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四川70950-160中鹽核酸酶用途

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-23

核酸酶活性受到很多因素影響,,如鹽濃度,、pH、底物,、溫度等,。因此,不同客戶,、不同項(xiàng)目中核酸酶的使用條件都不一,。目前,生物制藥行業(yè)對(duì)Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉,,如生理鹽或低鹽濃度,、脫鹽操作等。對(duì)于大部分使用Benzonase的項(xiàng)目,,使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代,,而且溫度、Mg2+濃度等條件不用做任何調(diào)整,,同樣酶量的M-SAN HQ對(duì)宿主細(xì)胞DNA(HCD)的去除效果更好,、病毒載體得率更高。經(jīng)過工藝優(yōu)化后,,可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2,,且HCD去除效果及產(chǎn)品得率更高。M-SAN HQ中鹽核酸酶是用Pichia pastoris表達(dá)的重組非特異內(nèi)切核酸酶,。四川70950-160中鹽核酸酶用途

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一般來說,,生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊(cè)商標(biāo))為主,能高效降解任何形式(雙鏈,、單鏈,、線狀、環(huán)狀)的DNA和RNA,。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen,,通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍(<100mM鹽濃度),,且酶活隨著鹽濃度上升而下降,,在300mM鹽濃度時(shí)酶活幾乎喪失。對(duì)于細(xì)胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV,,LV由于含有脂包膜結(jié)構(gòu)一般都在生理鹽條件下存在,,而AAV在高鹽條件下不易團(tuán)聚,、更穩(wěn)定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下,,Benzonase活性受到抑制,。上海哪些中鹽核酸酶用途M-SAN HQ中鹽核酸酶更適合細(xì)胞基因drug(如AAV、LVV,、RV及OV等)的生產(chǎn),。

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在不同的鹽濃度條件下,AAV病毒載體的存在形式不同,。低鹽濃度條件下,,AAV病毒顆粒表面會(huì)通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上,從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象,。隨著溶液鹽濃度上升,,AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會(huì)被破壞,AAV病毒顆粒會(huì)逐漸解離,。當(dāng)鹽濃度升到更高范圍(>400mM左右),,AAV病毒顆粒與HCD的結(jié)合更弱,AAV顆粒更穩(wěn)定,。因此,,在高鹽濃度溶液中,AAV顆粒更加穩(wěn)定,,且有數(shù)據(jù)表明高鹽濃度不會(huì)削弱AAV的侵染能力,。所以,我們推薦提高AAV病毒生產(chǎn)中的鹽濃度,。

文章作者按照經(jīng)典的慢病毒載體生產(chǎn)流程操作,在融化,、核酸酶消化,、澄清、超濾等步驟留樣,,分別檢測(cè)dsDNA濃度及功能性LV病毒滴度,。經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn),——去除主要發(fā)生在澄清環(huán)節(jié),,能去除dsDNA的80%-90%,;2. M-SAN HQ中鹽核酸酶比Benzonase能更高效去除dsDNA,即M-SAN HQ組的TFF回流液中dsDNA殘留量是Benzonase組回流液的20%左右,;3. LV病毒滴度在澄清環(huán)節(jié)損失30%-40%,;4. M-SAN HQ組的TFF回流液中LV病毒滴度略高于Benzonase組的回流液數(shù)據(jù)。黃山中鹽核酸酶售后服務(wù)哪家好呢,,歡迎咨詢上海倍篤生物 ,。

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ArcticZymes廠家對(duì)鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品(Salt Active Nucleases,,SANs)的生產(chǎn)及質(zhì)控,在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,,增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),,如microbes、endotoxin,、蛋白酶等,,符合USP-EP要求。廠家提供HQ級(jí)別和GMP級(jí)別的SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,,從成本角度分別滿足臨床前和早期臨床階段,、商業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)階段的需求;且GMP級(jí)SAN HQ高鹽核酸酶已完成在FDA的藥物主文件(Drug Master File, DMF)申報(bào)備案,,助力加快藥物申報(bào)流程,。東臺(tái)中鹽核酸酶款式哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 ,。湖南綜合中鹽核酸酶聯(lián)系方式

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M-SAN HQ中鹽核酸酶發(fā)揮酶活性的條件比較廣,。例如,,該酶適宜的鹽濃度(NaCl)范圍是0mM-225mM,能耐受400mM NaCl濃度,。適宜反應(yīng)溫度為20℃-37℃,,能耐受4℃-40℃。Mg2+濃度大于0.5mM即可,,在4-15mM范圍即可表現(xiàn)更高活性,。跟其他核酸酶不同,M-SAN HQ中鹽核酸酶不是堿性核酸酶,,其適宜pH為7.2-8.7,,能耐受6.3-8.7。綜合這些特點(diǎn),,在生理鹽條件下,,M-SAN HQ的酶活是傳統(tǒng)全能核酸酶的5倍左右。因此,,可以說M-SAN HQ是更適合生理鹽條件下的核酸酶,。四川70950-160中鹽核酸酶用途