并實現(xiàn)了在非常高通量的應用中使用報告基因檢測,。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,,現(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測方法。ATP是細胞健康的重要指標,,這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力,,尤其是在高通量應用中,。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生,,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo?(2004年)和ADP-Glo?(2009年)酶檢測系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,,還可以檢測底物(luciferin)濃度的變化,。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產(chǎn)生反應的保護基團偶聯(lián),能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測,,如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶,。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立,一種改進的luciferin面世,,能更好地用于典型的報告基因檢測應用,。這種新的底物——fluoroluciferin,是新型底物開發(fā)的一個早期實例,。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗,,研究人員從蝦的螢光素酶改造設計出一種新型螢光素酶報告基因,即NanoLuc?螢光素酶,。南京地區(qū)有哪些做D-熒光素鉀鹽測試的公司,。徐州ATPD-熒光素鉀鹽生物公司
更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同,。在螢火蟲中,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入,。一些生物,,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,,能夠催化同一熒光素底物,,而發(fā)出不同顏色的熒光,。螢火蟲有2000多種,,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關昆蟲)則有更多,,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用,。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis)。免疫熒光法免疫熒光法的基本原理是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,,在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗原抗體結合部位,,檢測出抗原或抗體,。常用的熒光素有①異硫氰酸熒光素(fluoreceinisothiocyante,F(xiàn)ITC),,為黃色,、橙黃色或褐黃色結晶粉末,,有兩種異構體,易溶于水和酒精等溶劑,。分子量為389,,更大吸收光譜為490~495,更大發(fā)射光譜為520~530urn,,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,,是更常用的標記抗體的熒光素。②四甲基異氰酸羅達明,。熒光底物酶D-熒光素鉀鹽的活題成像技術,。
經(jīng)HE染色后觀察細胞的病理形態(tài)學?;铑}動物成像技術是近期發(fā)展起來的一種新型穩(wěn)定可靠,是檢測動物體內分子及細胞事件的影像檢測技術,,強有力手段。利用生物發(fā)光成像(BLI)可以對活題病灶的大小進行無損傷直觀準確檢測,。我們有自己的獨自有機合成實驗室,,可以生產(chǎn)合成各種化學發(fā)光試劑,我們可以提供化學發(fā)光試劑,、化學發(fā)光底物,、發(fā)光標記物、發(fā)光增強劑,、染料探針類,、微生物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。相關列表魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇丙的酮酸三(環(huán)已胺)鹽PEP0c835bf4-aae2-43c1-be81-e57液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結合物吖啶酯-T3結合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結合物吖啶磺酰胺鹽-T3結合物生物素-T4結合物化學發(fā)光分析試劑及標記物生物素-T3結合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PE,。
熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,,其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(Fire?y)和海腎(Renilla)體內的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase),。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),,可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉錄活性調控及miRNA靶基因驗證等方向研究,。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,,該蛋白質不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內)甚至沒有毒性,,可用于原核和真核細胞,。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒(12518)使用無DTT**配方來定量活細胞和細胞提取物中的螢光素酶活性。該測定基于螢火蟲熒光素酶,螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,,可催化熒光素的兩步氧化,,在560nm處產(chǎn)生光。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒特點:具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,,可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度,。D-熒光素有時候也叫游離酸。
常見的熒光素酶有兩種,,分別是螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase,,編碼基因是luc)和海腎熒光素酶(Renillaluciferase,編碼基因是Rluc),,前者的底物是D-Luciferin,,后者的底物是Coelenterazine。它們共同的作用原理是在ATP和熒光素酶的催化作用下,,底物被氧化發(fā)光(不同底物光的顏色和波長不同),,當?shù)孜镞^量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性,。***成像技術(opticalinvivoimaging)目前主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術,,生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物(D-Luciferin或Coelenterazine)化學發(fā)光的原理,將體外能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株植入動物體內,,與后期注射入體內的底物發(fā)生反應,,利用光學系統(tǒng)檢測光強度,間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位,。這項技術已被廣泛應用于多個領域常用的有**或疾病動物模型的建立,,并可用于病毒學研究、siRNA研究,、干細胞研究,、蛋白質相互作用研究等。以下主要介紹D-Luciferin(D熒光素)的分類:D-Luciferin:有三種,,分別是D-Luciferin,SodiumSalt/D熒光素鈉鹽,、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素。做D-熒光素鉀鹽測試品牌有哪些,?徐州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽供應商
D-熒光素鉀鹽長期保存條件是-20℃干燥避光,。徐州ATPD-熒光素鉀鹽生物公司
酸化后消失,,中和或堿化后又出現(xiàn),,微溶于乙醇;比較大吸收波長(水),。中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉,;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級:BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀:未確定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相對蒸汽密度(g/cm3,空氣=1):未確定4.熔點(oC):3205.沸點(oC,常壓):未確定6.沸點(oC,8kPa):未確定7.折射率:未確定8.閃點(oC):未確定9.比旋光度(o):未確定10.自燃點或引燃溫度(oC):未確定11.蒸氣壓(kPa,25oC):未確定12.飽和蒸氣壓(kPa,60oC):未確定13.燃燒熱(KJ/mol):未確定14.臨界溫度(oC):未確定15.臨界壓力(KPa):未確定16.油水(辛醇/水)分配系數(shù)的對數(shù)值:未確定17.上限(%,V/V):未確定18.下限(%,V/V):未確定19.溶解性:溶于水及乙醇,帶有強的綠色熒光,,水溶性好,。徐州ATPD-熒光素鉀鹽生物公司
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