包括熒光素酶和ATP水平分析；報告基因分析,；高通量測序和各種污染檢測,。目前有三種產(chǎn)品形式：D-熒光素（游離酸），D-熒光素鹽（鈉鹽和鉀鹽）,。主要差別在于溶解特性：前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,，除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液?？扇苡诩状己虳MSO,；后者能夠易溶于水或緩沖液中，使用方便,，溶劑無毒性,，特別適合體內(nèi)實驗,。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,，在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別,。產(chǎn)品性質(zhì)運輸和保存運輸條件：4℃冰袋運輸；短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×)，混勻,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融,。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3）去除細胞培養(yǎng)基。4）待圖像分析前,，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液,，37℃孵育5-10min，然后進行圖像分析,。2.活題成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液，混勻,。2）用μm濾膜過濾除菌,。立即使用，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。3）腹腔注射（.）。D-熒光素鉀鹽測試方法是體外生物發(fā)光檢測,。螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽公司

    常見的熒光素酶有兩種,，分別是螢火蟲熒光素酶（fireflyluciferase，編碼基因是luc）和海腎熒光素酶（Renillaluciferase,，編碼基因是Rluc）,，前者的底物是D-Luciferin，后者的底物是Coelenterazine,。它們共同的作用原理是在ATP和熒光素酶的催化作用下,，底物被氧化發(fā)光（不同底物光的顏色和波長不同），當(dāng)?shù)孜镞^量時,，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,。***成像技術(shù)（opticalinvivoimaging）目前主要采用生物發(fā)光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術(shù)，生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物（D-Luciferin或Coelenterazine）化學(xué)發(fā)光的原理,，將體外能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株植入動物體內(nèi),，與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應(yīng)，利用光學(xué)系統(tǒng)檢測光強度,，間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位。這項技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域常用的有**或疾病動物模型的建立,，并可用于病毒學(xué)研究、siRNA研究,、干細胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究等,。以下主要介紹D-Luciferin（D熒光素）的分類：D-Luciferin：有三種,，分別是D-Luciferin,SodiumSalt/D熒光素鈉鹽、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素,。熒光素鈉測試D-熒光素也常用于身體的外部研究,。

    而是對于所有能夠產(chǎn)生螢光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱，雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的螢光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng)。**為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,，而其所采用不同的螢光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇（發(fā)光類臍菇,，Omphalotusolearius）或許多海洋生物都不相同,。在螢火蟲中,，發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管（abdominaltrachea）的管道中輸入,。一些生物，如叩頭蟲,，含有多種不同的螢光素酶,，能夠催化同一螢光素底物,，而發(fā)出不同顏色的螢光,。螢火蟲有2000多種，而叩甲總科（包括螢火蟲,、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲）則有更多，因此它們的螢光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用,。如今研究得**透徹的螢光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲（Photinuspyralis）,。[1]螢光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成，并被用于多種不同的實驗,。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細胞中。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠,、家蠶,、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶。間接體外成像是一種強大的研究手段,，可以對整個動物體中的細胞群落進行分析：將不同類型的細胞（骨髓干細胞,、T細胞等）標(biāo)記上（即表達）螢光素酶。

    酸化后消失,，中和或堿化后又出現(xiàn),，微溶于乙醇；比較大吸收波長（水）,。中文名稱：熒光素鈉中文別名：熒光黃鈉,；熒光橙紅鈉；熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級：BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀：未確定2.密度（g/cm3,25/4℃）：.相對蒸汽密度（g/cm3,空氣=1）：未確定4.熔點（oC）：3205.沸點（oC,常壓）：未確定6.沸點（oC,8kPa）：未確定7.折射率：未確定8.閃點（oC）：未確定9.比旋光度（o）：未確定10.自燃點或引燃溫度（oC）：未確定11.蒸氣壓（kPa,25oC）：未確定12.飽和蒸氣壓（kPa,60oC）：未確定13.燃燒熱（KJ/mol）：未確定14.臨界溫度（oC）：未確定15.臨界壓力（KPa）：未確定16.油水（辛醇/水）分配系數(shù)的對數(shù)值：未確定17.上限（%,V/V）：未確定18.下限（%,V/V）：未確定19.溶解性：溶于水及乙醇,，帶有強的綠色熒光,，水溶性好。南京D-熒光素鉀鹽測試公司有哪幾家,。

    具體實驗流程：注：該操作流程通常用來檢測轉(zhuǎn)染了螢火蟲熒光素酶基因的真核細胞中熒光素酶表達的活性，不適用于對細菌熒光素酶進行檢測,。1．實驗***天,，消化并接種細胞（根據(jù)具體實驗選擇合適的細胞）于35mm細胞培養(yǎng)皿,，置于5％CO2,、飽和濕度的37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)過夜。2．等細胞密度達到70％時用Luciferase報告基因質(zhì)粒,、LacZ的表達質(zhì)粒及其它質(zhì)粒（根據(jù)具體實驗確定）共轉(zhuǎn)染細胞（根據(jù)具體實驗選擇轉(zhuǎn)染方法,，如磷酸鈣沉淀法、PEI,、lipofectamine2000等均可）,。3．轉(zhuǎn)染24－36h后，吸取培養(yǎng)液,，用預(yù)冷的PBS（無鈣和鎂離子）洗滌細胞,。注：熒光酶的酶促反應(yīng)會被痕量的鈣所抑制，故用磷酸鈣轉(zhuǎn)染的細胞在收集細胞前應(yīng)充分洗滌除去含鈣介質(zhì),。4．在每個培養(yǎng)皿中加入350μl預(yù)冷的harvestbuffer,于4℃或冰上放置10min裂解細胞,。5．在細胞裂解期間，準(zhǔn)備足量的ml微量離心管,，將ATPbuffer與luciferinbuffer以1：,，每管100μl。6．依次取等體積的細胞裂解液（100μl）至步驟5中的離心管中,，迅速混勻,，在發(fā)光儀（Luminometer）上讀取吸光值。注：發(fā)光反應(yīng)會迅速衰減,，將細胞裂解液加入反應(yīng)液后5s內(nèi)必須讀取吸光值,。7．確保以相同操作手法讀取全部樣品吸光值后。做D-熒光素鉀鹽測試找哪家公司,？徐州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商

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    luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示：，在氧氣,、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。但是該底物熒光素以前大多依賴進口，產(chǎn)品價格昂貴,。而且由于該產(chǎn)品容易降解,、受潮影響使用效果。所以,，需要國產(chǎn)化的方式生產(chǎn),，一方面可以降低成本,，一方面可以增強使用效果。作者：科遠迪鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán),，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。D-luciferin,，potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說明書發(fā)光原理哺乳動物生物發(fā)光,，一般是將Fireflyluciferase基因（由554個氨基酸構(gòu)成，約50KD）即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細胞染色體DNA上以表達熒光素酶,，培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株,，當(dāng)細胞分裂、轉(zhuǎn)移,、分化時,熒光素酶也會得到持續(xù)穩(wěn)定的表達,。基因,、細胞和活題動物都可被熒光素酶基因標(biāo)記,。將標(biāo)記好的細胞接種到實驗動物體內(nèi)后，當(dāng)外源（腹腔或靜脈注射）給予其底物熒光素(D-luciferin,，potassiumsalt,，以下均簡稱熒光素)，即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。所發(fā)的光波長在540-600nm。這種酶在ATP,，氧存在的條件下,，催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光。螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽公司

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