包括熒光素酶和ATP水平分析,;報(bào)告基因分析,;高通量測序和各種污染檢測,。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),,D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽),。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,??扇苡诩状己虳MSO,;后者能夠易溶于水或緩沖液中,,使用方便,溶劑無毒性,,特別適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn),。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實(shí)質(zhì)性的差別,。產(chǎn)品性質(zhì)運(yùn)輸和保存運(yùn)輸條件:4℃冰袋運(yùn)輸,;短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),,混勻,。立即使用,,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3)去除細(xì)胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,,37℃孵育5-10min,然后進(jìn)行圖像分析,。2.活題成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻,。2)用μm濾膜過濾除菌,。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。3)腹腔注射(.)。D-熒光素鉀鹽適用于哪些領(lǐng)域,?熒光素鈉使用方法
8.取剩余裂解液測定LacZ的活性,,其讀數(shù)作為內(nèi)標(biāo)用以矯正熒光素酶的讀數(shù)。9.用矯正后的讀數(shù)作圖,,分析數(shù)據(jù),。注:熒光素見光易氧化,已稀釋未用的熒光素應(yīng)丟棄,。注意事項(xiàng):1.熒光素酶檢測試劑需在15-25℃條件下預(yù)平衡后再進(jìn)行反應(yīng),,而后依據(jù)具體條件進(jìn)行自動(dòng)或手動(dòng)檢測。當(dāng)用液閃計(jì)數(shù)儀時(shí),,加入熒光素酶檢測試劑后立即輕輕混勻,。2.如果細(xì)胞裂解后不能立即對提取物進(jìn)行檢測,樣品可以在冰上保存大約5h,,在-70℃可保存數(shù)月,。不要反復(fù)凍融以避免酶活性的降低。3.利用上述方法檢測冷的樣品時(shí),,其信號強(qiáng)度將下降5-15%,。4.在熒光素酶活性較高的情況下,導(dǎo)致信號超出線性范圍(信號溢出)可用裂解液將樣品進(jìn)行稀釋,。5.不要儲存稀釋過的樣品,。如果必須保存,要在稀釋的樣品中加入BSA至終濃度為,,這樣可以保持樣品的穩(wěn)定性,。6.一些熒光儀在進(jìn)行檢測前需要1-2s的穩(wěn)定,,因此建議在開機(jī)后過一段時(shí)間再進(jìn)行檢測操作。熒光素酶報(bào)告基因檢測主要有哪些用途,?a.啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)分析,將啟動(dòng)子區(qū)域序列(通常2k左右)進(jìn)行分段截短,,或?qū)μ囟ㄎ稽c(diǎn)進(jìn)行突變,,再分別構(gòu)建入luciferase報(bào)告載體,檢測其啟動(dòng)子活性,。b.啟動(dòng)子SNP分析,,一些基因的啟動(dòng)子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性。南通熒光素酶D-熒光素鉀鹽保質(zhì)期D-熒光素鉀鹽母液保存條件是-20℃避光,。
經(jīng)HE染色后觀察細(xì)胞的病理形態(tài)學(xué),。活題動(dòng)物成像技術(shù)是近期發(fā)展起來的一種新型穩(wěn)定可靠,是檢測動(dòng)物體內(nèi)分子及細(xì)胞事件的影像檢測技術(shù),,強(qiáng)有力手段,。利用生物發(fā)光成像(BLI)可以對活題病灶的大小進(jìn)行無損傷直觀準(zhǔn)確檢測。我們有自己的獨(dú)自有機(jī)合成實(shí)驗(yàn)室,,可以生產(chǎn)合成各種化學(xué)發(fā)光試劑,,我們可以提供化學(xué)發(fā)光試劑、化學(xué)發(fā)光底物,、發(fā)光標(biāo)記物,、發(fā)光增強(qiáng)劑、染料探針類,、微生物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑,。相關(guān)列表魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇丙的酮酸三(環(huán)已胺)鹽PEP0c835bf4-aae2-43c1-be81-e57液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結(jié)合物吖啶酯-T3結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-T3結(jié)合物生物素-T4結(jié)合物化學(xué)發(fā)光分析試劑及標(biāo)記物生物素-T3結(jié)合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PE。
