按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射，以小鼠為例,，每只小鼠體重假定20g,，每只小鼠用量3mg；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺期）后進(jìn)行成像分析,。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,，從而確定更高信號檢測時(shí)間和信號平臺期。注意事項(xiàng)1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）,、螢光素鉀鹽只是不同別名,，以CAS號115144-35-9為準(zhǔn)。2）注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動力學(xué)曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時(shí)間,。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測,，盡量避免外源ATP的污染，如操作時(shí)戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,，在進(jìn)行熒光素的溶解時(shí)應(yīng)使用ATP-free無菌水,。4）為避免反復(fù)凍融，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化,，如有條件,，可以對儲存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊４妗?）對于檢測靈敏度要求特別高的實(shí)驗(yàn)，建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品,。6）在進(jìn)行D-熒光素鉀鹽的溶解時(shí),，應(yīng)使用無鈣鎂離子的DPBS，因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,，此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,，從而影響檢測。7）為了您的安全和健康,。D-熒光素鉀鹽的合作平臺有哪些？D-熒光素鉀鹽活題成像原理

    更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,，而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇（發(fā)光類臍菇,，Omphalotusolearius）或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,，發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管（abdominaltrachea）的管道中輸入,。一些生物，如叩頭蟲,，含有多種不同的熒光素酶,，能夠催化同一熒光素底物，而發(fā)出不同顏色的熒光,。螢火蟲有2000多種,，而叩甲總科（包括螢火蟲、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲）則有更多,，因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用,。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲（Photinuspyralis）。免疫熒光法免疫熒光法的基本原理是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素,，當(dāng)與其相對應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時(shí),，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗原抗體結(jié)合部位,，檢測出抗原或抗體,。常用的熒光素有①異硫氰酸熒光素（fluoreceinisothiocyante，F(xiàn)ITC）,，為黃色,、橙黃色或褐黃色結(jié)晶粉末，有兩種異構(gòu)體,，易溶于水和酒精等溶劑,。分子量為389，更大吸收光譜為490～495，更大發(fā)射光譜為520～530urn,，呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,，是更常用的標(biāo)記抗體的熒光素。②四甲基異氰酸羅達(dá)明,?；窗睤-熒光素鉀鹽濃度D-熒光素鉀鹽測試方法是體外生物發(fā)光檢測。

    luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示：,，在氧氣,、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng)，生成氧化熒光素(oxyluciferin),，分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象。但是該底物熒光素以前大多依賴進(jìn)口,，產(chǎn)品價(jià)格昂貴,。而且由于該產(chǎn)品容易降解、受潮影響使用效果,。所以,，需要國產(chǎn)化的方式生產(chǎn)，一方面可以降低成本,，一方面可以增強(qiáng)使用效果,。作者：科遠(yuǎn)迪鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán),，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處,。D-luciferin，potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說明書發(fā)光原理哺乳動物生物發(fā)光,，一般是將Fireflyluciferase基因（由554個氨基酸構(gòu)成,，約50KD）即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA上以表達(dá)熒光素酶，培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株,，當(dāng)細(xì)胞分裂,、轉(zhuǎn)移、分化時(shí),熒光素酶也會得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá),?；颉⒓?xì)胞和活題動物都可被熒光素酶基因標(biāo)記,。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實(shí)驗(yàn)動物體內(nèi)后,，當(dāng)外源（腹腔或靜脈注射）給予其底物熒光素(D-luciferin，potassiumsalt,，以下均簡稱熒光素),，即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象。所發(fā)的光波長在540-600nm。這種酶在ATP,，氧存在的條件下,，催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光。

    熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,，其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,，分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase，同時(shí)近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶（Gaussluciferase）,。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),，可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,，常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報(bào)告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,，該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性,。高濃度（體內(nèi)）甚至沒有毒性，可用于原核和真核細(xì)胞,。Amplite?螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒（12518）使用無DTT**配方來定量活細(xì)胞和細(xì)胞提取物中的螢光素酶活性,。該測定基于螢火蟲熒光素酶,，螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,，可催化熒光素的兩步氧化，在560nm處產(chǎn)生光,。Amplite?螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒特點(diǎn)：具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,，可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度。做D-熒光素鉀鹽測試價(jià)格是多少,。

