5）對(duì)于檢測(cè)靈敏度要求特別高的實(shí)驗(yàn)，建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品,。6）在進(jìn)行D-熒光素鉀鹽的溶解時(shí),，應(yīng)使用無(wú)鈣鎂離子的DPBS，因鈣鎂離子可能會(huì)抑制熒光素酶的活性,，此外鎂離子可能會(huì)對(duì)熒光素的氧化造成影響,，從而影響檢測(cè)。7）為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。8）本產(chǎn)品只作科研用途！熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,，其中更有代表性的是來(lái)自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶，分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,，同時(shí)近年來(lái)研究得較多的來(lái)源于高斯氏菌的高斯熒光素酶（Gaussluciferase）,。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過(guò)程中,，會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence),，可通過(guò)熒光測(cè)定儀設(shè)備測(cè)定luciferin氧化過(guò)程中釋放的生物熒光，常應(yīng)用于啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。螢火蟲螢光素酶更通用和更常見(jiàn)的報(bào)告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,，該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性,。高濃度（體內(nèi)）甚至沒(méi)有毒性，可用于原核和真核細(xì)胞,。運(yùn)輸和保存運(yùn)輸條件：4℃冰袋運(yùn)輸,。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜。南京ATPD-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明

    或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲(chǔ)存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細(xì)胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前,，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min,，然后進(jìn)行圖像分析,。2.***成像分析1）用無(wú)菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲(chǔ)存液,，混勻,。2）用μm濾膜過(guò)濾除菌。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射,。4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號(hào)達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期）后進(jìn)行成像分析。注：建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,，從而確定更高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期,。注意事項(xiàng)1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2）注射方式,、動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線，確定更佳信號(hào)平臺(tái)期和更佳的檢測(cè)時(shí)間,。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測(cè),，盡量避免外源ATP的污染，如操作時(shí)戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,，在進(jìn)行熒光素的溶解時(shí)應(yīng)使用ATP-free無(wú)菌水,。泰州專業(yè)做D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長(zhǎng)D-熒光素鉀鹽的使用說(shuō)明。

    螢火蟲熒光素酶（Luciferase）是一種常用的信號(hào)分子,，可以用來(lái)標(biāo)記腫瘤細(xì)胞.一．細(xì)胞方法將帶有熒光素luc轉(zhuǎn)酶報(bào)告基因的真核表達(dá)重組質(zhì)粒pRc/CMV2-7,，利用G418篩選,，獲得穩(wěn)染人乳腺哎細(xì)胞株MCF-7-luc,，并在穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶基因的細(xì)胞克隆MCF-7體外評(píng)價(jià)其發(fā)光能力。通過(guò)建立裸鼠移植瘤模型,，利用活題生物發(fā)光成像系統(tǒng)檢測(cè)腫大的瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移情況,，為下一步監(jiān)測(cè)裸鼠移植瘤對(duì)藥物作用的變化情從而為分析藥物對(duì)腫大的瘤的治的好效果提供理想的狀況.G418篩選濃度的確定：37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中常培養(yǎng),G418按0,、200,、400、600,、800,、1000μg/ml設(shè)置6個(gè)濃度梯度,。在細(xì)胞接種24h后，加入6孔板中,，每個(gè)濃度設(shè)2個(gè)孔在10～14d內(nèi)全部死亡。每天觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,，死亡更低的G418濃度,，即為篩選質(zhì)粒轉(zhuǎn)染克隆MCF－7細(xì)胞的濃度。1)細(xì)胞轉(zhuǎn)染取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF－7細(xì)胞,，將細(xì)胞接種于6孔板內(nèi)待細(xì)胞融合度達(dá)到80%～90%孔培養(yǎng)板中，TM即可轉(zhuǎn)染,。按照Lipofectamine2000試劑盒操作指南進(jìn)行轉(zhuǎn)染,。在250μl無(wú)血清、無(wú)雙抗的DMEM培培養(yǎng)基中加入luc質(zhì)粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl無(wú)血清,、無(wú)雙抗的DMEM培養(yǎng)基中加入10μlLipofectamineTM2000,，室溫培育5min,。將上述2種稀釋液混勻。

    4）待圖像分析前,，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,，37℃孵育5-10min，然后進(jìn)行圖像分析,。2.活ti成像分析1）用無(wú)菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲(chǔ)存液，混勻,。2）用μm濾膜過(guò)濾除菌,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射,，以小鼠為例,，每只小鼠體重假定20g,，每只小鼠用量3mg,；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號(hào)達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期）后進(jìn)行成像分析。注：建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,，從而確定更高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。注意事項(xiàng)1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）、螢光素鉀鹽只是不同別名,，以CAS號(hào)115144-35-9為準(zhǔn),。2）注射方式,、動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,，確定更佳信號(hào)平臺(tái)期和更佳的檢測(cè)時(shí)間,。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測(cè),，盡量避免外源ATP的污染，如操作時(shí)戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,，在進(jìn)行熒光素的溶解時(shí)應(yīng)使用ATP-free無(wú)菌水。4）為避免反復(fù)凍融,，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存,。為防止氧化，如有條件,，可以對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊４?。做D-熒光素鉀鹽測(cè)試品牌有哪些？