后者能夠易溶于水或緩沖液中,,使用方便,,溶劑無毒性,特別適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn),。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,,在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實(shí)質(zhì)性的差別。產(chǎn)品性質(zhì)運(yùn)輸和保存運(yùn)輸條件:4℃冰袋運(yùn)輸,;短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻,。立即使用,,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3)去除細(xì)胞培養(yǎng)基,。4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,,37℃孵育5-10min,,然后進(jìn)行圖像分析。2.***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌,。立即使用,,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。3)腹腔注射(.),,按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射,以小鼠為例,,每只小鼠體重假定20g,,每只小鼠用量3mg;4)注射入體內(nèi)10-15min(待光信號達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺期)后進(jìn)行成像分析,。注:建議對每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,,從而確定更高信號檢測時(shí)間和信號平臺期。 D-熒光素鉀鹽長期保存是有效期一年,。
螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,,其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶,螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍(lán)色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世,。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)的早期,,這一現(xiàn)象被認(rèn)為是發(fā)展生物分析的有力平臺。1991年,,Promega發(fā)布了***代螢光素酶分析產(chǎn)品,,并啟動(dòng)了基于螢光素酶的進(jìn)一步創(chuàng)新計(jì)劃,通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù),。Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,,Promega***提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報(bào)告基因技術(shù)的應(yīng)用可能性。當(dāng)時(shí)的人們認(rèn)為,,螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性,、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點(diǎn),可能會對分子生物學(xué)家的研究產(chǎn)生重要的影響,。幾個(gè)月后,,***代螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,使這項(xiàng)新技術(shù)正式并更***地為全球研究人員服務(wù),。隨后30年里,,Promega不斷在螢光素酶實(shí)驗(yàn)工具領(lǐng)域推陳出新,,保持技術(shù)***的地位。這里提到的螢光素酶即熒光素酶,。[1]1991螢光素酶檢測系統(tǒng),。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜。熒光增白劑pf
D-熒光素鉀鹽使用濃度怎么樣,?熒光素鈉使用方法
這是一種小分子(19kDa)單體酶,,具有獨(dú)特的底物,其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍,。這種新型的報(bào)告基因有著***的應(yīng)用前景,為進(jìn)一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ),。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質(zhì)標(biāo)簽的理想特征,。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)的供體。一項(xiàng)針對各種能量受體熒光基團(tuán)的深入研究發(fā)現(xiàn),,紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關(guān)的一些挑戰(zhàn),。可將這些熒光基團(tuán)添加到蛋白質(zhì)配基等分子中以測量靶蛋白的結(jié)合,,或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進(jìn)行活細(xì)胞中蛋白質(zhì):蛋白質(zhì)相互作用的檢測,。[1]2016NanoBiT?技術(shù)隨著NanoLuc?的誕生,Promega的科學(xué)家努力將該報(bào)告基因改造為多亞基系統(tǒng),,即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?,。該系統(tǒng)由兩部分組成:11個(gè)氨基酸的小標(biāo)簽和一個(gè)更大,更精細(xì)的NanoLuc?亞基,,LgBiT,。這兩部分結(jié)構(gòu)互補(bǔ)結(jié)合,重組為一個(gè)明亮的螢光素酶,。這些亞基的親和力可以和SmBiT肽一樣低,,從而可以進(jìn)行蛋白質(zhì)相互作用的測定;也可以和HiBiT一樣高,,從而允許自我組裝,。[1]2017HiBiT?技術(shù)基于NanoBiT?系統(tǒng)的研究。熒光素鈉使用方法
南京翌科生物科技有限公司致力于商務(wù)服務(wù),,是一家其他型公司,。公司自成立以來,以質(zhì)量為發(fā)展,,讓匠心彌散在每個(gè)細(xì)節(jié),,公司旗下外泌體提取,非編碼RNA試劑,,檢測試劑,,轉(zhuǎn)染試劑深受客戶的喜愛,。公司注重以質(zhì)量為中心,以服務(wù)為理念,,秉持誠信為本的理念,,打造商務(wù)服務(wù)良好品牌。翌科生物秉承“客戶為尊,、服務(wù)為榮,、創(chuàng)意為先、技術(shù)為實(shí)”的經(jīng)營理念,,全力打造公司的重點(diǎn)競爭力,。