GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素-NHS酯5(6)-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素D熒光素鈉鹽D-Luciferin,SodiumSaltD-熒光素鉀鹽D-Luciferin,PotassiumSaltD-熒光素螢火蟲,，游離酸D-LuciferinFirefly,freeacid螢火蟲熒光素酶fireflyluciferase海腎熒光素酶Renillaluciferase天然腔腸熒光素Coelenterazineh腔腸素hCoelenterazinef腔腸素fCoelenterazineh/腔腸素h腔腸熒光素活題成像用D-luciferin,potassiumsalt熒光素鉀鹽介紹一,、活題成像技術(shù)簡介活題生物發(fā)光成像技術(shù)能夠讓研究人員直接快速的測量各種哎癥模型中腫大的瘤的生長,、轉(zhuǎn)移以及對藥物的反應(yīng),。在藥效學(xué)評價方面,，熒光素酶哎癥模型可用于哎癥體內(nèi)用藥在整體動物水平上進(jìn)行長期療效跟蹤觀察,。利用無創(chuàng)傷活題成像對哎細(xì)胞生長的檢測,，可對哎癥治的好之前和過程中的哎細(xì)胞的變化進(jìn)行實時觀測和評估,。熒光素酶的發(fā)光是生物發(fā)光，不需要激發(fā)光,，但需要底物熒光素(D-Luciferin),。熒光素酶的底物熒光素，約280道爾頓,。熒光素的水溶性和脂溶性都非常好,，很容易穿透細(xì)胞膜和血腦屏障。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的,，約一分鐘就可以擴(kuò)散到小鼠全身,。熒光素。D-熒光素鉀鹽檢測的安全性如何保障,？徐州螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用

    可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性,。c.驗證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用，將該序列（通常為啟動子區(qū)域）插入報告基因載體,，同時在實驗細(xì)胞***轉(zhuǎn)過表達(dá)該轉(zhuǎn)錄因子,，可分析轉(zhuǎn)錄因子過表達(dá)是否提高熒光素酶活性。d.可以分析信號通路是否***,，將該信號通路的下游響應(yīng)原件序列構(gòu)建入報告基因載體,，在不同上游信號條件下，熒光素酶活性**了通路的下游響應(yīng),。例如在GPCR研究中,，將cAMPresponseelement（CRE）載入報告基因載體，構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株后,，可以用于分析GPRC的***與6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd篩選,。又如，將HIF1α的響應(yīng)原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase報告載體構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,，可以用于低氧相關(guān)通路的研究,。e.驗證microRNA的靶序列，將待測的3’UTR序列插入報告基因載體,，再共轉(zhuǎn)入該microRNA,，如果熒光素酶活性下降，則提示為其靶序列,。Q：在[信諾金達(dá)]做熒光素酶報告基因檢測,，需要提供什么？實驗結(jié)果包括哪些,？您需要提供：1.基因序列或模板,，需提供詳細(xì)的轉(zhuǎn)錄因子、目的基因或microRNA信息,；2.實驗細(xì)胞,，[信諾金達(dá)]默認(rèn)為使用293T細(xì)胞,，實驗結(jié)束后，[信諾金達(dá)]會為您提供實驗流程及完整報告一份,，包括實驗原始數(shù)據(jù),、圖片、分析結(jié)果等,。揚州熒光素酶D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長D-熒光素鉀鹽測試適用范圍包括哪些,？

    LAR）Promega公司推出的第一種螢光素酶檢測試劑LuciferaseAssaySystem（LAR），為靈敏,、非放射性的報告基因檢測拉開了序幕,。LAR與螢火蟲螢光素酶（luc）報告基因一起，為研究人員開始了解基因表達(dá)調(diào)控因子提供了首要的工具,。[1]1995Dual-Luciferase?報告基因檢測系統(tǒng)（DLR）DLR是第一種允許在單個樣本中依次檢測兩個報告基因的試劑,。通過允許螢光素酶活性的內(nèi)部歸一化，在提高報告基因檢測的可靠性方面取得了關(guān)鍵進(jìn)展,。此外,，pGL3報告基因載體系列具有改良后的螢火蟲螢光素酶基因，luc+,。這個改造一種報告基因以實現(xiàn)性能改進(jìn)的例子后來被進(jìn)一步應(yīng)用到pGL4和luc2報告基因上，通過生物信息學(xué)和合成方法,，實現(xiàn)了更大的改進(jìn),。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重組螢光素酶Promega公司在早期推出的一種重組螢火蟲螢光素酶（Enliten）基礎(chǔ)上，改造出了一種稱為UltraGlo?的熱穩(wěn)定性螢光素酶,。UltraGlo?的開發(fā)是在各種檢測和儲藏條件下進(jìn)行一步法“加樣-讀數(shù)”檢測的關(guān)鍵,。此后，通過開發(fā)新的方法來改變螢火蟲螢光素酶檢測的信號動力學(xué),，例如Bright-Glo?,、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進(jìn)行檢測。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡化了樣品處理,。

