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青海特色中鹽核酸酶

來源: 發(fā)布時間:2025-06-23

核酸酶活性受到很多因素影響,,如鹽濃度、pH,、底物,、溫度等。因此,,不同客戶,、不同項目中核酸酶的使用條件都不一。目前,,生物制藥行業(yè)對Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉,,如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等,。對于大部分使用Benzonase的項目,使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代,,而且溫度,、Mg2+濃度等條件不用做任何調(diào)整,同樣酶量的M-SAN HQ對宿主細胞DNA(HCD)的去除效果更好,、病毒載體得率更高,。經(jīng)過工藝優(yōu)化后,可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2,,且HCD去除效果及產(chǎn)品得率更高,。ArcticZymes致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品,中鹽核酸酶具有好的批間一致性,、穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,。青海特色中鹽核酸酶

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大規(guī)模生產(chǎn)階段,AAV/LV載體生產(chǎn)流程跟抗體,、疫苗類藥物的生產(chǎn)類似,,主要包含上游培養(yǎng)、下游純化及制劑部分,。上游培養(yǎng)分為質(zhì)粒開發(fā),、細胞擴增、三質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染及病毒載體生產(chǎn)等步驟,。下游純化分為細胞裂解釋放AAV病毒顆粒(可以通過去污劑,、機械作用、高滲或凍融操作等)or收獲細胞上清液得到含LV病毒原液,、加入核酸酶以減少宿主細胞核酸污染,、澄清是通過離心或過濾等方法去除細胞碎片和雜質(zhì)等,、超濾濃縮以減少后續(xù)色譜純化體系、親合及離子交換等純化得到高純度病毒載體,。制劑部分主要是超濾更換緩沖液,、過濾除菌及制劑灌裝等。山西質(zhì)量中鹽核酸酶價格表Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ),,中文名稱中鹽核酸酶,。

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M-SAN HQ中鹽核酸酶,這款核酸酶的適宜pH范圍很廣(pH 7.2 - 8.7),,且在125 – 250 mM鹽濃度內(nèi)具有良好活性,。在細胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中,不需調(diào)整任何組分,,直接加入M-SAN HQ即可表現(xiàn)良好核酸酶活性,。相比傳統(tǒng)的全能核酸酶,M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下,,對HCD的去除更高效,、更徹底。Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ) 中鹽核酸酶是用Pichia pastoris表達的重組非特異內(nèi)切核酸酶,,廣泛應用于生產(chǎn)工藝流程中,,在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。

倫敦大學學院(UCL)的工藝開發(fā)團隊,,在細胞藥物Car-T涉及的慢病毒(Lentivirus,,LV)生產(chǎn)過程中,比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活,、酶切時間,、各階段LV的穩(wěn)定性等方面的表現(xiàn),發(fā)現(xiàn)在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶活更高,、酶切時間更短,,同時用納米顆粒分析(NTA)技術(shù)確認M-SAN HQ組得到的LV病毒顆粒聚集更少、穩(wěn)定性更高,。他們會繼續(xù)探究HCD是否影響LV的穩(wěn)定性,,及對LV侵染效率和生命周期是否有影響。通過更多研究,,我們探究M-SAN HQ中鹽核酸酶助力LV生產(chǎn)的關(guān)鍵機制,。ArcticZymes成立于20世紀80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟,。

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一般來說,,生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊商標)為主,能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈,、線狀,、環(huán)狀)的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen,,通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到,。該酶的適宜反應條件是低鹽濃度范圍(<100mM鹽濃度),且酶活隨著鹽濃度上升而下降,,在300mM鹽濃度時酶活幾乎喪失,。對于細胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV,LV由于含有脂包膜結(jié)構(gòu)一般都在生理鹽條件下存在,,而AAV在高鹽條件下不易團聚,、更穩(wěn)定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下,,Benzonase活性受到抑制,。徐州中鹽核酸酶售后服務(wù)哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 ,。重慶國內(nèi)中鹽核酸酶價格表

生理鹽濃度下,,M-SAN HQ中鹽核酸酶性能優(yōu)于常用核酸酶。青海特色中鹽核酸酶

跟其他類型的核酸酶一樣,,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,,分為可逆滅活及不可逆滅活。金屬離子螯合劑如EDTA會可逆抑制兩者的活性,,加入的EDTA濃度一般是溶液中Mg2+濃度的2倍左右即可完全抑制活性;后續(xù)補加過量的Mg2+即可恢復核酸酶活性,。加熱,、還原劑(如DTT)、咪唑,、甘油及表面活性劑(如高于15%濃度的Triton X-100,、SDS、尿素等)等都可以使其不可逆失活,。在生物工藝流程,,需要結(jié)合上下游應用需要選擇合適的方法去除或滅活核酸酶。青海特色中鹽核酸酶