因此只有在活細(xì)胞內(nèi)才會產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,，并且發(fā)光光強(qiáng)度與標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)目線性相關(guān)。結(jié)構(gòu)與性能熒光素在氧氣,、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的,，約一分鐘就可以擴(kuò)散到小鼠全身。熒光素的半衰期約三個小時,，只有活細(xì)胞才能夠持續(xù)表達(dá)熒光素酶,。(1)熒光素不會影響動物的正常生理功能。(2)熒光素是280道爾頓的小分子,，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透細(xì)胞膜和血腦屏障,。(3)熒光素在體內(nèi)擴(kuò)散速度快,，可通過腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入動物體內(nèi)。腹腔注射擴(kuò)散較慢,，持續(xù)發(fā)光長,。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞開始發(fā)光，10min后強(qiáng)度達(dá)到穩(wěn)定的更高點(diǎn),，在更高點(diǎn)持續(xù)約20~30min后開始衰減,，約3h后熒光素排除，發(fā)光全部消失,，更佳檢測時間是在注射后15~35min之間,；若進(jìn)行熒光素靜脈注射,，擴(kuò)散快，但發(fā)光持續(xù)時間很短,?？蒲腥藛T根據(jù)大量的實(shí)驗(yàn)總結(jié)出熒光素的合適的用量是150mg/kg，即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素,。(4)觀察時間的間隔沒有更短限制,，只要觀察的條件控制一致就可以。雖然底物在動物體內(nèi)有一定的代謝過程,。南京翌科生物科技有限公司的D-熒光素鉀鹽測試怎么樣,？異硫氰酸熒光素顏色

    螢光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱，其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶,，螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍(lán)色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世,。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)的早期，這一現(xiàn)象被認(rèn)為是發(fā)展生物分析的有力平臺,。1991年,，Promega發(fā)布了***代螢光素酶分析產(chǎn)品，并啟動了基于螢光素酶的進(jìn)一步創(chuàng)新計劃,，通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù),。Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月，Promega***提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術(shù)的應(yīng)用可能性,。當(dāng)時的人們認(rèn)為,，螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點(diǎn),，可能會對分子生物學(xué)家的研究產(chǎn)生重要的影響,。幾個月后，***代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,，使這項(xiàng)新技術(shù)正式并更***地為全球研究人員服務(wù),。隨后30年里，Promega不斷在螢光素酶實(shí)驗(yàn)工具領(lǐng)域推陳出新,，保持技術(shù)***的地位,。這里提到的螢光素酶即熒光素酶。[1]1991螢光素酶檢測系統(tǒng),。南通熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽濃度D-熒光素鉀鹽測試需要哪些必備條件,？

    4）待圖像分析前，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,，37℃孵育5-10min,，然后進(jìn)行圖像分析。2.活ti成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻,。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射,，以小鼠為例，每只小鼠體重假定20g,，每只小鼠用量3mg,；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺期）后進(jìn)行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期,。注意事項(xiàng)1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）、螢光素鉀鹽只是不同別名,，以CAS號115144-35-9為準(zhǔn),。2）注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測,，盡量避免外源ATP的污染,，如操作時戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材，在進(jìn)行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水,。4）為避免反復(fù)凍融,，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化,，如有條件,，可以對儲存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊４妗?/p>

    熒光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠,、家蠶,、馬鈴薯等一些生物可以合成熒光素酶。間接體外成像是一種強(qiáng)大的研究手段,，可以對整個動物體中的細(xì)胞群落進(jìn)行分析：將不同類型的細(xì)胞（骨髓干細(xì)胞、T細(xì)胞等）標(biāo)記上（即表達(dá)）熒光素酶,，就可以用高敏感度的CCD相機(jī)進(jìn)行對動物體內(nèi)進(jìn)行活ti觀察而不會傷害到動物本身,。在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光，而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,，如熒光探測器或改進(jìn)后的光學(xué)顯微鏡探測到,。這就使得對包括影響在內(nèi)的多種生命活動進(jìn)程進(jìn)行觀察成為可能,。例如，熒光素酶可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂,。法醫(yī)可以用含有熒光素酶的溶液來檢測犯罪現(xiàn)場中殘留的血跡,。醫(yī)院用熒光素酶的發(fā)光來發(fā)現(xiàn)特定的疾病。熒光素酶還可以作為“報告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,，例如,，用于在轉(zhuǎn)染過熒光素酶的細(xì)胞中檢測特定啟動子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測細(xì)胞內(nèi)的ATP的水平；這一技術(shù)被稱為報告基因檢測法或熒光素酶檢測法（LuciferaseAssay）,。熒光素酶是一個熱敏感蛋白,，因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護(hù)能力。D-熒光素鉀鹽適用于哪些領(lǐng)域,？

    或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3）去除細(xì)胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,，37℃孵育5-10min,，然后進(jìn)行圖像分析。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻。2）用μm濾膜過濾除菌,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融,。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射。4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺期）后進(jìn)行成像分析,。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項(xiàng)1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid,。2）注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間,。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,，在進(jìn)行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水,。D-熒光素鉀鹽應(yīng)立即使用，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。熒光 試劑

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    請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。8）本產(chǎn)品只作科研用途,！D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物，存在于多種發(fā)光生物體中,。在ATP和熒光素酶的催化作用下,，D-熒光素鉀被氧化，產(chǎn)生藍(lán)綠色的光(560nm),，當(dāng)?shù)孜镞^量時,，產(chǎn)生的Chemicalbook光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)。編碼熒光素酶的Luc基因是植物,、哺乳動物細(xì)胞的常用報告基因,。由于沒有背景干擾，因此可以很容易地檢測出低至,。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現(xiàn)的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,，如螢火蟲。在ATP存在下,，螢光素酶將其氧化脫羧后會發(fā)光,。化學(xué)研究中可用于熒光素酶的基板,。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物,。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內(nèi)研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS。異硫氰酸熒光素顏色

南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ),，建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺,。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線，包括外泌體提取與檢測試劑,、非編碼 RNA 提取與檢測試劑,、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫,、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子,、細(xì)胞、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù),。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),，服務(wù)全國各級高校、研究所、醫(yī)院,、第三方檢測機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶,。的公司,，致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠實(shí)可信的企業(yè),。公司自創(chuàng)立以來,，投身于外泌體提取，非編碼RNA試劑,，檢測試劑,，轉(zhuǎn)染試劑，是商務(wù)服務(wù)的主力軍,。翌科生物繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,，既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長，又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破,。翌科生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)市場，以敏銳的市場洞察力,，實(shí)現(xiàn)與客戶的成長共贏,。