    8．取剩余裂解液測定LacZ的活性,，其讀數(shù)作為內(nèi)標(biāo)用以矯正熒光素酶的讀數(shù)。9.用矯正后的讀數(shù)作圖,，分析數(shù)據(jù),。注：熒光素見光易氧化，已稀釋未用的熒光素應(yīng)丟棄,。注意事項(xiàng)：1．熒光素酶檢測試劑需在15-25℃條件下預(yù)平衡后再進(jìn)行反應(yīng),，而后依據(jù)具體條件進(jìn)行自動或手動檢測。當(dāng)用液閃計(jì)數(shù)儀時(shí),，加入熒光素酶檢測試劑后立即輕輕混勻,。2．如果細(xì)胞裂解后不能立即對提取物進(jìn)行檢測，樣品可以在冰上保存大約5h,，在-70℃可保存數(shù)月,。不要反復(fù)凍融以避免酶活性的降低。3．利用上述方法檢測冷的樣品時(shí)，其信號強(qiáng)度將下降5-15%,。4．在熒光素酶活性較高的情況下,，導(dǎo)致信號超出線性范圍（信號溢出）可用裂解液將樣品進(jìn)行稀釋。5．不要儲存稀釋過的樣品,。如果必須保存,，要在稀釋的樣品中加入BSA至終濃度為，這樣可以保持樣品的穩(wěn)定性,。6．一些熒光儀在進(jìn)行檢測前需要1-2s的穩(wěn)定,，因此建議在開機(jī)后過一段時(shí)間再進(jìn)行檢測操作。熒光素酶報(bào)告基因檢測主要有哪些用途,？a.啟動子結(jié)構(gòu)分析,，將啟動子區(qū)域序列（通常2k左右）進(jìn)行分段截短，或?qū)μ囟ㄎ稽c(diǎn)進(jìn)行突變,，再分別構(gòu)建入luciferase報(bào)告載體,，檢測其啟動子活性。b.啟動子SNP分析,，一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性,。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜。熒光素 細(xì)胞

D-熒光素鉀鹽檢測公司招代理嗎,？D-熒光素鉀鹽活題成像原理

    tetrametrylrhodarnineisothiocyante,，TRITC）是一種紫紅色粉末，較穩(wěn)定,，是羅達(dá)明（rhodamine）的衍生物,。更大吸收光譜550urn，更大發(fā)射光譜620urn呈橙紅色熒光,，與FITC發(fā)射的黃綠色熒光對比鮮明,，常用于雙標(biāo)記染色。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)合步聚,，免疫熒光法可分為以下三種,。1．直接法用熒光素標(biāo)記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合，以檢查出相應(yīng)的抗原成分,。2．間接法先用特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,，洗去未結(jié)合的抗體，再用熒光素標(biāo)記的抗特異性抗體（間接熒光抗體）與特異性抗體相結(jié)合,，形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復(fù)合物,。在此復(fù)合物上帶有比直接法更多的熒光抗體，所以,，此法較直接法靈敏,。3．補(bǔ)體法用特異性的抗體和補(bǔ)體的混合液與標(biāo)本上的抗原反應(yīng),，補(bǔ)體就結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上，再用抗補(bǔ)體的熒光抗體與之相結(jié)合,，就形成了抗原一抗體一補(bǔ)體一抗補(bǔ)體熒光抗體的復(fù)合物,。熒光顯微鏡下所見到的發(fā)出熒光的部分即是抗原所在的部位。補(bǔ)體法具有敏感性強(qiáng)的優(yōu)勢,，同時(shí)適用于各種不同種屬來源的特異性抗體的標(biāo)記顯示,，在各種不同種屬動物抗體的檢測上為更常用的技術(shù)方法熒光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱。D-熒光素鉀鹽活題成像原理

南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ),，建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺,。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線，包括外泌體提取與檢測試劑,、非編碼 RNA 提取與檢測試劑,、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫,、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子,、細(xì)胞、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù),。公司堅(jiān)持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),，服務(wù)全國各級高校、研究所,、醫(yī)院,、第三方檢測機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶,。的公司,，致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí),、誠實(shí)可信的企業(yè),。翌科生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供外泌體提取,，非編碼RNA試劑，檢測試劑,，轉(zhuǎn)染試劑,。翌科生物始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念，影響并帶動團(tuán)隊(duì)取得成功,。翌科生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)行業(yè),。滿足市場需求，提高產(chǎn)品價(jià)值,，是我們前行的力量,。