并實(shí)現(xiàn)了在非常高通量的應(yīng)用中使用報(bào)告基因檢測(cè),。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,，現(xiàn)在已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測(cè)方法,。ATP是細(xì)胞健康的重要指標(biāo),，這使得CellTiter-Glo?能有效測(cè)定細(xì)胞活力，尤其是在高通量應(yīng)用中,。該檢測(cè)原理還促進(jìn)了其它ATP檢測(cè)平臺(tái)的誕生,，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶檢測(cè)系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測(cè)除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應(yīng)測(cè)定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,，還可以檢測(cè)底物（luciferin）濃度的變化,。通過將luciferin與可被不同酶類識(shí)別并產(chǎn)生反應(yīng)的保護(hù)基團(tuán)偶聯(lián)，能對(duì)這些酶進(jìn)行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測(cè),，如半胱天冬酶（caspase）和其它蛋白酶,。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測(cè)系統(tǒng)隨著對(duì)螢火蟲螢光素酶化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)一步了解以及Promega生物學(xué)家和化學(xué)家團(tuán)隊(duì)的建立，一種改進(jìn)的luciferin面世,，能更好地用于典型的報(bào)告基因檢測(cè)應(yīng)用,。這種新的底物——fluoroluciferin，是新型底物開發(fā)的一個(gè)早期實(shí)例,。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進(jìn)化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗(yàn),，研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計(jì)出一種新型螢光素酶報(bào)告基因，即NanoLuc?螢光素酶,。D-熒光素鉀鹽應(yīng)立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融,。熒光素鉀鹽使用說明

    具體實(shí)驗(yàn)流程：注：該操作流程通常用來(lái)檢測(cè)轉(zhuǎn)染了螢火蟲熒光素酶基因的真核細(xì)胞中熒光素酶表達(dá)的活性,，不適用于對(duì)細(xì)菌熒光素酶進(jìn)行檢測(cè)。1．實(shí)驗(yàn)***天,，消化并接種細(xì)胞（根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)選擇合適的細(xì)胞）于35mm細(xì)胞培養(yǎng)皿,，置于5％CO2、飽和濕度的37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)過夜,。2．等細(xì)胞密度達(dá)到70％時(shí)用Luciferase報(bào)告基因質(zhì)粒,、LacZ的表達(dá)質(zhì)粒及其它質(zhì)粒（根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)確定）共轉(zhuǎn)染細(xì)胞（根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)選擇轉(zhuǎn)染方法，如磷酸鈣沉淀法,、PEI,、lipofectamine2000等均可）。3．轉(zhuǎn)染24－36h后,，吸取培養(yǎng)液,，用預(yù)冷的PBS（無(wú)鈣和鎂離子）洗滌細(xì)胞。注：熒光酶的酶促反應(yīng)會(huì)被痕量的鈣所抑制,，故用磷酸鈣轉(zhuǎn)染的細(xì)胞在收集細(xì)胞前應(yīng)充分洗滌除去含鈣介質(zhì),。4．在每個(gè)培養(yǎng)皿中加入350μl預(yù)冷的harvestbuffer,于4℃或冰上放置10min裂解細(xì)胞。5．在細(xì)胞裂解期間,，準(zhǔn)備足量的ml微量離心管,，將ATPbuffer與luciferinbuffer以1：，每管100μl,。6．依次取等體積的細(xì)胞裂解液（100μl）至步驟5中的離心管中,，迅速混勻，在發(fā)光儀（Luminometer）上讀取吸光值,。注：發(fā)光反應(yīng)會(huì)迅速衰減,，將細(xì)胞裂解液加入反應(yīng)液后5s內(nèi)必須讀取吸光值。7．確保以相同操作手法讀取全部樣品吸光值后,。鹽城螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽保質(zhì)期D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽,。

    D-熒光素鉀鹽是一種化學(xué)品。中文別名:(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鉀鹽英文別名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt產(chǎn)品描述D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物,，普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,，特別是體內(nèi)活題成像技術(shù),。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下，熒光素底物能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過量時(shí),，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的慢病毒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株,，構(gòu)建原位腫大的瘤模型,，之后注入熒光素底物，通過IVIS系統(tǒng)來(lái)檢測(cè)光強(qiáng)度變化,，從而實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或進(jìn)行藥物藥效評(píng)價(jià)等,。也可以利用ATP對(duì)此反應(yīng)體系的影響，根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來(lái)指示能量或生命體征,。注：在抗腫大的瘤藥物藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)中,，由于生物自發(fā)光檢測(cè)需要根據(jù)熒光素表達(dá)標(biāo)定腫大的瘤大小，受腫大的瘤生長(zhǎng)所發(fā)生的腫大的瘤內(nèi)部壞死影響,，生物自發(fā)光并不能很覆蓋面廣的評(píng)價(jià)腫大的瘤生長(zhǎng),，在抗腫大的瘤藥效評(píng)價(jià)有較高要求的實(shí)驗(yàn)中，建議使用小動(dòng)物核磁成像系統(tǒng)檢測(cè)腫大的瘤生長(zhǎng),。D-熒光素也常用于體外研究,。

