短期保存:4℃干燥避光長(zhǎng)期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長(zhǎng)期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測(cè)1)用無(wú)菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,,配制成30mg/mL的儲(chǔ)存液(100-200×),,混勻,。立即使用,,或分裝于-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲(chǔ)存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細(xì)胞培養(yǎng)基。作者:思存鏈接:zhuanlan./p/來(lái)源:知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)聯(lián)系作者獲得授權(quán),非商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處,。高斯熒光素酶近年來(lái),,其他熒光素酶(例如高斯熒光素酶)的使用有所增加,因?yàn)檫@些報(bào)告基因較小,,并且不需要ATP的存在,。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),可通過(guò)氧氣催化腔腸素氧化,,產(chǎn)生光,。來(lái)自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分泌出來(lái)。Amplite?高斯熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(#AAT-12530)使用專有的發(fā)光配方來(lái)定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性,。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時(shí),產(chǎn)sheng發(fā)光產(chǎn)物,,該發(fā)光產(chǎn)物提供強(qiáng)發(fā)光,。Amplite高斯熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定試劑盒特點(diǎn):提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度。南京地區(qū)有哪些做D-熒光素鉀鹽測(cè)試的公司,。南通熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽試劑
可用于需要低檢測(cè)限的測(cè)定具有用于研究基因調(diào)控和功能的快速,,簡(jiǎn)單且均一的生物發(fā)光測(cè)定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基的使用兼容高斯熒光素酶近年來(lái),其他熒光素酶(例如高斯熒光素酶)的使用有所增加,,因?yàn)檫@些報(bào)告基因較小,,并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),,可通過(guò)氧氣催化腔腸素氧化,,產(chǎn)生光。來(lái)自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分泌出來(lái),。Amplite?高斯熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒使用專有的發(fā)光配方來(lái)定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性,。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時(shí),產(chǎn)***光產(chǎn)物,,該發(fā)光產(chǎn)物提供強(qiáng)發(fā)光,。Amplite高斯熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定試劑盒特點(diǎn):提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度,可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行半衰期為一小時(shí)的“輝光型”信號(hào)在大量檢測(cè)板之間提供一致的信號(hào)與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白,。與螢火蟲(chóng)熒光素酶相比,,海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,產(chǎn)生480nm的藍(lán)光,。與螢火蟲(chóng)螢光素酶類似,。揚(yáng)州熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽生物公司做D-熒光素鉀鹽測(cè)試找哪家公司?
并實(shí)現(xiàn)了在非常高通量的應(yīng)用中使用報(bào)告基因檢測(cè),。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,,現(xiàn)在已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測(cè)方法。ATP是細(xì)胞健康的重要指標(biāo),,這使得CellTiter-Glo?能有效測(cè)定細(xì)胞活力,,尤其是在高通量應(yīng)用中。該檢測(cè)原理還促進(jìn)了其它ATP檢測(cè)平臺(tái)的誕生,,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo?(2004年)和ADP-Glo?(2009年)酶檢測(cè)系統(tǒng),。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測(cè)除了可以利用螢火蟲(chóng)螢光素酶反應(yīng)測(cè)定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,還可以檢測(cè)底物(luciferin)濃度的變化,。通過(guò)將luciferin與可被不同酶類識(shí)別并產(chǎn)生反應(yīng)的保護(hù)基團(tuán)偶聯(lián),,能對(duì)這些酶進(jìn)行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測(cè),如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶,。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測(cè)系統(tǒng)隨著對(duì)螢火蟲(chóng)螢光素酶化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)一步了解以及Promega生物學(xué)家和化學(xué)家團(tuán)隊(duì)的建立,,一種改進(jìn)的luciferin面世,能更好地用于典型的報(bào)告基因檢測(cè)應(yīng)用,。這種新的底物——fluoroluciferin,,是新型底物開(kāi)發(fā)的一個(gè)早期實(shí)例。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進(jìn)化和新型底物開(kāi)發(fā)方面的經(jīng)驗(yàn),,研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計(jì)出一種新型螢光素酶報(bào)告基因,,即NanoLuc?螢光素酶。