    螢光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,，其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶，螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍(lán)色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世,。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)的早期,，這一現(xiàn)象被認(rèn)為是發(fā)展生物分析的有力平臺。1991年,，Promega發(fā)布了***代螢光素酶分析產(chǎn)品,，并啟動了基于螢光素酶的進(jìn)一步創(chuàng)新計劃，通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù),。Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,，Promega***提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術(shù)的應(yīng)用可能性,。當(dāng)時的人們認(rèn)為，螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性,、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點,，可能會對分子生物學(xué)家的研究產(chǎn)生重要的影響。幾個月后,，***代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,，使這項新技術(shù)正式并更***地為全球研究人員服務(wù)。隨后30年里,，Promega不斷在螢光素酶實驗工具領(lǐng)域推陳出新,，保持技術(shù)***的地位。這里提到的螢光素酶即熒光素酶,。[1]1991螢光素酶檢測系統(tǒng),。D-熒光素鉀鹽檢測是個人合作嗎？

    是新型底物開發(fā)的一個早期實例,。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進(jìn)化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗,，研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計出一種新型螢光素酶報告基因，即NanoLuc?螢光素酶,。這是一種小分子（19kDa）單體酶,，具有獨特的底物，其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍,。這種新型的報告基因有著范圍廣的應(yīng)用前景,，為進(jìn)一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質(zhì)標(biāo)簽的理想特征,。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移（BRET）的供體,。一項針對各種能量受體熒光基團(tuán)的深入研究發(fā)現(xiàn)，紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關(guān)的一些挑戰(zhàn),?？蓪⑦@些熒光基團(tuán)添加到蛋白質(zhì)配基等分子中以測量靶蛋白的結(jié)合，或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進(jìn)行活細(xì)胞中蛋白質(zhì)：蛋白質(zhì)相互作用的檢測,。[1]2016NanoBiT?技術(shù)隨著NanoLuc?的誕生,，Promega的科學(xué)家努力將該報告基因改造為多亞基系統(tǒng)，即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?,。該系統(tǒng)由兩部分組成：11個氨基酸的小標(biāo)簽和一個更大,，更精細(xì)的NanoLuc?亞基，LgBiT,。這兩部分結(jié)構(gòu)互補結(jié)合,。D-熒光素鉀鹽的使用說明。gluc熒光素酶

D-熒光素鉀鹽短期保存條件是4℃干燥避光。徐州螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用

    或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細(xì)胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前,，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min,，然后進(jìn)行圖像分析,。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻,。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射,。4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺期）后進(jìn)行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期,。注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2）注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間,。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染,，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,，在進(jìn)行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水。徐州螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用

南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團(tuán)隊十余年的研發(fā)基礎(chǔ),，建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺,。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線，包括外泌體提取與檢測試劑,、非編碼 RNA 提取與檢測試劑,、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫,、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子,、細(xì)胞、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),，服務(wù)全國各級高校,、研究所、醫(yī)院,、第三方檢測機(jī)構(gòu),、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的公司,，是一家集研發(fā),、設(shè)計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司,。翌科生物擁有一支經(jīng)驗豐富,、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供外泌體提取,，非編碼RNA試劑,，檢測試劑，轉(zhuǎn)染試劑,。翌科生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心,，為用戶帶來良好體驗。翌科生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)行業(yè),。滿足市場需求,，提高產(chǎn)品價值，是我們前行的力量,。