    產(chǎn)品描述D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物,，普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,，特別是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,，熒光素底物能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過(guò)量時(shí)，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性（見(jiàn)下圖）,。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的慢病毒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株,，構(gòu)建原位**模型，之后注入熒光素底物,，通過(guò)IVIS系統(tǒng)來(lái)檢測(cè)光強(qiáng)度變化,，從而實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或進(jìn)行藥物藥效評(píng)價(jià)等。也可以利用ATP對(duì)此反應(yīng)體系的影響,，根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來(lái)指示能量或生命體征,。注：在抗**藥物藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)中，由于生物自發(fā)光檢測(cè)需要根據(jù)熒光素表達(dá)標(biāo)定**大小,，受**生長(zhǎng)所發(fā)生的**內(nèi)部壞死影響,，生物自發(fā)光并不能很***的評(píng)價(jià)**生長(zhǎng)，在抗**藥效評(píng)價(jià)有較高要求的實(shí)驗(yàn)中,，建議使用小動(dòng)物核磁成像系統(tǒng)檢測(cè)**生長(zhǎng),。D-熒光素也常用于體外研究，包括熒光素酶和ATP水平分析,；報(bào)告基因分析,；高通量測(cè)序和各種污染檢測(cè)。目前有三種產(chǎn)品形式：D-熒光素（游離酸）,，D-熒光素鹽（鈉鹽和鉀鹽）,。主要差別在于溶解特性：前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱，除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,?？扇苡诩状己虳MSO。 D-熒光素鉀鹽的活題成像技術(shù),。徐州熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長(zhǎng)

D-熒光素鉀鹽應(yīng)立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。南京ATPD-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明

    因此只有在活細(xì)胞內(nèi)才會(huì)產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象,，并且發(fā)光光強(qiáng)度與標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)目線性相關(guān),。結(jié)構(gòu)與性能熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),，生成氧化熒光素(oxyluciferin),，并產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的,，約一分鐘就可以擴(kuò)散到小鼠全身,。熒光素的半衰期約三個(gè)小時(shí)，只有活細(xì)胞才能夠持續(xù)表達(dá)熒光素酶,。(1)熒光素不會(huì)影響動(dòng)物的正常生理功能,。(2)熒光素是280道爾頓的小分子，水溶性和脂溶性都非常好,，很容易穿透細(xì)胞膜和血腦屏障。(3)熒光素在體內(nèi)擴(kuò)散速度快,，可通過(guò)腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi),。腹腔注射擴(kuò)散較慢，持續(xù)發(fā)光長(zhǎng),。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞開始發(fā)光,，10min后強(qiáng)度達(dá)到穩(wěn)定的更高點(diǎn)，在更高點(diǎn)持續(xù)約20~30min后開始衰減,，約3h后熒光素排除,，發(fā)光全部消失,，更佳檢測(cè)時(shí)間是在注射后15~35min之間；若進(jìn)行熒光素靜脈注射,，擴(kuò)散快，但發(fā)光持續(xù)時(shí)間很短,。科研人員根據(jù)大量的實(shí)驗(yàn)總結(jié)出熒光素的合適的用量是150mg/kg,，即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素。(4)觀察時(shí)間的間隔沒(méi)有更短限制，只要觀察的條件控制一致就可以,。雖然底物在動(dòng)物體內(nèi)有一定的代謝過(guò)程,。南京ATPD-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明

南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ)，建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺(tái),。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,，包括外泌體提取與檢測(cè)試劑,、非編碼 RNA 提取與檢測(cè)試劑、轉(zhuǎn)染試劑,、microRNA 表達(dá)文庫(kù),、臨床大數(shù)據(jù)庫(kù)及涵蓋分子,、細(xì)胞,、動(dòng)物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅(jiān)持國(guó)產(chǎn)試劑自主研發(fā),，服務(wù)全國(guó)各級(jí)高校,、研究所,、醫(yī)院,、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu),、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的公司,，是一家集研發(fā),、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司,。翌科生物深耕行業(yè)多年,，始終以客戶的需求為向?qū)?，為客戶提?**的外泌體提取,，非編碼RNA試劑,，檢測(cè)試劑，轉(zhuǎn)染試劑,。翌科生物繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路，既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng),，又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。翌科生物創(chuàng)始人金芳芳,，始終關(guān)注客戶,，創(chuàng)新科技,，竭誠(chéng)為客戶提供良好的服務(wù)。