luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示：,，在氧氣,、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。但是該底物熒光素以前大多依賴進口，產(chǎn)品價格昂貴,。而且由于該產(chǎn)品容易降解,、受潮影響使用效果,。所以,，需要國產(chǎn)化的方式生產(chǎn)，一方面可以降低成本,，一方面可以增強使用效果。作者：科遠(yuǎn)迪鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán),，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處,。D-luciferin，potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說明書發(fā)光原理哺乳動物生物發(fā)光,，一般是將Fireflyluciferase基因（由554個氨基酸構(gòu)成,，約50KD）即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA上以表達(dá)熒光素酶,，培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株,，當(dāng)細(xì)胞分裂,、轉(zhuǎn)移,、分化時,熒光素酶也會得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá),。基因,、細(xì)胞和活題動物都可被熒光素酶基因標(biāo)記,。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實驗動物體內(nèi)后,，當(dāng)外源（腹腔或靜脈注射）給予其底物熒光素(D-luciferin,，potassiumsalt,，以下均簡稱熒光素),，即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。所發(fā)的光波長在540-600nm,。這種酶在ATP,，氧存在的條件下,，催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光,。D-熒光素鉀鹽的使用說明,。泰州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽應(yīng)用

    具體實驗流程：注：該操作流程通常用來檢測轉(zhuǎn)染了螢火蟲熒光素酶基因的真核細(xì)胞中熒光素酶表達(dá)的活性,，不適用于對細(xì)菌熒光素酶進行檢測,。1．實驗***天，消化并接種細(xì)胞（根據(jù)具體實驗選擇合適的細(xì)胞）于35mm細(xì)胞培養(yǎng)皿,，置于5％CO2,、飽和濕度的37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)過夜。2．等細(xì)胞密度達(dá)到70％時用Luciferase報告基因質(zhì)粒,、LacZ的表達(dá)質(zhì)粒及其它質(zhì)粒（根據(jù)具體實驗確定）共轉(zhuǎn)染細(xì)胞（根據(jù)具體實驗選擇轉(zhuǎn)染方法,，如磷酸鈣沉淀法、PEI,、lipofectamine2000等均可）,。3．轉(zhuǎn)染24－36h后，吸取培養(yǎng)液,，用預(yù)冷的PBS（無鈣和鎂離子）洗滌細(xì)胞,。注：熒光酶的酶促反應(yīng)會被痕量的鈣所抑制，故用磷酸鈣轉(zhuǎn)染的細(xì)胞在收集細(xì)胞前應(yīng)充分洗滌除去含鈣介質(zhì),。4．在每個培養(yǎng)皿中加入350μl預(yù)冷的harvestbuffer,于4℃或冰上放置10min裂解細(xì)胞,。5．在細(xì)胞裂解期間,，準(zhǔn)備足量的ml微量離心管，將ATPbuffer與luciferinbuffer以1：,，每管100μl,。6．依次取等體積的細(xì)胞裂解液（100μl）至步驟5中的離心管中,，迅速混勻,，在發(fā)光儀（Luminometer）上讀取吸光值,。注：發(fā)光反應(yīng)會迅速衰減,，將細(xì)胞裂解液加入反應(yīng)液后5s內(nèi)必須讀取吸光值。7．確保以相同操作手法讀取全部樣品吸光值后,。淮安熒光素D-熒光素鉀鹽試劑D-熒光素鉀鹽測試方法是體外生物發(fā)光檢測,。

    而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,，而叩甲總科（包括螢火蟲、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲）則有更多,，因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用,。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲（Photinuspyralis）,。熒光素酶報告基因（Luc）是指以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),。熒光素酶是能夠催化不同底物氧化發(fā)光的一類酶,，哺乳細(xì)胞無內(nèi)源性熒光素酶,。更常用的熒光素酶有細(xì)菌熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和Renilla熒光素酶,。細(xì)菌熒光素酶對熱敏感,，因此在哺乳細(xì)胞的應(yīng)用中受到限制。螢火蟲熒光素酶靈敏度高,，檢測線性范圍寬達(dá)7～8個數(shù)量級,，是更常用于哺乳細(xì)胞的報道基因，用熒光比色計即可檢測酶活性,，因而適用于高通量篩選,。隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲熒光素酶的應(yīng)用，無需裂解細(xì)胞即可檢測酶活性,。Renilla熒光素酶催化腸腔（coelenterazine）氧化,，產(chǎn)物可透過生物膜，可能是更適用于活細(xì)胞的報告分子,。將熒光素酶報告基因載體轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,。

