鹽核酸酶采購
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在不同的鹽濃度條件下,,AAV病毒載體的存在形式不同,。低鹽濃度條件下,AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上,,從而產(chǎn)生病毒顆粒團聚現(xiàn)象,。隨著溶液鹽濃度上升,AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞,,AAV病毒顆粒會逐漸解離,。當鹽濃度升到更高范圍(>400mM左右),AAV病毒顆粒與HCD的結(jié)合更弱,,AAV顆粒更穩(wěn)定,。因此,在高鹽濃度溶液中,,AAV顆粒更加穩(wěn)定,,且有數(shù)據(jù)表明高鹽濃度不會削弱AAV的侵染能力。所以,,我們推薦提高AAV病毒生產(chǎn)中的鹽濃度,。威海70921-202高鹽核酸酶使用方法