我們將與LgBiT具有極強(qiáng)親和作用的,。HiBiT作為一種易于檢測(cè)且具有高靈敏度的蛋白質(zhì)標(biāo)簽,,具有多種功能,例如當(dāng)與基于CRIPSR的標(biāo)簽一起使用時(shí),,可以創(chuàng)建內(nèi)源性報(bào)告基因模型,。[1]2020Lumit?技術(shù)隨著NanoBiT?技術(shù)的發(fā)展,人們認(rèn)識(shí)到可以利用該系統(tǒng)通過(guò)結(jié)合免疫測(cè)定的組分檢測(cè)多種分析物,。由此產(chǎn)生的平臺(tái)(現(xiàn)稱為“Lumit”)提供了具有高靈敏度的簡(jiǎn)化免疫檢測(cè)法,。螢光素酶(英語(yǔ):Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲(chóng)體內(nèi)的螢光素酶,。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,,熒光的產(chǎn)生是來(lái)自于螢光素的氧化,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP),。沒(méi)有螢光素酶的情況下,,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,而鈣離子的存在常常可以進(jìn)一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似),。螢光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧螢光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對(duì)比的是人類使用的白熾燈,,只有約10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M(fèi)。螢光素或螢光素酶不是特定的分子,。D-熒光素鉀鹽長(zhǎng)期保存條件是-20℃干燥避光,。
luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示:,在氧氣,、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),,生成氧化熒光素(oxyluciferin),分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,,并產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象,。但是該底物熒光素以前大多依賴進(jìn)口,產(chǎn)品價(jià)格昂貴,。而且由于該產(chǎn)品容易降解,、受潮影響使用效果。所以,,需要國(guó)產(chǎn)化的方式生產(chǎn),,一方面可以降低成本,一方面可以增強(qiáng)使用效果,。作者:科遠(yuǎn)迪鏈接:zhuanlan./p/來(lái)源:知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)聯(lián)系作者獲得授權(quán),,非商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處,。D-luciferin,potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)發(fā)光原理哺乳動(dòng)物生物發(fā)光,,一般是將Fireflyluciferase基因(由554個(gè)氨基酸構(gòu)成,,約50KD)即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA上以表達(dá)熒光素酶,培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株,,當(dāng)細(xì)胞分裂,、轉(zhuǎn)移、分化時(shí),熒光素酶也會(huì)得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá),?;颉⒓?xì)胞和活題動(dòng)物都可被熒光素酶基因標(biāo)記,。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)后,,當(dāng)外源(腹腔或靜脈注射)給予其底物熒光素(D-luciferin,potassiumsalt,以下均簡(jiǎn)稱熒光素),,即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象,。所發(fā)的光波長(zhǎng)在540-600nm。這種酶在ATP,,氧存在的條件下,,催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光。光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,。熒光素D-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明
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LAR)Promega公司推出的第一種螢光素酶檢測(cè)試劑LuciferaseAssaySystem(LAR),為靈敏,、非放射性的報(bào)告基因檢測(cè)拉開(kāi)了序幕,。LAR與螢火蟲(chóng)螢光素酶(luc)報(bào)告基因一起,為研究人員開(kāi)始了解基因表達(dá)調(diào)控因子提供了首要的工具,。[1]1995Dual-Luciferase?報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)(DLR)DLR是第一種允許在單個(gè)樣本中依次檢測(cè)兩個(gè)報(bào)告基因的試劑,。通過(guò)允許螢光素酶活性的內(nèi)部歸一化,在提高報(bào)告基因檢測(cè)的可靠性方面取得了關(guān)鍵進(jìn)展,。此外,,pGL3報(bào)告基因載體系列具有改良后的螢火蟲(chóng)螢光素酶基因,luc+,。這個(gè)改造一種報(bào)告基因以實(shí)現(xiàn)性能改進(jìn)的例子后來(lái)被進(jìn)一步應(yīng)用到pGL4和luc2報(bào)告基因上,,通過(guò)生物信息學(xué)和合成方法,實(shí)現(xiàn)了更大的改進(jìn),。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重組螢光素酶Promega公司在早期推出的一種重組螢火蟲(chóng)螢光素酶(Enliten)基礎(chǔ)上,,改造出了一種稱為UltraGlo?的熱穩(wěn)定性螢光素酶。UltraGlo?的開(kāi)發(fā)是在各種檢測(cè)和儲(chǔ)藏條件下進(jìn)行一步法“加樣-讀數(shù)”檢測(cè)的關(guān)鍵,。此后,,通過(guò)開(kāi)發(fā)新的方法來(lái)改變螢火蟲(chóng)螢光素酶檢測(cè)的信號(hào)動(dòng)力學(xué),例如Bright-Glo?,、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進(jìn)行檢測(cè),。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡(jiǎn)化了樣品處理。南通熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽試劑
南京翌科生物科技有限公司致力于商務(wù)服務(wù),,以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)***管理的追求,。翌科生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供外泌體提取,,非編碼RNA試劑,檢測(cè)試劑,,轉(zhuǎn)染試劑,。翌科生物不斷開(kāi)拓創(chuàng)新,,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),,以產(chǎn)品為平臺(tái),,以應(yīng)用為重點(diǎn),以服務(wù)為保證,,不斷為客戶創(chuàng)造更高價(jià)值,,提供更優(yōu)服務(wù)。翌科生物始終關(guān)注自身,,在風(fēng)云變化的時(shí)代,,對(duì)自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使翌科生物在行業(yè)的從容而自信,。