或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前,，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min,，然后進行圖像分析,。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻,。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射,。4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期,。注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2）注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間,。3）如果要進行ATP的檢測,，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,，在進行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水,。D-熒光素鉀鹽找南京翌科生物科技有限公司。熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

    常見的熒光素酶有兩種，分別是螢火蟲熒光素酶（fireflyluciferase,，編碼基因是luc）和海腎熒光素酶（Renillaluciferase,，編碼基因是Rluc），前者的底物是D-Luciferin,，后者的底物是Coelenterazine,。它們共同的作用原理是在ATP和熒光素酶的催化作用下，底物被氧化發(fā)光（不同底物光的顏色和波長不同）,，當(dāng)?shù)孜镞^量時,，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。***成像技術(shù)（opticalinvivoimaging）目前主要采用生物發(fā)光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術(shù),，生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物（D-Luciferin或Coelenterazine）化學(xué)發(fā)光的原理,，將體外能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株植入動物體內(nèi)，與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應(yīng),，利用光學(xué)系統(tǒng)檢測光強度,，間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位。這項技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域常用的有**或疾病動物模型的建立,，并可用于病毒學(xué)研究,、siRNA研究、干細胞研究,、蛋白質(zhì)相互作用研究等,。以下主要介紹D-Luciferin（D熒光素）的分類：D-Luciferin：有三種，分別是D-Luciferin,SodiumSalt/D熒光素鈉鹽,、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素,。鹽城螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用D-熒光素鉀鹽的使用說明。

    SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol純度：高級純（）應(yīng)用：1）體外化學(xué)發(fā)光分析（invitro）,；2）***成像實驗（invivo）,；3）高靈敏度ATP分析；步驟：Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1）用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,，配制成100mM的儲存液（200×,，濃度30mg/ml）?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存,。2）用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液，配置工作液(終濃度150μg/mL),。3）去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前，向細胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,，然后進行圖像分析,。Protocol2：Invivoanalysis/***成像分析1）用無菌的PBS（w/oMg2+、Ca2+）配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL)，,。一旦使用,，保持冰冷且避光。D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物,，普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,，尤其是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,，熒光素（底物）能夠被氧化發(fā)光（見下圖）,。當(dāng)熒光素過量時，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細胞后,，導(dǎo)入研究動物如大、小鼠體內(nèi),，之后注入熒光素,，通過生物發(fā)光成像技術(shù)（BLI）來檢測光強度變化,。

    D-熒光素鉀鹽是一種化學(xué)品,。中文別名:(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鉀鹽英文別名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt產(chǎn)品描述D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,，特別是體內(nèi)活題成像技術(shù),。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，熒光素底物能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過量時,，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的慢病毒轉(zhuǎn)染入細胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達細胞株,，構(gòu)建原位腫大的瘤模型,，之后注入熒光素底物，通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強度變化,，從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或進行藥物藥效評價等,。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響，根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征,。注：在抗腫大的瘤藥物藥效評價試驗中,，由于生物自發(fā)光檢測需要根據(jù)熒光素表達標定腫大的瘤大小，受腫大的瘤生長所發(fā)生的腫大的瘤內(nèi)部壞死影響,，生物自發(fā)光并不能很覆蓋面廣的評價腫大的瘤生長,，在抗腫大的瘤藥效評價有較高要求的實驗中，建議使用小動物核磁成像系統(tǒng)檢測腫大的瘤生長,。D-熒光素也常用于體外研究,。D-熒光素鉀鹽測試比較好的公司有哪幾個？

    luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示：，在氧氣,、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。但是該底物熒光素以前大多依賴進口，產(chǎn)品價格昂貴,。而且由于該產(chǎn)品容易降解,、受潮影響使用效果。所以,，需要國產(chǎn)化的方式生產(chǎn),，一方面可以降低成本，一方面可以增強使用效果,。作者：科遠迪鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán)，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處,。D-luciferin,，potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說明書發(fā)光原理哺乳動物生物發(fā)光，一般是將Fireflyluciferase基因（由554個氨基酸構(gòu)成,，約50KD）即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細胞染色體DNA上以表達熒光素酶,，培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株，當(dāng)細胞分裂,、轉(zhuǎn)移,、分化時,熒光素酶也會得到持續(xù)穩(wěn)定的表達?；?、細胞和活題動物都可被熒光素酶基因標記。將標記好的細胞接種到實驗動物體內(nèi)后,，當(dāng)外源（腹腔或靜脈注射）給予其底物熒光素(D-luciferin,，potassiumsalt，以下均簡稱熒光素),，即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。所發(fā)的光波長在540-600nm。這種酶在ATP,，氧存在的條件下,，催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽測試價格,。香豆素?zé)晒?/p>

D-熒光素也常用于身體的外部研究,。熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

    熒光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細胞中,。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠、家蠶,、馬鈴薯等一些生物可以合成熒光素酶,。間接體外成像是一種強大的研究手段，可以對整個動物體中的細胞群落進行分析：將不同類型的細胞（骨髓干細胞,、T細胞等）標記上（即表達）熒光素酶,，就可以用高敏感度的CCD相機進行對動物體內(nèi)進行活ti觀察而不會傷害到動物本身。在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光,，而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,，如熒光探測器或改進后的光學(xué)顯微鏡探測到。這就使得對包括影響在內(nèi)的多種生命活動進程進行觀察成為可能,。例如,，熒光素酶可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂。法醫(yī)可以用含有熒光素酶的溶液來檢測犯罪現(xiàn)場中殘留的血跡,。醫(yī)院用熒光素酶的發(fā)光來發(fā)現(xiàn)特定的疾病,。熒光素酶還可以作為“報告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中，例如,，用于在轉(zhuǎn)染過熒光素酶的細胞中檢測特定啟動子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測細胞內(nèi)的ATP的水平,；這一技術(shù)被稱為報告基因檢測法或熒光素酶檢測法（LuciferaseAssay）。熒光素酶是一個熱敏感蛋白,，因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護能力,。熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

南京翌科生物科技有限公司致力于商務(wù)服務(wù),，以科技創(chuàng)新實現(xiàn)***管理的追求,。翌科生物作為翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎(chǔ)，建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺,。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,，包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑,、轉(zhuǎn)染試劑,、microRNA 表達文庫、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子,、細胞,、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),，服務(wù)全國各級高校,、研究所、醫(yī)院,、第三方檢測機構(gòu),、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶,。的企業(yè)之一，為客戶提供良好的外泌體提取,，非編碼RNA試劑,，檢測試劑，轉(zhuǎn)染試劑,。翌科生物繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,，既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長，又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,，實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破,。翌科生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)市場，以敏銳的市場洞察力,，實現(xiàn)與客戶的成長共贏,。