2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇**酸三(環(huán)已胺)鹽PEP病毒保存液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結合物吖啶酯-T3結合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結合物吖啶磺酰胺鹽-T3結合物生物素-T4結合物化學發(fā)光分析試劑及標記物生物素-T3結合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素-NHS酯5(6)-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素D熒光素鈉鹽D-Luciferin,SodiumSaltD-熒光素鉀鹽D-Luciferin,PotassiumSaltD-熒光素螢火蟲,游離酸D-LuciferinFirefly,freeacid螢火蟲熒光素酶fireflyluciferase海腎熒光素酶Renillaluciferase天然腔腸熒光素Coelenterazineh腔腸素hCoelenterazinef腔腸素fCoelenterazineh/腔腸素h腔腸熒光素運輸和保存冰袋運輸,;-20℃干燥避光保存;有效期一年,。使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鈉鹽,,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻,。立即使用,。D-熒光素鉀鹽的活題成像技術。蘇州ATPD-熒光素鉀鹽哪家好
但是上一次底物的殘留曲線可以知道,,可以控制對下一次觀察結果的影響,。儲存與運輸一般放在-20℃的冰箱即可,半年以上不使用放在-80℃的冰箱,,溶解配制后放在4℃冰箱,,短期運輸放在4℃環(huán)境。建議現用現配,,D熒光素鉀鹽在液體中容易降解,。應用領域腫大的瘤,干細胞,,藥物開發(fā),,基因治的好,轉基因小鼠,,免疫學等等,。英文名字firefly.中文名稱熒光素酶,重組熒光素貨號AAT-12500規(guī)格¥1430/1mL背景資料:熒光素酶是來自北美螢火蟲(Photinuspyralis)中熒光素酶基因的克隆和重組表達,,它為實驗研究或者用生物熒光試劑制備試劑盒檢測ATP或者熒光素底物提供了可信度和可靠性,。這種重組酶可以克服由天然資源純化獲得熒光素酶時受季節(jié)和地方區(qū)域變化的影響。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,,在luciferin氧化的過程中,,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉錄活性調控及miRNA靶基因驗證等方向研究,。產品形式提供的熒光素酶*重組熒光素*產品為溶液形式,。作者:思存鏈接:zhuanlan./p/來源:知乎著作權歸作者所有。商業(yè)轉載請聯系作者獲得授權,,非商業(yè)轉載請注明出處,。鎮(zhèn)江體外研究D-熒光素鉀鹽哪家好D-熒光素鉀鹽熒光素酶和ATP水平分析。
請穿實驗服并戴一次性手套操作,。8)本產品只作科研用途,!D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,存在于多種發(fā)光生物體中,。在ATP和熒光素酶的催化作用下,,D-熒光素鉀被氧化,產生藍綠色的光(560nm),,當底物過量時,,產生的Chemicalbook光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關。編碼熒光素酶的Luc基因是植物,、哺乳動物細胞的常用報告基因,。由于沒有背景干擾,因此可以很容易地檢測出低至,。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,,如螢火蟲。在ATP存在下,,螢光素酶將其氧化脫羧后會發(fā)光,。化學研究中可用于熒光素酶的基板,。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物,。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS。
熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內,。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,,因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀,。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和530nm,。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統稱,其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyralis的螢火蟲體內的熒光素酶,。在相應化學反應中,,熒光的產生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP),。沒有熒光素酶的情況下,,螢光素與氧氣反應的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M一步加速反應(與肌肉收縮的情況相似),。[1]熒光生成反應通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光,。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,,只有越10%的能量被轉化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M,。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,,而是對于所有能夠產生熒光的底物和其對應的酶的統稱,雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應,。做D-熒光素鉀鹽的哪家便宜。
具體實驗流程:注:該操作流程通常用來檢測轉染了螢火蟲熒光素酶基因的真核細胞中熒光素酶表達的活性,,不適用于對細菌熒光素酶進行檢測,。1.實驗***天,消化并接種細胞(根據具體實驗選擇合適的細胞)于35mm細胞培養(yǎng)皿,,置于5%CO2,、飽和濕度的37℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)過夜。2.等細胞密度達到70%時用Luciferase報告基因質粒,、LacZ的表達質粒及其它質粒(根據具體實驗確定)共轉染細胞(根據具體實驗選擇轉染方法,,如磷酸鈣沉淀法、PEI,、lipofectamine2000等均可),。3.轉染24-36h后,吸取培養(yǎng)液,,用預冷的PBS(無鈣和鎂離子)洗滌細胞,。注:熒光酶的酶促反應會被痕量的鈣所抑制,故用磷酸鈣轉染的細胞在收集細胞前應充分洗滌除去含鈣介質,。4.在每個培養(yǎng)皿中加入350μl預冷的harvestbuffer,于4℃或冰上放置10min裂解細胞,。5.在細胞裂解期間,準備足量的ml微量離心管,,將ATPbuffer與luciferinbuffer以1:,,每管100μl。6.依次取等體積的細胞裂解液(100μl)至步驟5中的離心管中,,迅速混勻,,在發(fā)光儀(Luminometer)上讀取吸光值。注:發(fā)光反應會迅速衰減,,將細胞裂解液加入反應液后5s內必須讀取吸光值,。7.確保以相同操作手法讀取全部樣品吸光值后。熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽。宿遷熒光素酶D-熒光素鉀鹽保質期
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注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin),、螢光素鉀鹽只是不同別名,以CAS號115144-35-9為準,。2)注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間,。3)如果要進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,,在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。4)為避免反復凍融,,本產品配制成溶液后建議適當分裝后-20℃或-80℃保存,。為防止氧化,如有條件,,可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存,。5)對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,建議使用新鮮配制的本產品,。6)在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時,,應使用無鈣鎂離子的DPBS,因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,,此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,,從而影響檢測。7)為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。8)本產品只作科研用途!蘇州ATPD-熒光素鉀鹽哪家好