    從而實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的***功效等。也可以利用ATP對(duì)此反應(yīng)體系的影響,，根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來(lái)指示能量或生命體征,。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol純度：高級(jí)純（）應(yīng)用：1）活細(xì)胞、組織或生物體內(nèi)luc標(biāo)記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達(dá)的成像分析,；2）***用于報(bào)告基因分析,，免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測(cè)分析；Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測(cè)1）配制成100mM的儲(chǔ)存液（200×,，濃度30mg/ml）,。混勻后立即使用或分裝后-20℃凍存,。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲(chǔ)存液,，配制工作液(終濃度150μg/mL)。3）去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無(wú)殘留,。4）圖像分析前立即向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,，然后進(jìn)行圖像分析（或者細(xì)胞放在37℃短時(shí)間孵育后檢測(cè)可增強(qiáng)信號(hào)）。D-熒光素鉀鹽注：螢光素,、螢光素酶,、螢火蟲螢光素酶、螢光素鉀鹽、螢光素鉀鹽鹽也經(jīng)常被稱作熒光素,、熒光素酶,、螢火蟲熒光素酶、熒光素鉀鹽,、熒光素鈉鹽,。Protocol2：Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1）用無(wú)菌的DPBS（w/oMg2+、Ca2+）配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL),，。一旦使用,，保持冰冷且避光,。做D-熒光素鉀鹽測(cè)試找哪家公司？

    熒光素鈉[1],，橙紅色粉末,，無(wú)氣味，有吸濕性,；易溶于水,，溶液呈黃紅色，并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,，酸化后消失,，中和或堿化后又出現(xiàn)，微溶于乙醇,；比較大吸收波長(zhǎng)(水),。基本信息藥品名稱熒光素鈉拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM來(lái)源(分子式)與標(biāo)準(zhǔn)本品為9-(鄰羧基苯基)-6-羥基-3H-噸-3-酮二鈉鹽,。按干燥品計(jì)算,，含C20H10Na2O5不得少于。類別診斷用藥,。劑量滴眼2%溶液貯藏密封保存,。制劑熒光素鈉注射液2化學(xué)性質(zhì)編輯中文名稱：熒光素鈉中文別名：熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名稱：FluoresceindisodiumsaltCAS號(hào)：518-47-8[2]熒光素鈉分子式：C20H10Na2O5分子量：等級(jí)：BSMDL號(hào)：MFCD00167039Beilstein號(hào)：3833041EC號(hào)：208-253-0熒光素鈉[1]3性狀描述編輯本品為橙紅色粉末；無(wú)臭,，幾乎無(wú)味,；有引濕性。本品在水中易溶,，在乙醇中略溶,。橙紅色粉末，無(wú)氣味,，有吸濕性,；易溶于水，溶液呈黃紅色，并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,，酸化后消失,，中和或堿化后又出現(xiàn)，微溶于乙醇,；比較大吸收波長(zhǎng)(水),。4檢查資料編輯氯化物取本品，分取溶液10ml,，依法檢查（附錄ⅧA）,，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液制成的對(duì)照液比較，不得更濃（）,。硫酸鹽取上述氯化物項(xiàng)下剩余的溶液25ml,，依法檢查。D-熒光素鉀鹽如何選擇合作公司,？蟲熒光素鉀鹽

D-熒光素鉀鹽測(cè)試方法是體外生物發(fā)光檢測(cè),。熒光素鉀鹽使用說明

    請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。8）本產(chǎn)品只作科研用途,！D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,，存在于多種發(fā)光生物體中。在ATP和熒光素酶的催化作用下,，D-熒光素鉀被氧化,，產(chǎn)生藍(lán)綠色的光(560nm)，當(dāng)?shù)孜镞^量時(shí),，產(chǎn)生的Chemicalbook光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān),。編碼熒光素酶的Luc基因是植物、哺乳動(dòng)物細(xì)胞的常用報(bào)告基因,。由于沒有背景干擾,，因此可以很容易地檢測(cè)出低至。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現(xiàn)的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,，如螢火蟲,。在ATP存在下，螢光素酶將其氧化脫羧后會(huì)發(fā)光,?；瘜W(xué)研究中可用于熒光素酶的基板。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物,。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內(nèi)研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS,。熒光素鉀鹽使用說明

南京翌科生物科技有限公司致力于商務(wù)服務(wù)，是一家其他型公司,。公司業(yè)務(wù)涵蓋外泌體提取,，非編碼RNA試劑，檢測(cè)試劑，轉(zhuǎn)染試劑等,，價(jià)格合理,，品質(zhì)有保證。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,，努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí),，遵守行業(yè)規(guī)范，植根于商務(wù)服務(wù)行業(yè)的發(fā)展,。翌科生物秉承“客戶為尊,、服務(wù)為榮、創(chuàng)意為先,、技術(shù)為實(shí)”的經(jīng)營(yíng)理念,，全力打造公司的重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力。