并實現(xiàn)了在非常高通量的應(yīng)用中使用報告基因檢測。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,，現(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測方法,。ATP是細胞健康的重要指標，這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力,，尤其是在高通量應(yīng)用中,。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶檢測系統(tǒng),。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應(yīng)測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,，還可以檢測底物（luciferin）濃度的變化。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產(chǎn)生反應(yīng)的保護基團偶聯(lián),，能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測,，如半胱天冬酶（caspase）和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應(yīng)的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立,，一種改進的luciferin面世,，能更好地用于典型的報告基因檢測應(yīng)用。這種新的底物——fluoroluciferin,，是新型底物開發(fā)的一個早期實例,。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗，研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計出一種新型螢光素酶報告基因,，即NanoLuc?螢光素酶,。南京翌科生物科技有限公司的D-熒光素鉀鹽測試怎么樣？熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商

    酸化后消失,，中和或堿化后又出現(xiàn),，微溶于乙醇；比較大吸收波長（水）,。中文名稱：熒光素鈉中文別名：熒光黃鈉,；熒光橙紅鈉；熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級：BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀：未確定2.密度（g/cm3,25/4℃）：.相對蒸汽密度（g/cm3,空氣=1）：未確定4.熔點（oC）：3205.沸點（oC,常壓）：未確定6.沸點（oC,8kPa）：未確定7.折射率：未確定8.閃點（oC）：未確定9.比旋光度（o）：未確定10.自燃點或引燃溫度（oC）：未確定11.蒸氣壓（kPa,25oC）：未確定12.飽和蒸氣壓（kPa,60oC）：未確定13.燃燒熱（KJ/mol）：未確定14.臨界溫度（oC）：未確定15.臨界壓力（KPa）：未確定16.油水（辛醇/水）分配系數(shù)的對數(shù)值：未確定17.上限（%,V/V）：未確定18.下限（%,V/V）：未確定19.溶解性：溶于水及乙醇,，帶有強的綠色熒光,，水溶性好。上海專業(yè)做D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長D-熒光素鉀鹽測試需要滿足哪些條件,？

    海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測,。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒提供了一種快速，靈敏的方法,，可以使用專有的發(fā)光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,，與海腎螢光素酶相互作用后,，該試劑產(chǎn)生具有強光的產(chǎn)物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點：該測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分,。熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素等物質(zhì)氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。自然界中，不同的發(fā)光生物擁有不同的熒光素酶,，除了螢火蟲熒光素酶（FireflyLuciferase）之外,，還有發(fā)光細菌體內(nèi)的細菌熒光素酶、發(fā)光海星的海星熒光素酶等,。目前,，人們對螢火蟲熒光素酶的研究**多、應(yīng)用***,。一則關(guān)于手機上的細菌的新聞里,，**在用ATP熒光檢測儀檢測手機表面的細菌。ATP是一種在動物,、植物和細菌等活細胞中都存在的能量物質(zhì),，由前述的反應(yīng)式可知，ATP與熒光素,、熒光素酶反應(yīng)發(fā)出熒光,。檢測樣品中的微生物越多，ATP就越多,，熒光反應(yīng)的光亮就越大,。

    可用熒光素酶檢測系統(tǒng)靈敏方便地測定熒光素酶基因的表達。熒光素酶報告基因有許多優(yōu)點：①非放射性,；②比CAT及其他報告基因速度快；③比CAT靈敏100倍,；④熒光素酶在哺乳細胞中的半衰期為3小時,，在植物中的半衰期為3．5小時,。由于半衰期短,，故啟動子的改變會即時導(dǎo)致熒光素酶活性的改變，而熒光素酶不會積累,。相反，CAT在哺乳細胞中的半衰期為50小時。熒光素酶濃度在10—16mol/L（10pS/L）到10-8mol/L（1mg/L）范圍內(nèi),，熒光信號強度與酶濃度成正比,。在理想條件下,，可檢測到l0-20mol/L的熒光素酶。檢測步驟：1．用生物信息學方法分析并預(yù)測啟動子區(qū)可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點,。2．設(shè)計引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動子片段，將此片段插入到熒光素酶報告基因質(zhì)粒（pGL3-basic）中,。3．篩選陽性克隆,，測序,。擴增克隆并提純質(zhì)粒備用。4．擴增轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒,，提純備用,。同時準備相應(yīng)的空載質(zhì)粒對照,，提純備用,。5．培養(yǎng)293（或其它目的細胞），并接種于24孔板中,，生長10-24小時（80%匯合度）,。6．將報告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細胞,。7．提取蛋白并用于熒光素酶檢測。8．加入底物,，測定熒光素酶的活性,。9．計算相對熒光強度，并與空載對照比較,。D-熒光素鉀鹽的合作平臺有哪些？

    后者能夠易溶于水或緩沖液中,，使用方便,，溶劑無毒性,，特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,，在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別,。產(chǎn)品性質(zhì)運輸和保存運輸條件：4℃冰袋運輸,；短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×)，混勻,。立即使用，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前,，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min,，然后進行圖像分析,。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液，混勻,。2）用μm濾膜過濾除菌,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融,。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射，以小鼠為例,，每只小鼠體重假定20g，每只小鼠用量3mg,；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析,。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。 D-熒光素鉀鹽使用的是什么技術(shù),？鎮(zhèn)江熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商

D-熒光素鉀鹽應(yīng)立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商

    2）按10μL/g體重的濃度向每支小鼠注射相應(yīng)量的15mg/mL熒光素溶液,；3）腹腔注射10-15min后進行成像分析。（對每只動物模型做熒光素動力學研究以確定峰值信號獲取時間）Firefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素分子式：C11H8N2O3S2分子量：g/mol外觀：白色至淺黃色粉末溶解：,，形成近乎無色至淺黃色的清夜保存：-15°C避光應(yīng)用：1）活細胞、組織或生物體內(nèi)luc標記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達的成像分析,；2）***用于報告基因分析,，免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析D-熒光素也常用于體外研究,，包括熒光素酶和ATP水平分析；報告基因分析,；高通量測序和各種污染檢測,。目前有三種產(chǎn)品形式：D-熒光素（游離酸）,，D-熒光素鹽（鈉鹽和鉀鹽）。主要差別在于溶解特性：前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,，除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,，可溶于甲醇和DMSO,；后者易溶于水或緩沖液中，使用方便,，溶劑d0926aa8-0148-40da-80fa-f65性,，特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,，在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別。相關(guān)列表魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二,。熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商

南京翌科生物科技有限公司致力于商務(wù)服務(wù),，是一家其他型公司,。公司業(yè)務(wù)涵蓋外泌體提取，非編碼RNA試劑,，檢測試劑,，轉(zhuǎn)染試劑等，價格合理,，品質(zhì)有保證,。公司將不斷增強企業(yè)重點競爭力，努力學習行業(yè)知識,，遵守行業(yè)規(guī)范,，植根于商務(wù)服務(wù)行業(yè)的發(fā)展。翌科生物秉承“客戶為尊,、服務(wù)為榮、創(chuàng)意為先,、技術(shù)為實”的經(jīng)營理念,，全力打造公司的重點競爭力,。