    螢光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱，其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶,，螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍(lán)色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世,。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)的早期，這一現(xiàn)象被認(rèn)為是發(fā)展生物分析的有力平臺,。1991年,，Promega發(fā)布了***代螢光素酶分析產(chǎn)品，并啟動了基于螢光素酶的進一步創(chuàng)新計劃,，通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù),。Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,，Promega***提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術(shù)的應(yīng)用可能性。當(dāng)時的人們認(rèn)為,，螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性,、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點，可能會對分子生物學(xué)家的研究產(chǎn)生重要的影響,。幾個月后，***代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,，使這項新技術(shù)正式并更***地為全球研究人員服務(wù),。隨后30年里，Promega不斷在螢光素酶實驗工具領(lǐng)域推陳出新,，保持技術(shù)***的地位,。這里提到的螢光素酶即熒光素酶。[1]1991螢光素酶檢測系統(tǒng),。做D-熒光素鉀鹽測試哪個公司好,？

    酸化后消失，中和或堿化后又出現(xiàn),，微溶于乙醇,；比較大吸收波長（水）。中文名稱：熒光素鈉中文別名：熒光黃鈉,；熒光橙紅鈉,；熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級：BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀：未確定2.密度（g/cm3,25/4℃）：.相對蒸汽密度（g/cm3,空氣=1）：未確定4.熔點（oC）：3205.沸點（oC,常壓）：未確定6.沸點（oC,8kPa）：未確定7.折射率：未確定8.閃點（oC）：未確定9.比旋光度（o）：未確定10.自燃點或引燃溫度（oC）：未確定11.蒸氣壓（kPa,25oC）：未確定12.飽和蒸氣壓（kPa,60oC）：未確定13.燃燒熱（KJ/mol）：未確定14.臨界溫度（oC）：未確定15.臨界壓力（KPa）：未確定16.油水（辛醇/水）分配系數(shù)的對數(shù)值：未確定17.上限（%,V/V）：未確定18.下限（%,V/V）：未確定19.溶解性：溶于水及乙醇，帶有強的綠色熒光,，水溶性好,。D-熒光素鉀鹽的測試方法有哪幾種？徐州熒光素酶D-熒光素鉀鹽公司

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    附錄ⅧB）,，與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液制成的對照液比較，不得更濃（）,。干燥失重取本品,，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過%（附錄ⅧL）,。鋅鹽取本品,，加氯化鈉的飽和水溶液10ml溶解后，加稀鹽酸2ml,，搖勻,，濾過，濾液中加亞鐵**鉀試液1ml,，不得發(fā)生渾濁,。5鑒別方法編輯(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴，點于濾紙上，即生成黃色斑點,，趁濕置溴蒸氣中,，1分鐘后再使與氨蒸氣接觸，斑點即變?yōu)樯罘奂t色,。(2)本品的水溶液顯強烈的熒光,，用大量的水稀釋后仍極明顯；但加酸使成酸性后,，熒光即消失,；再加堿使成堿性，熒光又顯出,。(3)本品熾灼灰化后顯鈉鹽的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）,。6含量測定編輯取本品約，精密稱定,，加水20ml溶解后,，加稀鹽酸5ml使熒光素析出，用丁醇－氯仿(1:1)提取4次,，每次20ml,，合并提取液，用水10ml洗滌,，洗液再用異丁醇－氯仿(1:1)5ml振搖提取,，合并提取液，置105℃恒重的容器中,，在水浴上通風(fēng)蒸發(fā)至干,，殘渣用乙醇10ml溶解后，再置水浴上蒸干,，并在105℃干燥至恒重,，精密稱定，殘渣重量與相乘,，即得供試量中含有C20H10Na2O5的重量,。熒光素鈉是一種有機化合物，分子式為C20H10Na2O5,，橙紅色粉末,，無氣味，有吸濕性,；易溶于水,，溶液呈黃紅色，并帶極強的黃綠色熒光,。泰州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽應(yīng)用

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